非HLA基因单核苷酸多态性对造血干细胞移植后巨细胞病毒感染的影响

目的 探讨非HLA基因单核苷酸多态性(SNP)对造血干细胞移植后巨细胞病毒(CMV)感染的影响.方法 对2008年7月至2011年12月接受异基因造血干细胞移植的受者及其相应供者64例进行研究.采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针和测序方法检测髓过氧化物酶基因(MPO)、甘露糖结合凝集素基因(MBL)、CD14基因和血管紧张素转换酶(ACE)基因的SNP,结合CMV pp65检测结果,比较CMV阳性组和CMV阴性组ACE、CD14、MPO、MBL基因SNP的差异.结果 ACE 16内含子基因多态性分布:DD型14例(10.9％),ID型72例(56.3％),Ⅱ型42例(38.8％);CD14-159位基因多态性分布:CC型18例(14.1％),CT型81例(63.3％),TT型29例(22.7％);MPO-463位点基因多态性分布:G型100例(78.1％),A型2例(1.6％),GA型26例(20.3％);MBL启动子-550位基因多态性分布:H型28例(21.9％),HL型73例(57.0％),L型27例(21.1％);MBL启动子-221位基因多态性分布:Y型87例(68.0％),YX型38例(29.7％),X型3例(2.3％);MBL外显子1区基因多态性分布:A型94例(73.4％),AB型32例(25.0％),B型2例(1.6％).CMV阳性组和CMV阴性组供、受者ACE、CD14-159位点、MPO-463位点、MBL启动子-221以及外显子1区基因单核苷酸多态性相比较,差异均无统计学意义;但CMV阳性组供者MBL-550位点HL基因频率明显增高,与阴性组比较,差异有统计学意义.结论 供者MBL的单核苷酸多态性对造血干细胞移植后CMV感染有影响.     

在家系完整的单倍体联合第三方脐血移植中研究供受者HLA单倍型和等位基因错配对移植预后的影响北大核心CSCD

目的在HLA—A、-B、-C、-DRB1、-DQB14高分辨基因分型的基础上,分析供受者单倍型和等位基因错配在单倍体联合第三方脐血移植对预后的影响。方法回顾性分析2012年1月至2014年12月期间行单倍体联合第三方脐血移植的230例恶性血液病患者,采用基因测序和寡核苷酸探针杂交方法进行供受者HLA—A、-B、-C、-DRB1、-DQB1高分辨基因分型。结果供受者根据HLA—A、-B、-C、-DRB1、-DQB1基因分型结果及相合度,分为HLA-5／10、-6／10、-7／10、98／10四组,其3年总生存（OS）率分别为48．7％、59．3％、71．1％、38．3％（P=0．068）。供受者HLA-6／10相合组与HLA-5／10相合组相比,3年OS率差异有统计学意义（P=-0．041）。在供受者HLA-6／10相合组：当HLA—I类位点（HLA-A、-B、-C）相合3年OS率为61．5％,与HLA-5／10相合组相比差异有统计学意义（P=0．017）,且HLA—A位点等位基因相合3年OS及无事件生存（EFS）率分别为90．5％8n84．4％,明显高于HLA-5／10相合组（P=0．013,P=0．013）。供受者与脐血单倍型相合88例,不合51例,两者巨核系重建累积发生率分别为95．3％和86．2％（P=0．007）,粒系重建累积发生率分别为98．8％和96．1％（P=0．022）。结论在单倍体联合第三方脐血移植的供者选择中,HLA相合度及等位基因错配对预后均有意义,选择与供受者单倍型相合的第三方脐血可促进移植后造血重建。     

NPM1基因突变与急性髓细胞白血病

NPM1（Nucleophosmin,又称B23、Numatrin或N038）是一种主要的核仁磷酸化蛋白,其定位于核仁的颗粒区,具有重要的肿瘤抑制作用。近一年来的研究发现NPM1基因第12号外显子的突变是急性髓细胞白血病（AML）,尤其是正常核型AML中最常见的一种分子遗传学异常,且与其发病密切相关。对NPM1基因突变的深入研究在AML患者的疗效预测、预后判断及靶向治疗中有着重要的临床意义。     

造血干细胞移植治疗T细胞性淋巴瘤高危患者的临床研究

目的 探讨自体和异基因造血干细胞移植治疗高危T细胞性淋巴瘤的临床疗效和安全性.方法 2002年1月至2009年7月,我院住院行造血千细胞移植的T细胞性非霍奇金淋巴瘤的患者23例,其中行自体逢血干细胞移植的15例,异基因造血干细胞移植的8例.评估移植疗效及安全性.按照Ann Arbor标准和国际预后指数(international prognostic index,IPI)分期评分,结合病理类型,高中危患者18例,高危患者5例,自体造血干细胞移植患者的预处理多采用司莫斯丁、足叶乙甙、阿糖胞苷及马法兰(BEAM)方案,异基因造血干细胞移植患者的预处理多采用改良的马利兰、环磷酰胺(BuCY);全身放疗、环磷酰胺(TBI-CY)方案.观察造血恢复情况,并以Kaplan-Meier方法分析两组患者3年生存率和安全性.结果 所有患者移植后造血功能均顺利重建,中性粒细胞恢复至0.5×109/L的时间为移植后(10.4±2.0)天,血小板恢复至20×109/L的时间为移植后(11.1±3.4)天.自体造血干细胞移植安全性高,而异基因造血干细胞移植患者有更好的长期生存,并发症相对较多.结论 高危组T细胞淋巴瘤侵袭性强,预后差,在缓解后优先选择造血干细胞移植治疗;IPI评分为中高危及复发难治的患者,应行异基因造血干细胞移植,发挥移植物抗淋巴瘤效应,争取获得长期生存.     

系列特异性嵌合体检测在异基因造血干细胞移植中的应用

异基因造血干细胞移植（allo—SCT）后动态监测供受者嵌合状态,因其在判断allo—SCT后转归,提高移植成功率等方面的重要意义,现已成为allo—SCT后患者的常规检测项目。采用STR—PCR方法从分子遗传学上检测嵌合状态已在国内外广泛开展。而近年来开展的系列特异性嵌合体的检测,其敏感性和特异性较混合细胞检测为高,临床指导作用更强。本文就系列特异性嵌合体的检测及临床意义作一综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞与GVHD

源于胸腺的表达转录因子Foxp3的CD4＋CD25＋调节性T细胞具有免疫调节功能,在外周免疫耐受中有重要作用,可控制异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）的移植物抗宿主病（GVHD）,而不影响移植物抗白血病作用（GVL）,许多移植模型和临床试验均在探索中。植入CD4＋CD25＋调节性T细胞后所获得的抗GVHD作用的动物移植模型及早期HSCT临床研究结果表明,CD4＋CD25＋调节性T细胞输注将能极大改变allo—HSCT的现状。     

慢性髓系白血病患者尼洛替尼血药浓度与临床疗效相关性的研究

目的:通过监测慢性髓系白血病慢性期(CML-CP)患者尼洛替尼(NIL)血清谷浓度水平,探讨其与临床疗效及不良反应的关系。方法:根据患者服用NIL剂量将其分为A组(44例),600-800 mg/d;B组(10例),400mg/d。通过液相色谱-单联质谱法分析服用不同剂量NIL治疗的CML-CP患者的血清药物谷浓度,探讨其与患者治疗反应的相关性。结果:54例患者中位NIL血清药物谷浓度为1.71(0.52-5.93)μg/ml,其中A组和B组NIL血清药物谷浓度分别为2.09±1.21μg/ml和0.94±0.27μg/ml,A组非常显著高于B组(P=0.001)。A组中服用NIL治疗12月累计达主要分子学缓解(MMR)者24例,未达MMR者20例;血清药物谷浓度分别为1.70±0.75μg/ml和2.03±0.82μg/ml(P=0.154)。发生Ⅲ-Ⅳ级重度不良反应患者13例,0-Ⅱ级轻度不良反应患者31例;血清药物谷浓度分别为3.09±1.76μg/ml和1.76±0.68μg/ml(P=0.018)。B组服用NIL治疗12月累计达MMR者4例,未达MMR者6例;血清药物谷浓度分别为1.15±0.27μg/ml和0.83±0.24μg/ml(P=0.051)。服用NIL治疗12月累计达MMR比率在A组、B组分别为24/44(54.5%)和4/10(40%),(P=0.494);但Ⅲ-Ⅳ级不良反应发生率在A组、B组分别为13/44(29.5%)、0/10(0%),B组不良反应发生率显著低于A组。结论:CML患者NIL血药浓度个体差异较大,与患者服药剂量及不良反应密切相关,低剂量服用NIL治疗可维持较好的治疗效果且可以明显减少不良反应的发生。     

骨髓增殖性肿瘤患者骨髓间充质干细胞生物学特性及其JAK2突变的研究

目的 研究骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者骨髓间充质干细胞(BMSC)的生物学特性,检测其BMSC是否存在JAK2基因突变.方法 体外分离培养健康志愿者和初诊MPN患者BMSC,光学显微镜下行细胞形态学观察;流式细胞术鉴定BMSC表面标志;检测BMSC成脂、成骨、成软骨分化能力;检测MPN患者BMSC以及外周血或骨髓单个核细胞是否存在JAK2 V617F、JAK2基因12号外显子(JAK2 exon12)突变.结果 MPN患者的BMSC细胞形态、表面标志、分化能力与正常对照相比无明显差异.检测到2l例真性红细胞增多症(PV)、17例原发性血小板增多症(ET)及1例原发性骨髓纤维化(PMF)患者外周血(或骨髓)标本存在JAK2 V617F突变,但未发现其BMSC存在该突变.检测到2例Pv和1例ET患者外周血(或骨髓)标本存在JAK2 exon 12突变,但未发现其BMSC存在该突变.结论 MPN患者BMSC与健康志愿者BMSC的生物学特性无明显差异;在外周血或骨髓单个核细胞JAK2基因突变阳性及阴性的MPN患者中,均未检测到其BMSC存在该突变.     

乳腺癌耐药蛋白在急性髓性白血病中的表达和临床意义

目的探讨急性髓性白血病（AML）患者乳腺癌耐药蛋白（BCRP）的表达与临床耐药的关系。方法应用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）,以MCF7乳腺癌细胞株、HL60白血病细胞株分别作为BCRP及MDR1 mRNA表达的参照标准,以β肌动蛋白（-βactin）为内对照,检测了54例AML患者BCRP mRNA的表达,其中8例患者测定MDR1 mRNA的表达,初步探讨BCRP表达在AML中的临床意义。结果AML中BCRP mRNA表达水平差异较大,BCRP表达由低到高依次为对照组、完全缓解组、初治敏感组和临床耐药组。其中临床耐药组BCRP阳性率显著高于对照组及完全缓解组,差异有统计学意义（P〈0.01及P〈0.05）,BCRP表达与MDR1表达无相关性（P〉0.05）。结论BCRP在AML中表达水平差异较大,与MDR1的表达无关,可能是AML患者临床耐药的一个独立的重要原因,是预后的不利因素。     

正常供体外周血干细胞动员和采集的初步研究

目的探索正常供体外周血干细胞动员方法和采集结果.方法对3例拟做异基因干细胞移植的HLA相合的同胞姐妹进行G-CSF动员,剂量为300μg,每日2次皮下注射,并做临床及实验指标的动态观察.结果1例于动员后第4天采集1次,另2例于第4、5天各采集1次,获足量CD34+细胞用于移植,副作用可耐受,未见远期不良反应.结论G-CSF动员正常供体安全有效.