血、便、痰和尿标本中SARS冠状病毒核酸的检测和病毒基因谱的初步建立

目的：利用冠状病毒全基因组芯片检测SARS患者血、便、痰和尿标本中的冠状病毒核酸并试图建立其基因谱。方法：提取SARS患者血、便、痰和尿样本中的冠状病毒RNA，经全基因组随机反转录和PCR扩增标记成荧光探针，与SARS病毒全基因组芯片进行杂交，同时用体外培养的病毒RNA和从健康人血液中提取的RNA做对照。结果：SARS患者的4种标本中都能检测到冠状病毒核酸的存在，与整个病毒基因组相比，大都为一些不连续的片断。其中尿、痰和便标本中的基因谱较为相似，另外，发现编码S1蛋白的核酸在一些标本中是连续的，具体为23份血标本中有2份是连续的，13份痰标本中有8份是连续的，51份便标本中有48份是连续的，2份尿标本中都是连续的。结论：冠状病毒全基因组芯片能够检测出SARS患者血、便、痰和尿标本中的冠状病毒核酸，并能建立各来源标本中病毒核酸的基因谱。     

脑外伤术后大面积脑梗塞的临床分析

外伤性脑梗塞是颅脑损伤术后的严重并发症之一，尤其是大面积脑梗塞，一旦发生可导致病情急剧恶化，影响病人的预后，增加了手术后的残、死率。本院从2005年9月至2007年9月共收治手术病人284例，其中并发大面积脑梗塞23例，从中获得一些体会，结合相关文献分析如下。     

腺相关病毒载体对心肌细胞感染和外源基因表达的作用

目的:为进一步研究肌质网钙ATP酶转基因在心力衰竭中的质粒价值,并观察腺相关病毒对心肌细胞感染的动态过程和对外源基因的表达能力。方法:构建含肌质网钙ATP酶的腺相关病毒载体(recombinantade-no-associatedvirus-sarcoplasmicreticulumcalciumATPase2a,rAAV-SERCA2a),利用激光共聚焦显微镜观察了活体异硫氰酸荧光素标记的腺相关病毒(fluoresceinisothiocyanate-rAAV,FITC-rAAV)进入心肌细胞的过程,利用流式细胞仪检测含绿色荧光蛋白的腺相关病毒rAAV-GFP感染心肌细胞后绿色荧光蛋白表达细胞的百分率。结果:构建、生产的重组病毒rAAV-SERCA2a的滴度为7×1014v·g/L,并可以有效介导肌质网钙ATP酶基因转录;FITC-rAAV感染心肌细胞后,大约15min可见病毒吸附在细胞膜上,30min时可大部分进入细胞内;未加丁酸钠组腺相关病毒介导的绿色荧光蛋白表达效率最高达33.3%,加用丁酸钠组该数据为48.7%。结论:成功构建了含肌质网钙ATP酶的腺相关病毒载体,该病毒可有效介导目的基因的表达。在体外腺相关病毒能有效感染心肌细胞,感染后的心肌细胞能有效表达外源基因。     

输卵管通液诊疗仪和数字胃肠机在子宫输卵管造影中的应用

目的:探讨输卵管通液诊疗仪、数字胃肠机和非离子型造影剂在子宫输卵管造影中的应用优势。方法:回顾性分析394例接受子宫输卵管造影患者的检查方法、X线造影表现和不良反应。结果:394例患者中,子宫造影正常319例,位置异常30例,形态异常45例;输卵管造影基本通畅263例(双侧71例,单侧192例),输卵管通而不畅104例(双侧17例,单侧87例),输卵管不通302例(双侧31例,单侧271例);输卵管角部不通128例(双侧8例,单侧120例),输卵管峡部不通43例(双侧5例,单侧38例),输卵管壶腹部不通57例(双侧11例,单侧46例),输卵管伞部不通40例(双侧5例,单侧35例),输卵管伞周粘连包裹34例(双侧2例,单侧32例)。无1例发生碘过敏反应,发生下腹部胀痛25例(碘化油9例,复方泛影葡胺4例,碘海醇12例),输卵管间质淋巴逆流7例(碘化油3例,复方泛影葡胺1例,碘海醇3例),静脉逆流2例(碘化油1例,碘海醇1例),残端破裂1例(碘化油1例)。结论:利用输卵管通液诊疗仪、数字胃肠机和非离子型造影剂进行子宫输卵管造影,能准确判断输卵管是否通畅和输卵管阻塞部位,使医务人员远离X线辐射的威胁,并降低了患者的X线辐射剂量和减少了不良反应的发生,是进行子宫输卵管造影的首选方法。     

先天性肱骨发育不全1例

患儿男,3天。出生后发现右上肢明显短小,右手明显短小,掌指骨大部缺失畸形。其父母无近亲结婚,家族中无类似病例,否认孕期有不良药物及放射线接触史。体检:头面部、躯干、左上肢及两下肢均正常,右上肢较左上肢明显短小,右手明显短小呈2指畸形。腹部彩超检查肝脏、脾脏、胰脏和肾脏正常。X线检查:左侧锁骨和肩胛骨形态及大小正常,左侧上肢发育正常,左侧肱骨长约6.1cm,左侧尺桡骨长分别约6·0cm和5.0cm,左手掌指骨形态及大小基本正常,左侧肩关节、肘关节、腕关节基本正常。右侧锁骨弓形下弯,右侧肩胛骨发育明显较左侧为小,右侧肱骨长约2.5cm,…     

锁孔入路超早期显微手术治疗基底节区脑出血

目的 为进一步提高显微手术治疗基底节区脑出血的临床效果。方法 回顾性分析66例经锁孔人路超早期显微手术治疗的基底节区脑出血患的临床资料。结果 66例中死亡13例，存活53例。术后3个月根据ADL分级法结果如下，I级8例；Ⅱ级14例；Ⅲ级20例；Ⅳ级9例；V级2例。结论 手术效果令人满意。我们认为本术式有以下优点：①手术人路解剖结构简单，易于为术掌握；②手术创伤小；③止血彻底。     

逆转录病毒介导的HyTK基因转移及杀伤恶性黑色素瘤细胞的…

用逆转录病毒载体将单纯疱疹病毒胸苷激酶基因导入恶性肿瘤细胞，随后应用药物丙氧鸟苷可选择性杀死肿瘤细胞。本研究中我们将ＨｙＴＫ基因克隆到逆转录病毒载体ＬＸＳＮ中，并初除其中的ＳＶ４０早期启动子，构建成重组逆转录病毒载体ＬＨｙＴＫ／Ｎ，并用该重组病毒转染小鼠恶性黑色素瘤细胞系Ｂ１６细胞，经ＰＣＲ方法检测证明ＨｙＴＫ基因已成功地导入了肿瘤细胞中，且不含可复制的辅助病毒。     

高压氧治疗对小儿外伤性急性弥漫性脑肿胀预后的影响

目的 探讨高压氧治疗对小儿外伤性急性弥漫性脑肿胀预后的影响.方法 回顾性分析2000年1月～2013年1月56例外伤性急性弥漫性脑肿胀患儿的临床资料.其中31例行高压氧治疗,25例未行高压氧治疗,比较两组患儿的觉醒时间及疗效.结果 高压氧组觉醒时间为13.2±4.3天,明显优于无高压氧组（17.8±5.5天,P〈0.05）,高压氧组预后良好率为77.4%,明显优于无高压氧组（48.0%,P〈0.05）,重残及死亡率为22.6%,低于无高压氧组（52.0%,P〈0.05）.结论 在常规治疗基础上结合高压氧治疗,能够显著提高小儿外伤性急性弥漫性脑肿胀的疗效,改善生存质量.     

急性胰腺炎误诊7例分析

急性胰腺炎(AP)发病急、病情重、症状复杂,并常与其他疾病并存,加之临床医生对不典型急性胰腺炎认识不足,易造成误诊。我院2007-02-2010-06对7例急性胰腺炎误诊病例进行回顾性分析,总结经验教训,尽早明确诊断,减少误诊、误治。     

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体临床前神经系统安全性评价

目的 通过评价AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)腺相关病毒注射液对C57BL/6N小鼠中枢神经系统的影响,以确定受试物可能关系到人的安全性问题。方法 共使用40只小鼠,雌雄各半,分别单次尾静脉给予溶媒对照、1.0×10¹³、5×10¹³、1.5×10¹⁴ vg·kg^-1 GC304腺相关病毒注射液,采用功能观测组合试验方法(FOB),分别在给药前和给药后1、4、24、48、96 h,7、14 d观察小鼠运动功能、感觉功能、自主活动等行为,评价受试物对小鼠中枢神经系统的影响,并在给药后第14天检测血清TG、白蛋白和总蛋白改变。结果 本研究前期,采用荧光定量PCR方法检测小鼠脑中目的基因(LPL),其结果显示给予1.5×10¹⁴ vg·kg^-1 GC304 2周后,仍可在脑区内检测到目的基因(LPL)的拷贝数,基于上述数据开展了GC304行为学检测,其结果显示给予GC304后,可引起与药理作用相关的甘油三酯的明显降低,但在给药后2周内,GC304各剂量组...