转染白介素18的骨髓基质干细胞对脑荷瘤大鼠的免疫调节作用

目的研究转染白细胞介素18的骨髓基质干细胞移植入胶质瘤荷瘤大鼠体内后的免疫调节作用.方法培养骨髓基质干细胞,转染白细胞介素18,以未转染的骨髓基质干细胞为对照.ELISA方法检测BMSCs/IL-18培养上清液不同时间点的IL-18含量.建立荷瘤模型,进行BMSCs/IL-18移植,而后ELISA方法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-10浓度.将BMSCs/IL-18、C6细胞、荷瘤鼠淋巴细胞共同培养观察体外细胞毒作用.流式细胞术检测荷瘤鼠脾细胞淋巴细胞亚群.TUNEL法检测肿瘤内部细胞凋亡情况,抗CD34染色观察微血管密度.结果BMSCs/IL-18可长期稳定地分泌IL-18,移植到荷瘤大鼠体内后,其IL-2、IFN-γ血清浓度明显增高,IL-10明显下降.流式细胞术检测显示CD4 、CD8 T 淋巴细胞比例均有增高.接受BMSCs/IL-18移植的荷瘤大鼠再次种植C6细胞后,可诱发快速的免疫反应.体外细胞毒试验显示,BMSCs/IL-18可明显激活淋巴细胞裂解C6细胞.TUNEL检测显示,在Group 2 大鼠中,肿瘤内部每视野凋亡细胞数为15.74±6.23,高于其他各组.微血管密度检测显示,Group 2大鼠脑肿瘤微血管密度(6.51±2.71)明显低于Group 1(13.52±3.06)、Group 3(12.67±2.61)及Control group(14.84±1.47).结论BMSCs/IL-18 可通过诱导Th1细胞因子,抑制Th2细胞因子,激活细胞毒性T淋巴细胞,产生明显的抗肿瘤效果.     

纳洛酮配合针刺对婴幼儿外伤性脑梗死颅脑神经保护作用的临床研究

目的观察纳洛酮配合针刺对婴幼儿外伤性脑梗死颅脑神经的保护作用。方法选择62例外伤性脑梗死患儿,随机分为2组,对照组采用常规治疗配合纳洛酮注射液,治疗组在对照组治疗的基础上再配中医针刺治疗,比较2组神经机能缺损评分量表（NIHSS）评分、BI指数,评定颅脑神经损伤程度,并用ADL量表,分别于14d、21d评定临床疗效。结果治疗前2组NIHSS评分、BI指数比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后2组NIHSS评分、BI指数比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。治疗后14、21d治疗组的总有效率优于对照组（P〈0.05）。结论纳洛酮配合针刺治疗婴幼儿外伤性脑梗死,能有效的保护颅脑神经,促进受损的神经功能恢复,提高临床疗效。     

慢病毒载体介导半乳凝素-3-shRNA沉默基因对肿瘤细胞的影响

目的:构建干扰半乳凝素-3(Galectin-3)的重组U6慢病毒质粒,体外评价和观察内源性小RNA干扰效果及对细胞增殖和凋亡的影响.方法: 根据siRNA设计原则,设计合成短发夹DNA,用于体内转录合成干扰Galectin-3编码序列的发夹RNA.连接,筛选,酶切,鉴定pGCL-GFWU6 Gal-3shRNA-1;以含无关序列发夹结构的质粒载体为对照,感染乳腺癌细胞系,采用RT-PER和Western Blot检测mRNA和蛋白表达水平与对照组的差别;MTT法和流式细胞检测其对细胞增殖、凋亡的干扰情况.结果: 测序证实重组质粒构建成功,体外试验表明,Galeetin-3的mRNA和蛋白表达均一致降低,转染组为(0.028%),阴性对照组为(0.617%),空白对照组为(0.992%),转染组mRNA干扰效率达95%(P<0.05);Galectin-3蛋白表达明显下调,与阴性对照组和空白对照组相比较,差异有统计学意义(P<0.05).MTT检测结果转染组为(0.40±3.69)%,阴性对照组(0.71±0.16)%;转染组和阴对照组问差异均有统计学意义(P<0.05).细胞凋亡百分率为68.78%.结论: 慢病毒介导的Galectin-3-shRNA成功在体外敲减了肿瘤细胞的目的蛋白,影响了肿瘤的发生与发展.