细胞凋亡与寄生虫、宿主相互作用的关系

细胞凋亡(apoptosis)是由自稳机制促发的主动性细胞死亡。这一过程既与个体的形成有关,又与免疫机制、器官细胞量的平衡以及多种细胞因子、生长因子、激素等的作用机理有关。近年,寄生虫与宿主相互作用中发现的细胞凋亡现象,日益受到重视。明确寄生虫感染状态下细胞凋亡的调控机制及意义,选择性地促进或抑制细胞凋亡的发生,将有助于达到防病、治病、杀虫的目的。本文就细胞凋亡对寄生虫与宿主相互作用的影响作一综述。一、细胞凋亡形态学特征、生化改变及发生机     

蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂的初步观察

目的观察体外培养的蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂。方法用改良的TYI-S-33培养基培养贾第虫。从培养第6h开始,每间隔2h取分裂的细胞直至第24h,制备涂片,Giemsa染液染色,用光镜和透射电镜观察细胞分裂状况。结果有丝分裂前期:染色质凝集形成细长的染色质丝;中期:形成大小约1μm的棒状染色体,且全部排列在细胞核中央,或分散在核内;后期:姐妹染色单体分开,向细胞核两极移动,核膜拉长;末期:核膜中间向内缢束呈葫芦状,细胞核缢裂成两个子核,随即进行胞质分裂。结论蓝氏贾第鞭毛虫滋养体有丝分裂与典型真核细胞相似,但分裂期核膜始终存在,为半开放式分裂。     

苦参乙醇提取物体外抗贾第虫药物作用的观察

对苦参乙醇提取物体外抗贾第虫药物作用做了观察。实验结果表明，将此药物与贾第虫滋养体共同培养５ｈ后，导致９９％虫体致死的浓度为５ｇ／Ｌ，随着药物浓度的降低，致死率相应减少；该药的半数致死浓度为１．５ｇ／Ｌ，在此浓度的最短作用时间为３ｈ。对照试验结果显示，在相同时间作用下，阿苯哒唑导致９３．８％虫体致死的浓度为０．２ｇ／Ｌ。     

4株蓝氏贾第虫总细胞蛋白质等电聚焦电泳分析

用薄层等电聚焦电泳法，对分离自我国北京、四川、福建以及美国的４株蓝氏贾第虫总细胞蛋白质做了分析。结果表明，国内３株的带型基本一致，各带分布于标准ｐＩ３．６～８．３之间；美国１株的带型与国内３株的不同，多出２条区带，分别位于ｐＩ７．８和７．１处。提示中美虫株在蛋白质组成成分上存在差异，其原因可能系地理分隔所致。     

天津市贾第虫病流行情况调查

由兰氏贾第虫所致的贾第虫病是一种常见的肠道原虫病,可导致腹泻、吸收障碍等。我们于1984年对天津市区、郊区居民及小学生的本虫感染情况进行了调查,报告如下。     

中外七个贾第虫株DNA限制性酶切片段长度多态性（RFLP）比较研究

本文首次对分离自中国、美国、柬埔寨和澳大利亚７株贾第虫基因组ＤＮＡ，用６种限制性内切酶消化并进行琼脂糖电泳，分析比较它们基因组ＤＮＡ酶切片段多态性；同时用生物素标记的贾第虫全基因组ＤＮＡ探针对国内４株贾第虫ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交。结果表明，７株贾第虫ＤＮＡ经ＨｉｎｄⅢ和ＢｇｌⅡ酶切后，可将国内４株和国外３株贾第虫区别开；国内４株贾第虫ＨｉｎｄⅢ、ＢｇｌⅢ、ＨａｅⅢ、ＰｓｔⅠ和Ｈｉｎｆ５种内切酶酶切图谱一致；而经ＡｌｕＩ酶切后，Ｃ１和ＣＲ的ＤＮＡ图谱一致，Ｃ２和Ｃ３的也一致；Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交显示，国内４株间的ＤＮＡ杂交带相似，提示分离自人和兔的贾第虫无严格的宿主专一性，二者可产生交叉感染；国内３株与国外２株人贾第虫ＤＮＡ图谱存在差异，其原因似与地理隔离有关。     

基于磷酸丙糖异构酶基因序列的蓝氏贾第鞭毛虫分子系统发育的研究

[目的 ]探讨蓝氏贾第鞭毛虫种内系统发育及遗传多样性。 [方法 ]对不同来源虫株的磷酸丙糖异构酶(tim)基因进行 PCR扩增、序列测定后 ,用简约法和 NJ法构建分子系统树进行系统学分析。 [结果 ]在所测序列中共有 12 4个位点存在变异 (2 3% ) ,且大多数为发生在第三密码子的同义突变 ,两种构树方法所得两树的分枝结构相似 ,均将受试的 16株蓝氏贾第鞭毛虫分为明显的两组。 [结论 ]tim基因可作为研究蓝氏贾第鞭毛虫群体遗传结构一个有效的遗传标记     

蓝氏贾第鞭毛虫C2株rRNA基因ITS1-5.8SrDNA-ITS2序列测定与分析

内转录间隔区（internal transcribed spacer ITS）为真核生物rRNA基因（rDNA）中串联重复存在的大小亚基间的内转录间隔序列.研究表明,贾第虫rDNA包含18S、5.8S和23SrDNA,3者的内转录间隔区为ITS-1和ITS-2,前者位于18S和5.8SrDNA之间,后者位于5.8SrDNA和23SrDNA间.18S、5.8S和23SrDNA序列较保守,进化速率较慢,不同种生物间同源性较大;而ITS序列并不保守,进化速率较快,种间同源性较小,是鉴定生物种株的一个十分有效的分子标志.研究表明,不同宿主和不同地域来源的蓝氏贾第虫虫株存在遗传学差异.     

盐城市狂犬病毒核蛋白及糖蛋白基因序列分析

目的对江苏省盐城市狂犬病毒核蛋白及糖蛋白的基因进行遗传学分析,揭示流行于该地区的狂犬病毒与人用及兽用狂犬病疫苗株间的差异。方法以直接免疫荧光法检测犬脑标本,用阳性犬脑组织悬液接种鼠脑分离病毒。以RT-PCR法扩增病毒核蛋白及糖蛋白全基因片段,克隆测序后进行遗传学分析。结果从58份犬脑中发现两份样品狂犬病毒抗原阳性,分别命名为Jiangsu Yc87与Jiangsu Yc88。从两份阳性样品均扩增到全N基因与G基因序列。阳性犬脑组织接种乳鼠后,从Jiangsu Yc88样品分离到狂犬病毒。分析发现两株病毒均为基因1型狂犬病毒,两株病毒间N基因与G基因的核苷酸及氨基酸的同源性分别为99.8%和99.7%,氨基酸的同源性分别为99.3%和98.8%。与已知的狂犬病毒相比,两株病毒与我国宁夏、河南、湖南、印度尼西亚病毒株的同源性较高,N基因的核苷酸及氨基酸同源性分别为86.3%～98.7%和95.4%～99.8%,G基因核苷酸及氨基酸同源性分别为82.1%～92.1%和94.1%～95.7%;Jiangsu Yc87与Jiangsu Yc88N基因的氨基酸序列分别发生了4和2处氨基酸的替换,G基因的氨基酸序列发生了29和26处氨基酸的替换。与当前使用的疫苗株相比,两株病毒与CTN疫苗株同源性较高,N基因与G基因核苷酸同源性分别为90.2%和87.1%～87.3%,氨基酸同源性分别为98.4%和91.7%～92.3%,但G基因膜外区与所有疫苗株无显著差异;N基因的氨基酸序列分别发生了5和6处氨基酸的替换,G基因的氨基酸序列发生了31和28处氨基酸的替换。结论两株狂犬病毒为基因1型狂犬病毒,其N基因和G基因的核苷酸序列以及推导出来的氨基酸序列与已知的1型狂犬病毒株及疫苗株均有一定的差异。     

中国蓝氏贾第虫虫株分离培养、基因型及其细胞核(结构功能和进化)研究

蓝氏贾第虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)在医学上是导致腹泻的常见病原体,并可因机会性感染危及艾滋病患者的生命,在生物学方面因其属源真核生物(archezoa),在生物进化上处于特殊地位,是研究细胞核结构、功能和进化的良好模型。 1.本研究应用细胞培养、电子显微镜、基因扩增、基因分型、DNA序列分析以及Western blot等先进分子生物学技术。从国外引进最新计算机软件(DNAstar)对实验数据进行分析。首次成功地在国内建立了我国自己的3株贾第虫纯(无菌)培养虫株,按WHO推荐的命名法予以命名:北京株为