细脚拟青霉总多糖对人外周血单核细胞TNF-α水平及增殖活性的影响

目的提取分离细脚拟青霉总多糖 (PtPs) ,探讨其对人外周血单核细胞 (PBMC)的调节作用。方法采用水提醇沉淀法提取PtPs成分 ;用不同浓度的PtPs单独或协同脂多糖 (LPS)在体外刺激PBMC ,酶联免疫法测定TNF α的水平 ,溴化四唑蓝法测定增殖活性。结果所得PtPs制品的纯度为 76 .1% ;适当剂量的PtPs (10 0～ 5 0 0 μg/ml)能够单独或协同LPS提高PBMC对TNF α的分泌 ;还可剂量依赖性地促进PBMC的增殖活性。结论PtPs对体外培养的PBMC具有激活作用 ,可能是发挥免疫药理作用的主要活性成分。     

浙江汉族人群线粒体DNA ND1基因G3316A突变与2型糖尿病

目的：研究与日本人2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）相关的线粒体DNA（mitochondria DNA,mtDNA）ND1基因G3316A突变在浙江汉族T2DM人群中的发生率及其临床意义。方法：采用PCR产物直接测序法对浙江籍汉族人群中无血缘关系的315名T2DM患者及158名正常对照的外周血mtDNA进行检测,并用DNASTAR和Antheprot 5.0软件分析突变位点。结果：在T2DM患者中检测到6例（占1.90%）G3316A突变,对照组中发现3例（占1.90%）突变,突变发生率在两组间差异无显著性（P＆gt;0.05）。携带G3316A位点突变的T2DM组与无该突变的T2DM组之间的临床特点（发病年龄、体重指数和血糖水平等）比较差异亦无显著性。蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和不规则卷曲的构成比没有发生改变。结论：线粒体DNA ND1基因G3316A突变可能与浙江汉族人群T2DM的发生无关,仅为人群中的基因多态性。     

两个携带线粒体12S rRNA 1494C>T突变的耳聋家系的遗传学特征

Objective To evaluate the effect of mitochondrial DNA(mtDNA) secondary mutations,haplotypes,GJB2 gene mutations on phenotype of 1494C ＞ T mutation,and to study the molecular pathogenic mechanism of ma...     

中医药治疗泌尿系结石临床研究进展

泌尿系结石是泌尿系统中晶体物质和有机物异常积聚形成的产物,是一种世界范围的常见病、多发病,其发病率呈上升趋势[1]。泌尿系结石属中医学中的砂淋、石淋,其发生原因历代书籍记载颇详,《诸病源候论》云：＂诸淋者,由肾虚而膀胱热故也。＂《中藏经》云：＂虚伤真气,邪热渐强,结聚而成砂。又如以水煮盐,火大水少,     

人工肝支持系统对肝衰竭患者细胞因子影响的研究

目的观察人工肝支持系统对肝衰竭患者血清IL-6、TNF-α、IL-12p70和INF-γ的清除效果,进一步探讨人工肝支持系统在肝衰竭治疗中的意义。方法采用CBA法检测63例肝衰竭患者(29例为人工肝结合内科治疗组,34例为内科治疗组)治疗前后细胞因子水平,比较它们在治疗前后的变化。结果肝衰竭患者细胞因子水平治疗前、后均高于健康对照组(均P<0.05),有效组治疗后,IL-6、TNF-α水平均较治疗前下降明显(均P<0.05),且人工肝有效组下降的更明显,IL-12p70和IFN-γ有一定水平的上升,人工肝组IL-12p70水平治疗前与治疗后差异有统计学意义(P<0.05),IFN-γ水平差异无统计学意义(P>0.05),内科有效组虽有上升,但差异无统计学意义(均P>0.05);无效组治疗后,IL-6、TNF-α水平保持较高水平,治疗前后差异无统计学意义(均P>0.05),IL-12p70和IFN-γ治疗后水平下降,但前后差异无统计学意义(均P>0.05)。结论人工肝治疗后对IL-6、TNF-α均有不同程度的清除作用,而IL-12p70和IFN-γ却有一定程度的升高,从而减轻免疫反应对肝细胞的损害,有助于改善肝衰竭患者的预后。     

蜂花粉水提取液对实验性胃粘膜损伤的保护作用

目的研究蜂花粉水提取液对胃粘膜的保护作用。方法分别用无水乙醇、０．６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ对小鼠灌胃复制实验性胃粘膜损伤的动物模型，用福尔马林固定后观察并记录胃粘膜损伤程度，并与事先用蜂花粉水提取液灌胃的小鼠进行比较分析。结果无水乙醇、０．６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ对小鼠胃粘膜均可导致小鼠胃粘膜出血及溃疡性损伤，但事先用蜂花粉水提取液灌胃，可显著减轻无水乙醇、０．６ｍｏｌ／ＬＨＣｌ所致的小鼠实验性胃粘膜损伤的程度，主要表现为胃粘膜出血点减少、溃疡面积缩小。结论蜂花粉水提取液对胃粘膜具有保护作用。     

受磷蛋白重组腺病毒的制备与鉴定

目的 构建含受磷蛋白PLB基因的重组腺病毒载体,为研究受磷蛋白PLB的生物学功能提供工具。方法 将RT-PCR获得的受磷蛋白PLB cDNA克隆至pShuttle-CMV载体,Pme Ⅰ酶切线性化后,电转化至含有腺病毒骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,从而获得重组腺病毒载体,Pac Ⅰ酶线性化该重组载体,转染293细胞进行病毒的包装和扩增,经超离心对重组病毒Ad-PLB进行纯化;测定病毒效价后,体外感染大鼠心肌细胞H9C2,Western blot法验证腺病毒病毒介导的重组PLB蛋白表达。结果 成功构建了重组腺病毒载体,体外包装制备了PLB的重组腺病毒,扩增纯化后的病毒效价达6.25×10¹⁰/ml,能有效介导PLB在心肌细胞中的重组表达。结论 过表达受磷蛋白PLB的重组腺病毒载体构建成功,为之后受磷蛋白PLB的相关生物学功能研究奠定了基础。     

HRM技术检测β-地中海贫血IVS-2-654(C＞T)与-28(A＞G)突变方法的建立及初步应用

目的 建立基于高分辨率熔解曲线(HRM)技术快速筛查β-地中海贫血(简称β-地贫)基因突变的方法,并初步探讨其临床应用价值.方法 选取温州地区人群β-地贫常见基因突变位点IVS-2-654(C＞T)与-28(A ＞G)作为研究位点,采用TA克隆技术构建其质粒DNA作为模板或基因分型对照,建立基于HRM技术检测β-地贫基因突变的方法,并对该方法的特异性、重复性、灵敏度等指标进行方法学评价.收集2009年11月至2010年10月温州医学院附属第二医院、育英儿童医院临床疑似β-地贫患者117例,抽取外周血标本,提取外周血白细胞DNA,用该方法进行IVS-2-654(C＞T)与-28(A ＞G)位点的HRM检测,并将检测结果与双向直接测序做比较.结果 建立的HRM技术可对β-地贫IVS-2-654(C＞T)与-28(A＞G)突变位点进行检测,未见非特异性扩增片段;不同基因型HRM检测的批内、批间熔解温度(Tm)值的变异系数(CV)均＜0.1％;该法最低可检出103拷贝的DNA模板,并可检测低至10％的突变存在.117份临床疑似β-地贫患者样本经该法检测,45份为IVS-2-654(C＞T)杂合突变型,9份为-28(A＞G)杂合突变型,未发现2个位点的纯合突变型基因;此结果与直接测序所得基因型结果完全一致.结论 建立的HRM技术操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于β-地贫基因突变筛查,并为β-地贫其他突变位点的检测及基因组单核苷酸多态性分型等提供了一个通用的技术平台.     

瑞格列奈与二甲双胍治疗2型糖尿病磺脲类失效46例

目的 探讨瑞格列奈联合二甲双胍治疗对磺脲类合并二甲双胍失效的2型糖尿病患者的空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白的影响.方法 将46例经磺脲类、二甲双胍治疗失效的2型糖尿病患者的磺脲类药改为瑞格列奈0.5～2 mg,3 次d,二甲双胍剂量不变.观察12周内不同时间空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白的变化.结果 空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白治疗前后差异有显著性(P＜0.01).结论 瑞格列奈联合二甲双胍可有效控制磺脲类合并二甲双胍治疗失效的2型糖尿病患者的空腹血糖、餐后2 h血糖及糖化血红蛋白.