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目的:初步探讨S100A6基因对于胃癌细胞生长、增殖状态,细胞周期,凋亡状态等生物学特性及成瘤、浸润转移能力等恶性表型的影响。方法:S100A6基因的RNAi载体通过脂质体介导法转染S100A6基因高表达SGC7901细胞,后经G418压力筛选法获得稳定转染的细胞系,经过RT—PCR法、免疫细胞化学法及Western—bloting法证实。对稳定表达株进行鉴定,而后使用流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成实验法、细胞迁徙实验等方法分析稳定表达株相关生物学特性与恶性表型的变化,每种检测实验均设立RNAi载体稳定转染细胞组、IMGS00空载体稳定转染细胞组和空白SGC7901细胞组。结果:稳定的S100A6基因RNAi细胞系经过RT—PER法、免疫细胞化学法及Western—bloting法证实,mRNA抑制率可达75%左右,蛋白产物的抑制率达85%左右。与转染IMGS00空载体及空白SGC7901胃癌细胞相比转染S100A6RNAi载体的稳定表达细胞株生长减慢,各时间点细胞计数显著低于对照组(P〈0.05);后两组之间亦无显著差异,细胞周期检测显示S100A6RNA干扰组G0—G1期比例显著高于对照组,而G2-M及S期比例显著低于对照组(P〈0.05),其它各期细胞比例均无显著差异。平板克隆形成实验结果显示S100A6RNA干扰组克隆形成率显著低于对照组(P〈0.05);细胞迁徙实验结果提示S100A6RNA干扰组穿膜率显著低于对照组(P〈0.05)。结论:S100A6基因可能具有促进细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,增加处于分裂期细胞的比例可能具有促进细胞分裂作用,并可促进胃癌细胞侵袭转移。降低S100A6基因表达可能抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。 相似文献
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目的 目的 了解输入性恶性疟原虫氯喹抗性转运蛋白基因(Pfcrt基因)K76T点突变发生情况。方法 方法 采集
2008-2012年从非洲、 东南亚等疟疾流行区回国人员恶性疟现症患者血样, 根据恶性疟原虫Pfcrt基因序列设计巢式PCR引
物, 以血样中的恶性疟原虫DNA为模板, 进行巢式PCR?RFLP分析。结果 结果 92份输入性恶性疟现症患者血样中, 突变型Pf?
crt基因50份, 占54.3%; 野生型Pfcrt基因42份, 占45.7%。采自非洲国家 (尼日利亚、 赤道几内亚、 利比里亚等9国) 回国人
员的70份血样中, 野生型Pfcrt基因37份, 突变型Pfcrt基因33份, 分别占52.9%和47.1%; 采自东南亚国家 (缅甸和印度尼西
亚) 回国人员的22份血样中, 野生型Pfcrt基因5份, 突变型Pfcrt基因17份, 分别占22.7%和77.3%。不同地区回国人员Pfcrt
基因突变发生率差异有统计学意义 (χ2
= 6.12, P < 0.05)。结论 结论 来自不同流行区的恶性疟原虫分离株Pfcrt基因突变发
生率也不同, Pfcrt基因K76T位点突变检测在输入性恶性疟原虫氯喹抗性监测中具有应用价值。 相似文献
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目的建立基于编码恶性疟原虫PHIST蛋白特有基因的环介导等温扩增技术。方法在Plasmo DB数据库中,搜索并筛选编码PHIST、在环状体或裂殖体期高表达且恶性疟原虫特有的基因。利用在线软件Primer Explorer V4设计目的基因LAMP引物。采集恶性疟原虫滤纸血并提取基因组DNA。将提取后的恶性疟原虫DNA用超纯水进行10~(-1)、10~(-2)、10~(-3)、10~(-4)倍比稀释,用LAMP法检测其敏感性;采用间日疟原虫、约氏疟原虫、牛带绦虫和日本血吸虫基因组DNA作为对照,用LAMP法评价其特异性。结果共筛选出61个编码恶性疟原虫PHIST的基因。选取环状体期高表达的特有基因PF3D7_1372300和裂殖体期高表达的特有基因PF3D7_1401600建立LAMP技术。基于PF3D7_1372300和PF3D7_1401600基因的LAMP法检测恶性疟原虫的最低限度分别为130.5个/μl和1 305.3个/μl,所获得的恶性疟原虫扩增产物其检测管染色后呈绿色,即阳性。基于PF3D7_1372300和PF3D7_1401600基因的LAMP法扩增恶性疟原虫产物检测管染色后呈绿色,即阳性;而间日疟原虫、约氏疟原虫、牛带绦虫和日本血吸虫的LAMP扩增产物检测管染色后仍呈棕色,即阴性。结论基于PF3D7_1372300基因的LAMP法检测恶性疟原虫敏感、特异、简便、实用,可用于恶性疟流行区现场调查和临床诊断。 相似文献
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先天性食管闭锁在临床上较多见,而单纯的远端食管隔膜型闭锁较罕见,本文报道1例远端食管隔膜型闭锁病例。 相似文献
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朱丹主任医师为重庆市针灸学会原副会长,中国针灸学会耳穴专委会常委、诊断组组长,重庆市名中医,第五批全国老中医药专家学术经验继承人指导老师。从事针灸临床、教学和科研50余年,擅长针灸、耳穴诊治常见病和疑难杂症,其治疗周围性面瘫见解独到,介绍如下。 相似文献
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目的:观察四君子汤、一贯煎、茵陈蒿汤及二陈汤对大鼠酒精性肝病的疗效差异。方法:采用改良的“白酒-吡唑-植物油”混合灌胃法制备大鼠酒精性肝病模型。成模后分别以四方灌胃治疗2周。并以还原型谷胱甘肽片为对照,检测各组大鼠血清ALT、AST、γ-GT活性、ALB浓度,HE染色观察肝组织病理学改变,采用改良Jamall方法检测肝组织羟脯氨酸含量。结果:与模型组比较,茵陈蒿汤及四君子汤组大鼠肝细胞脂肪变性及肝纤维化明显减轻,肝组织羟脯氨酸含量及血清γ—GT活性显著降低(P〈0.05或P〈0.01)。茵陈蒿汤组血清ALB浓度显著升高(P〈0.05);一贯煎组、二陈汤组及还原型谷胱甘肽片组大鼠肝组织病理无明显改善,肝组织羟脯氨酸含量及血清1.GT活性降低均无显著性差异(P〉0.05)。结论:茵陈蒿汤及四君子汤能够有效改善模型大鼠酒精性肝脂肪变与肝纤维化,说明该模型的中医病机为脾气不足,湿热内蕴。 相似文献