中药材半夏及其混伪品的DNA条形码鉴定研究

目的：采用ITS2序列对中药材半夏及其混伪品进行DNA条形码鉴定研究,为规范中药材半夏的市场流通,保障临床用药安全及疗效提供参考依据。方法：对半夏及其混伪品共59份样品,通过DNA提取及聚合酶链式反应（PCR）扩增其ITS2序列,并采用Mega6.0软件进行多序列比对,计算种内及种间K2P遗传距离,采用邻接（NJ）法构建NJ系统聚类树。采用相似性搜索法、最小距离法、NJ 树法考察ITS2序列的鉴定能力。结果：半夏药材的ITS2序列长度为251 bp,应用相似性搜索法表明ITS2序列能够准确鉴定半夏药材及其混伪品;半夏种内最大K2P距离小于半夏与混伪品间的最小K2P距离;NJ树显示半夏药材可与其混伪品明显分开。结论：ITS2序列能准确、稳定鉴定中药材半夏药材及其混伪品。     

ITS2序列鉴定“功劳叶”药材及其近缘混伪品

目的：中药材同名异物现象对临床安全用药造成了潜在的威胁。本研究对两种“功劳叶”药材及其近缘混伪品进行分子鉴定,以确保临床准确用药。方法：本实验收集枸骨、阔叶十大功劳和细叶十大功劳及其近缘混伪品共9个物种45份实验样品,用改良的CTAB法提取总DNA,扩增ITS2序列并双向测序,采用CondonCode Aligner V 4.2.4对测序峰图进行拼接,应用MEGA 6.0进行序列变异分析,计算种内种间Kimura 2-Parameter（K2P）遗传距离,构建系统邻接（NJ）树。结果：基于ITS2序列的序列变异、最近距离法和系统邻接树分析结果均表明,冬青属枸骨以及十大功劳属阔叶十大功劳和细叶十大功劳均能与其混伪品很好地区分开。结论：ITS2序列可有效区分两种“功劳叶”药材及其近缘混伪品,为临床准确用药提供依据。     

五倍子鞣质提取物对白假丝酵母的抗菌活性研究

目的 研究五倍子鞣质提取物对白假丝酵母的体外抗茵活性.方法 通过超声波提取五倍子有效成分鞣质,福林-酚比色法检测鞣质含量,采用微量稀释法检测五倍子鞣质提取物对白假丝酵母的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC),以最低抑茵浓度药物作用白假丝酵母6、12、24h,通过普通光学显微镜直接观察白假丝酵母形态结构的变化,并用吖啶橙/溴化乙锭染色,通过荧光显微镜观察白假丝酵母的死亡方式.结果 五倍子鞣质提取物对白假丝酵母的最低抑菌浓度为10.76 mg/mL,最低杀菌浓度为21.52mg/mL;五倍子鞣质提取物可导致白假丝酵母细胞变形,形态结构改变,最终导致其死亡;同时抑制细胞发芽和假菌丝的形成.结论 五倍子鞣质提取物对白假丝酵母有抑制和杀灭作用.     

普通高等医学院校实施双语教学的探讨

随着全球一体化进程的加快,我国的高等教育为了逐步与国际接轨,开展了双语教学.而目前在普通高等医学院校中开展双语教学,在学生外语、教师师资水平、教学条件等方面都存在一定问题;因此,在培养目标明确的情况下,进行双语教学理论和实践的探讨,以便推动双语教学在普通高等医学院校的顺利实施.     

人工栽培川贝母种苗质量标准研究

目的 对人工栽培川贝母幼苗形态进行研究,建立幼苗质量分级标准.方法 测定1～3 年生川贝母植株形态指标,将株高、叶长、叶宽、鳞茎高、鳞茎直径、根数与鳞茎单粒重进行相关性分析,筛选出极显著相关因子,采用快速样本聚类法(K-means cluster)进行分级.结果与结论 1年生川贝母鳞茎单粒重与株高等相关性不显著;2～3...     

优化综合ICU护患沟通流程 提高患者及家属满意度

目的改进综合ICU护患沟通流程,提高患者及家属满意度。方法选取入住综合ICU患者120例,随机分为对照组和干预组,每组60例。对照组采用常规的护患沟通方法,干预组采用优化的护患沟通流程。在患者入住科室治疗3天后,分别对两组病人及其家属进行满意度调查。结果干预组护患沟通满意度明显高于对照组。结论使用优化后的护患沟通流程,能有效克服常规护患沟通过程中存在的缺陷和不足,有效提高患者及家属满意度,避免不必要的护患纠纷。     

基于ITS2条形码的中药材天南星及其混伪品DNA分子鉴定

该研究收集天南星及其混伪品7种,共58份样品,通过DNA提取和PCR扩增,经注释后获得其ITS2条形码,然后进行序列变异分析和NJ树聚类分析。结果表明天南星3种基原天南星、异叶天南星和东北天南星的种内K2P距离均小于其种间K2P距离,在NJ聚类树上天南星3种基原分别聚为独立的支。天南星3种基原与天南星混伪品聚为不同的支。因此,ITS2作为DNA条形码可以鉴定天南星3种基原及其混伪品,DNA条形码技术可为天南星及其混伪品的鉴定提供新的方法。     

川贝母种子在高原产区的繁殖研究

目的：寻求川贝母在高原地区种子繁殖所需求的最佳条件,总结出人工培植的最佳时间和方法。方法：利用当地的牛粪腐殖土和小拱棚对川贝母苗床进行处理。结果：川贝母种子经保湿储藏发育成熟后,经不同播种期试验,以次年3 月初播种效果为最好,盖度试验以1 cm 牛粪腐殖土为最好。每年设施农业内生长期达到160 天,自然条件下每年生长期为50~60 天。结论：利用塑料大棚在以腐殖土为基质的土壤中,采用遮阳网遮阳,喷雾保湿大面积繁殖川贝母,能有效延长川贝母生长期,提高1 年生小鳞茎保有率,提高川贝母产量。     

NF-κBp65、EGFR、P16在宫颈腺癌中的表达及临床意义

目的:研究NF-κBp65、EGFR及P16在宫颈腺癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组化法检测宫颈腺癌及正常宫颈组织中NF-κBp65、EGFR及P16蛋白表达情况,并分析其与临床病理参数的关系。结果:在宫颈腺癌组织中NF-κBp65、EGFR及P16蛋白表达率与正常宫颈组织中的NF-κBp65、EGFR及P16表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);NF-κBp65蛋白的表达与淋巴管浸润及淋巴结转移有关(P<0.05),与其他病理参数无关(P>0.05);EGFR蛋白的表达与临床病理参数均无关(P>0.05);P16蛋白的表达与组织学分级有关(P<0.05),与其他病理参数无关(P>0.05)。NF-κBp65的表达与EGFR的表达呈正相关(r=0.359,P<0.05),NF-κBp65的表达与P16的表达无相关性(r=-0.307,P>0.05),EG-FR的表达与P16的表达呈正相关(r=0.379,P<0.05)。结论:NF-κBp65、EGFR及P16蛋白的表达与宫颈腺癌的发生和进展有一定的相关性,P16蛋白可以作为宫颈腺癌早期诊断的肿瘤标记物。     

斯氏并殖吸虫线粒体Cytb基因的扩增、测序以及遗传进化分析

目的扩增出斯氏并殖吸虫线粒体Cytb（cytochromeB）基因片段并测序,分析该基因对吸虫遗传分类的意义。方法提取斯氏并殖吸虫成虫基因组DNA,PCR扩增线粒体Cytb基因,克隆质粒并测序。在NCBI的GeneBank中作相似性和同源性检索,用DNAsis等软件分析这些吸虫的线粒体Cytb基因,采用最大简约法（MP）和邻位相连法（NJ）构建系统进化树,用MEGA4软件对遗传距离进行计算分析。结果获得542bp的斯氏并殖吸虫线粒体cytb基因片段,通过在Gene—Bank数据库中Blast发现,斯氏并殖吸虫的Cytb序列与日本血吸虫（中国流行区虫种）、异盘并殖吸虫、哈氏并殖吸虫以及巨睾吸虫等7种吸虫有相似性,斯氏并殖吸虫与日本血吸虫的遗传距离最近。结论线粒体国tb基因可作为吸虫遗传进化分类的依据之一,也是斯氏并殖吸虫与血吸虫等易出现较高的交叉反应率的原因之一。