r-H2AX在不同食管癌株系中的剂量时间效应特点

目的   通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。 方法   将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy 的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效应特点。 结果   (1) ECA109细胞和TE13细胞随着放疗剂量的增加,r-H2AX表达量第一次最高点出现的时间逐渐提前。(2) ECA109细胞接受低剂量照射后,r-H2AX在24 h内能够恢复到放疗前的水平,且剂量越低恢复越快;TE13细胞接受1、2、4和8Gy照射后24 h内r-H2AX均不能恢复到放疗前水平。(3)在0.5、1、2 h这3个时间点,随着放疗剂量的增加,r-H2AX的表达量并不都是逐渐增加。 结论   TE13细胞较ECA109细胞敏感,照射后r-H2AX更难恢复到正常水平。     

启膈方对小鼠前胃癌转移相关因子的影响

目的观察启膈方对小鼠前胃癌移植瘤的上皮性钙黏附蛋白（E-Cad）、基质金属蛋白水解酶-2（MMP-2）、微血管密度（MVD）、血浆α颗粒膜蛋白（GMP-140）、血栓素B2（TXB2）的影响。方法小鼠前胃癌（FC）细胞接种在30只615小鼠右腋皮下,接种后随机分为启膈方组、氟尿嘧啶（5-FU）组、空白对照3组,每组各10只。接种后16 d摘除小鼠眼球取血,获得血浆备用,处死小鼠,剥离肿瘤组织。用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶（SP）法检测各组肿瘤组织E-Cad、MMP-2、MVD的表达,用放射免疫法检测各组小鼠血浆TXB2水平,用酶联免疫法检测小鼠血浆GMP-140水平。结果启膈方组E-cad的表达强于空白对照组、5-FU组（P〈0.01）,5-FU组E-cad的表达强于空白对照组（P〈0.05）。空白对照组MVD明显高于启膈方组（P〈0.01）和5-FU组（P〈0.05）,启膈方组低于5-FU组（P〈0.05）。启膈方组、5-FU组的MMP-2表达弱于空白对照组（P〈0.05）、5-FU组与启膈方组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。启膈方组、5-FU组的血浆GMP-140与TXB2含量均明显低于空白对照组,尤其是血浆GMP-140含量,启膈方组、5-FU组与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,启膈方组与5-FU组之间差异无统计学意义（P〉0.05）。血浆TXB2水平,启膈方组低于5-FU组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论启膈方可通过提高E-Cad的表达,降低MMP-2的表达,降低MVD,降低小鼠血浆GMP-140、TXB2水平,起到抑制肿瘤转移的作用。     

启膈方对人胃癌MGC细胞增殖、运动能力及分泌MMP-2、MMP-9酶活性的影响

目的观察启膈方对人胃癌MGC细胞增殖能力、运动能力及分泌基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9活性的抑制作用。方法体外培养人胃癌MGC细胞,随机分为启膈方小、中、大剂量组及5-氟尿嘧啶（5-Fu）组、空白对照组,共5组。启膈方小、中、大剂量组加入不同浓度的中药,其终浓度为35、70、140mg／mL;5-FU组加入5-Fu使其终浓度为50μg／mL,空白对照组加入PBS。分别用MTT法检测肿瘤细胞的增殖,琼脂滴法检测肿瘤细胞运动能力,明胶酶谱法检测肿瘤细胞分泌MMP-2、MMP-9的活性。结果启膈方对MGC细胞体外增殖有明显的抑制作用,并随着药物浓度增加其抑制作用更加明显。启膈方各剂量组、5-Fu组运动能力较对照组明显弱,运动速度慢,差异有统计学意义（P〈0．05）。启膈方各剂量组细胞分泌MMP-2、MMP-9活性明显较空白对照组减弱（P〈0．05）,其中MMP-2活性减弱更明显（P〈0．01）。结论启膈方可通过抑制MGC肿瘤细胞的增殖、运动能力及MMP-2、MMP-9的活性来抑制转移。     

同步化细胞的制备

同步化细胞的制备０５００１１河北医学院附属第四医院张志国，卢付河生长着的细胞处于细胞周期的各个阶段，其中大部分细胞位于Ｇ；、Ｓ、Ｇ；或Ｇ。期。用人工的方法使这些细胞大部或全部进入细胞周期同一期的方法称细胞的同步比。同步比后，由于细胞内外环境处于相似阶...     

食管癌原发肿瘤及亚临床灶MMP-2和Survivin基因表达的初步研究

目的 对食管鳞癌癌周亚临床病灶组织和与之相衔接的分化正常的食管组织中MMP-2基因和Survivin基因的表达情况进行检测,为从分子水平研究食管鳞癌的放疗靶区提供参考.方法 对34例食管鳞癌患者的癌及癌周组织标本进行连续取材并应用免疫组化法检测MMP-2基因和Survivin基因在癌组织和癌周组织的表达情况,测量两基因在癌周食管组织中的阳性表达范围,并对该范围值与肿瘤分期、肿瘤纵向长度的关系进行分析.结果 MMP-2、Survivin基因在癌组织中阳性表达率分别为85%、76%,在阳性表达标本中癌周亚临床病灶的分别为83%、85%,相邻正常食管组织中的分别为79%、85%;亚临床病灶组织中MMP-2、Survivin基因的阳性表达水平明显高于癌周正常食管组织的表达(χ2=6.46,P=0.028;χ2=16.15,P=0.001).食管上、下两端癌阉食管组织中MMP-2基因的阳性表达范围为17.2～70.4 mm和15.0～82.4 mm,其中97%以上患者的表达范围＜70 mm;Survivin基因阳性表达范围为3.7～76.4 am和16.1～56.3 mm,其中96%以上患者的表达范围＜70 mm;两基因在癌周食管组织中的阳性表达范围随肿瘤分期的进展呈增加趋势.随着肿瘤纵向长度的增加两基因在癌周食管组织中的阳性表达纵向范围呈现增加趋势,其中Survivin基因在癌周食管上下端中的阳性表达范围与肿瘤的纵向长度之间存在正相关性(r=0.566、0.416,P=0.003、0.034).结论 MMP-2、Survivin基因在食管癌周组织中存在一定程度和范围阳性表达,其中96%以上患者两基因阳性表达范围＜70 mm且该范围内大小与肿瘤病期进展密切相关,而相邻分化正常食管组织中也存在着阳性表达应给予关注.     

诱导痰及血清TGF-β1水平对非小细胞肺癌急性放射性肺炎的预测价值

背景与目的:较多研究证实TGF-β1是放射性肺炎(radiation pneum onitis,RP)发生相关的细胞因子之一,然而应用血清TGF-β1水平预测RP的临床价值仍有争议。本研究旨在探讨诱导痰及血清TGF-β1预测急性放射性肺损伤发生的价值,为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的放疗提供参考。方法:收集2007年11月至2009年1月经病理学证实为NSCLC并在河北医科大学第四医院放疗科接受3D-CRT的23例患者的临床资料。放疗前及放疗近结束时空腹采肘静脉血并做雾化诱导痰,用酶联免疫吸附法检测血清TGF-β1水平,用免疫细胞化学染色方法检测诱导痰沉渣涂片中TGF-β1表达情况。放疗开始至结束后3个月内每周按RTOG急性放射损伤分级标准评价急性放射性肺炎。结果:全组患者随访期间发生急性RP9例,总发生率为39.1%(9/23),2级及以上急性RP发生率为30.4%(7/23)。放疗后血清TGF-β1水平升高的患者RP发生率较下降者高,分别为45.5%和40.0%,但差异无统计学意义(P=1.000)。治疗有效且血清TGF-β1水平升高的患者RP发生率为5...     

氧在肿瘤放射治疗中的作用

关于氧在放射线中的作用,很早就有人提出。1921年,Holthusen已注意到:放射线对蛔虫卵的杀伤效能与照射是否有氧关系很大,Petri于1923年通过研究射线对蔬菜种子的作用时,发现放射敏感性和氧的存在之间有一定的相关性。如许多实验都证实:当受照细胞的存活水平达到同一效应时,乏氧所需的X线剂量为有氧的3倍。所以人们把达到同一生物效应时,乏氧时所需剂量/有氧时所需剂量=氧增强比(OER)。氧增强比值较稳定,对稀疏电离辐射X线或γ线而言,OER=2.5～3.0对致密电离辐射如α粒子,OER为1.0,也就是说α粒子照射生物体时,不存在氧效应问题。介于二者之间的中子OER约为1.6。     

食管癌细胞系TE13R120放射抗性与HDAC3、NF-kB和NRAGE关系的研究

目的探讨HDAC3、NF—kB和NRAGE基因与食管癌细胞放射抗性的关系。方法以人食管癌细胞系TE13和由TE13经γ射线反复照射建立的放射抗性细胞系TE13R120为研究对象，用Western blotting技术检测这两种细胞于不同时间、剂量点照射后基因HDAC3、NF—kB和NRAGE的蛋白表达；用流式细胞术检测相同时间、剂量点两种细胞的凋亡和细胞周期分布情况。结果Western blotting显示，与TE13相比，TE13R120细胞照射前后HDAC3的核表达均增高，NF-kB的表达也明显增强，NRAGE在两种细胞胞浆中的表达无差异。与TE13相比，TE13R120中S期细胞明显增多，照射后G2期阻滞明显，凋亡水平较低。结论基因HDAC3和NF-kB可能在食管癌细胞放射抗性形成中发挥作用并可能有协同作用；NRAGE与食管癌辐射抗性的关系有待进一步研究。     

三氧化二砷对食管癌细胞株Eca109的放射增敏作用及机制

目的探讨三氧化二砷（Arsenic trioxide, As2O3）及As2O3与放射线联合对食管癌Eca109细胞的增殖抑制作用;分析二者联合对Eca109细胞周期和凋亡的影响,为As2O3的临床应用提供理论依据。方法MTT法观察放射线及As2O3单独及二者联合对食管癌Eca109细胞的增殖抑制作用,利用直线相关及直线回归拟合出照射组、As2O3组及联合组的直线,计算增敏比（sensitizing enhancement ratio, SER）;流式细胞术检测As2O3联合放射线对Eca109细胞周期和凋亡的影响;Western blot印记技术观察As2O3联合放射线对锰超氧化物歧化酶（Manganese superoxide dismutase, MnSOD）和细胞色素C（cytochrome C, cyt-C）蛋白表达的影响。结果As2O3能抑制食管癌Eca109细胞的增殖,具有明显的量效和时效关系;As2O3对食管癌Eca109细胞有明显的放射增敏作用;As2O3与放射线联合作用于Eca109细胞后,G2/M期细胞比例及凋亡率明显增加,MnSOD蛋白表达下降,而cyt-C蛋白表达未见明显变化。结论As2O3可能通过G2/M期阻滞,降低MnSOD蛋白的表达,从而诱导细胞凋亡来增强放射线对细胞的杀伤作用。     

低氧放疗中低氧对心脏功能的影响

为了解在低氧放疗过程中,低氧对心脏功能的影响。我们进行了低氧情况下癌症患者心脏功能检测的研究。1　资料和方法38例准备进行低氧放疗的肿瘤患者(食管上段癌28例,肺癌4例,乳癌4例,胃癌1例,左足拇趾恶性黑色素瘤1例)。男性32例,女性6例。年龄27～70岁,经心电图、Ｘ线、化验室检查等临床综合确诊心脏正常25例,合并隐性冠心病13例。仪器:应用日本产ＡｌｏｋａＳＳＤ-870彩超仪,探头频率3.0ＭＨｚ。低氧仪器为空军第四研究所提供。可产生10.5%的含氧混合气体。检查方法:检查当日禁食水,以录像和照相方法记录ＨＲ(心率)、ＳＶ(每搏排血量)、Ｃ…