肝细胞癌分子靶向治疗临床进展

原发性肝癌肿瘤细胞对化疗和放疗的敏感度较低，大多肝癌有多药耐药基因（MDR-1）的上调，且晚期肝癌患常伴肝硬化，不健全的肝功能局限了化疗药物的应用。近年来针对肝癌细胞表皮生长因子受体（EGFR）与血管内皮生长因子（VEGF）的基础与临床研究成果不菲，单克隆抗体（MAbs）与酪氨酸激酶抑制剂（TKI）类的多种靶向治疗药物已相继被用于临床。　[第一段]     

胃癌多药耐药细胞端粒酶活性变化及其机制探讨

目的：探讨人胃腺癌细胞系SGC7901及其多药耐药亚系SGC7901／VCR中端粒酶活性变化及其机制，为胃癌多药耐药机制研究提供新靶点。方法：采用TRAP银染方法检测SGC7901和SGC7901／VCR中端粒酶的活性；应用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测SGC7901和SGC7901／VCR中端粒酶hTERT、Madl及c—myctuRNA的表达；将hTERT启动子构建的报告基因质粒（pGL3B—TRTP），转染入SGC7901和SGC7901／VCR中，应用双荧光素酶报告基因检测系统（Dual—Luciferasereporterassaysystem）检测端粒酶hTERT启动子的活性。结果：SGC7901／VCR细胞中的端粒酶活性及端粒酶hTERTmRNA表达均显著高于SGC7901细胞，且SGC7901／VCR中hTERT启动子的活性显著高于SGC7901，在SGC7901／VCR中捡测到c—mycmRNA的表达，但未检测到MadlmRNA的表达，而在SGC7901细胞中分别检测到MadlmRNA和c—mycmRNA的表达，且SGC7901细胞中c—mycmRNA的表达也高于SGC7901／VCR。结论：端粒酶活性及端粒酶hTERT转录水平升高与胃癌细胞的多药耐药性密切相关，转录因子Madl／c—myc的表达高低是其作用机制之一。     

一种新型增殖型腺病毒治疗肝癌的体外研究

目的 评价增殖腺病毒CNHK500对肝癌细胞的治疗效果。方法 利用病毒增殖实验、细胞活力实验(MTT)、蛋白印迹分析来检测增殖病毒CNHK500在端粒酶阳性的肝癌细胞株HepGⅡ、Hep3B、SMMC7721及正常细胞中选择性增殖和溶解细胞的特性。结果 CNHK500感染人肝癌细胞株HepGⅡ、Hep3B、SMMC7721细胞后大量增殖,在感染后96小时增殖倍数分别为52000、396984．9和632911．3倍,同野生型5型腺病毒(wtAd5)类似。然而在正常细胞中,CNHK500的增殖能力较wtAd5大大减弱,感染96小时后仅增殖3．1～100倍,而wtAd5却高达3160～17357倍。MTT实验观察到在肝癌细胞HepGⅡ和Hep3B中,感染后第7天达到半数杀伤的MOI值(IC50)分别为2和0．01,而在正常成纤维细胞BJ细胞中却高达1000。在常氧情况下,用蛋白印迹可在肿瘤细胞中检测到腺病毒ElA蛋白的表达,但在正常细胞却检测不到。EIB蛋白仅在缺氧条件下(0．1％O2)的肿瘤细胞中表达。结论 实验结果表明CNHK500能有效地选择性在肝癌细胞中增殖、复制、杀伤,而在正常细胞中增殖和溶解细胞能力却大大减弱。联合治疗基因,CNHK500可能为肝癌的治疗提供一种新的策略。     

肝癌外科治疗的近期进展

肝癌的肝脏部分切除术目前,肝脏的部分切除术已甚为安全,根据影像学提示的肝癌部位、与肝内主要结构的关系、转移状况以及对肝脏代偿功能的准确判断,手术死亡率已降至极低水平。此外,肝癌“降期”后的二期切除和复发后的再切除也已成为肝癌外科治疗的成熟模式。近年内在该方面有一些进展,主要基于尽量延长患者“质量生存”这一目的和其他综合治疗手段的增加。     

人原发型肝癌组织cDNA文库的构建

目的 快速构建混合人原发型肝癌组织cDNA文库.方法 从混合人原发型肝癌组织分离总RNA,以含有sfiIB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含sfiIA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sfiI(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN-400柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库.结果 经检测共获得3.96×106个重组子,重组率＞93%,文库经扩增后滴度为3.92×109 pfu/ml.结论 用SMART方法构建的原发型肝癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选获取原发型肝癌特异抗原基因或其他相关基因奠定了基础.     

新型增殖性腺病毒治疗肝癌的实验研究

目的 构建携带p53基因增殖性腺病毒CNHK600-p53载体，研究其对肝癌细胞株抑制效应是否优于Ad-，p53。方法 实验分为两组，单用CNHK600-p53组和单用Ad—p53组；采用四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyl tetrazolium assay，MTT），观察两组对肝癌细胞株的杀伤效应。结果 单用CNHK600-p53组较单用Ad—p53组肝癌细胞株细胞抑制率高；但当细胞抑制率达到80％以上时，两组之间差异无显著性，统计分析采用率的U检验。结论 较Ad—p53相比携带p53基因的CNHK600-p53能更有效抑制肝癌细胞株，CNHK600-p53可望成为肝癌基因治疗的新方法。     

原发性肝癌诊断及治疗进展

由于慢性乙型肝炎在中国的高发病率，在未来的几十年内原发性肝癌仍将是严重危害人民生命健康的重大疾病。目前全球每年新患肝癌病人中（626，000），有55％发生在中国。故中国肝癌诊治形势十分严峻，进一步研究提高原发性肝癌诊治的效果十分必要，就此笔者谈以下几点个人意见。     

高龄小肝癌患者的治疗(附52例报道)

Objective： To investigate the method and efficacy of small liver cancer treatment in the elderly. Methods： Fifty-two cases of elderly small liver cancer patients were treated. Their age ranged from 70 to 82 years with a mean of 74.2. Of all the patients, 90% also had liver cirrhosis and 70% had concomitant chronic disorders of other organs. Fifteen subjects underwent surgery while the remaining 37 cases opted for non-surgical treatment. Results： No deaths occurred as a result of surgery and there were no severe complications after surgery. The 1-, 3- and 5- survival rates after surgery were 93.3%, 80.0% and 66.7%, respectively, and those for non-surgical group were 89.2%, 70.2% and 53.8%, respectively. Conclusion： Surgical resection is still the treatment of choice, but its indication should be strictly followed. Combination with other localized treatment methods may further improve treatment efficacy.     

黄色肉芽肿性胆囊炎合并Mirizzi综合征、胆囊十二指肠瘘一例

患者男，72岁，因“反复右上腹痛9年，加重1个月”入院。9年前反复出现右上腹隐痛，多于进食油腻食物后发作，当时B超诊断“胆囊结石”，1个月来症状复发，伴恶心、呕吐，门诊拟诊“Mirizzi综合征，慢性结石性胆囊炎，胆总管结石”收入院。既往有高血压病和2型糖尿病病史。查体：皮肤巩膜无明显黄染，腹软，无压痛、反跳痛，胆囊未触及，莫氏征阳性，肝脾肋下未及。