分子生物学方法在侵袭性曲霉菌病早期诊断中的应用及进展

近年来,由于免疫抑制剂及广谱抗生素的广泛应用,条件性致病菌曲霉菌所致的侵袭性曲霉病(IA)发病率不断上升,病死率亦居高不下。早期明确诊断及有效治疗可提高患者生存率。分子生物学方法,作为无创性的检测方法,是一种快速,敏感性高的诊断手段,近年来成为IA早期诊断的研究热点,在侵袭性曲霉菌病的诊断中有着广阔的应用前景。     

2010年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测

目的了解2010年我国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国14所医院临床分离的5 080株铜绿假单胞菌按照统一的方案,采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准(CLSI 2010年版),进行铜绿假单胞菌的耐药性监测,并用WHONET5.4软件进行数据分析。结果 2010年14所医院共收集5 080株临床分离的铜绿假单胞菌,其中91.2%分离自住院患者;69.9%分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,平均为15.3%,对其他抗菌药物的耐药率均高于18%。昆明一医院的分离株对各种抗菌药物的耐药率均高于28%,对其中13种抗菌药物的耐药率是14所医院中最高者;北京一医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率在40%左右,甘肃省一医院的分离株对抗菌药物(除头孢哌酮和氨曲南外)耐药率均低于20%;上海一儿童医院的分离株对各抗菌药物的耐药率均低于5%。从ICU分离菌对各种抗菌药物的耐药率均高于门诊、内科、外科和整体分离菌的耐药率(P=0.001)。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1.7%。结论我国临床分离的铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性仍处于较高水平,但本次有轻微下降趋势。不同地区、不同医院的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大,ICU仍应是监控重点。医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物。同时要加强感染控制措施,预防和控制耐药菌株的医院内流行。     

2010年中国CHINET尿液标本中细菌的分布和耐药性监测

目的了解国内主要地区14所教学医院尿标本中的临床分离菌及其对常用抗菌药物的耐药性。方法采用K-B法按统一方案进行细菌药物敏感试验。按CLSI 2010版标准判断结果。结果 2010年1—12月各医院尿标本临床分离菌共9 301株;占临床分离菌株的19.4%(9 301/47 850)。其中革兰阳性菌2 403株,占25.8%,革兰阴性菌6 898株,占74.2%。以大肠埃希菌最为多见,占49.0%;其次为肠球菌属细菌占22.1%。约68%的菌株分离自住院患者,32%的菌株分离自门急诊患者;约64%的菌株分离自女性患者,36%的菌株分离自男性患者。大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌+产酸克雷伯菌)以及奇异变形杆菌中的ESBLs的检出率(58.4%、59.8%和14.4%)与同期CHINET监测的检出率相仿。粪肠球菌和屎肠球菌中均有少数万古霉素耐药株,万古霉素耐药肠球菌(VRE)的检出率粪肠球菌为0.5%(5株),屎肠球菌为2.4%(24株)。粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素和氨苄西林的耐药率≤10%;屎肠球菌除对糖肽类抗生素、利奈唑胺和磷霉素外,对其他测试药的耐药率在40%～94%。大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率较同期其他标本分离株略低,铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌对之耐药率则较低。在部分肠杆菌科细菌和不发酵糖革兰阴性杆菌中检出少数泛耐药菌株。结论尿标本分离菌主要为大肠埃希菌、其次为肠球菌属细菌,两者约占70%。VRE的检出率为2.4%。与其他标本分离菌相比,尿标本中分离的大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和不动杆菌属细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率较低。不同医院尿培养分离菌对常用抗菌药的耐药率较低,且有很大差异,提示治疗尿路感染应根据本单位细菌耐药性监测资料选用抗菌药物。     

2010年中国CHINET临床分离自无菌体液的细菌分布和耐药性监测

目的了解国内不同地区14所教学医院2010年从临床分离自脑脊液及其他无菌体液(胸水、腹水、胆汁等)的细菌分布和对抗菌药物的耐药性。方法共收集2010年临床分离的无菌体液2409株非重复的细菌,采用纸片扩散法进行药敏试验,结果按CLSI 2010年版标准判读药敏结果,采用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 2409株非重复的细菌中,革兰阴性菌1 353株,占56.2%,革兰阳性菌1 056株,占43.8%。脑脊液中最常见的细菌分别为:凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金葡菌和大肠埃希菌。其他无菌体液中最常见的细菌分别为:大肠埃希菌、CNS、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌。脑脊液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为78.6%和69.7%。其他无菌体液标本中MRSA和MRCNS的检出率分别为60.3%和67.2%。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。脑脊液标本中未发现对万古霉素耐药的肠球菌属细菌,在其他无菌体液中发现17株对万古霉素耐药的屎肠球菌。脑脊液标本中产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)的检出率分别为62.5%和30.0%,其他无菌体液标本中产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌(肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌)的检出率分别为50.4%和27.3%。脑脊液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌分别检出10株(18.2%)、8株(27.6%)和1株(7.7%)。其他无菌体液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和大肠埃希菌分别检出43株(36.8%)、18株(11.5%)、3株(2.1%)和1株(0.2%)。结论脑脊液和其他无菌体液中主要病原菌是大肠埃希菌、CNS、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌。应防范泛耐药肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对临床治疗造成严重威胁。     

2010年中国CHINET嗜麦芽窄食单胞菌耐药性监测

目的了解国内不同地区14所医院2010年临床分离嗜麦芽窄食单胞菌对抗菌药物的耐药性。方法收集14所医院2010年临床分离嗜麦芽窄食单胞菌1 661株,按统一方案、采用统一的材料、K-B法和判断标准(CLSI 2010年版)进行嗜麦芽窄食单胞菌的耐药性监测。结果 1661株嗜麦芽窄食单胞菌住院患者分离株占97.5%;门诊患者分离株仅占2.5%。60岁以上的老年患者分离株占63.8%,<18周岁患者的分离株占4.8%。主要是痰液等呼吸道分泌物分离者占83.0%;分离自血液、胸腹水、关节腔液、脑脊液等无菌体液者占4.7%。该菌对甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑、左氧氟沙星和米诺环素的耐药率分别为11.2%、10.7%和3.4%,对头孢哌酮-舒巴坦的耐药率为13.8%。尿液分离株对甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑和头孢哌酮-舒巴坦的耐药率为21.6%和33.3%,高于其他标本分离株耐药率,P<0.01。结论嗜麦芽窄食单胞菌主要分离自住院患者及痰液等呼吸道标本中,且多见于≥60岁的老年患者。该菌对多数抗菌药物固有耐药,但对CLSI推荐的甲氧苄啶-磺胺甲(?)唑、左氧氟沙星和米诺环素的耐药率低。头孢哌酮-舒巴坦对该菌亦有良好抗菌活性。应根据药敏试验结果合理选用治疗嗜麦芽窄食单胞菌感染的抗菌药物。     

左旋吡喹酮脂质体及吡喹酮脂质体治疗小鼠血吸虫病

本研究用逆道相蒸发法制备左旋吡喹酮脂质体和吡喹酮脂质体。左旋吡喹酮脂质低（L－PZQL）和吡喹酮脂质体（PZQL）剂量均为25和50mg／kg／次，吡喹酮（PZQ）剂量为100和200mg／kg／次，以一次灌胃连续两日治疗小鼠血吸虫病。L－PZQL50mg／kg和100mg／kg治疗组减虫率分别为551％和74．5％，PZQL50mg／kg和100mg／kg治疗组减虫率分别为20．9％和55．7％，同剂量的L－PZQL与PZQL组减虫率比较有显著性差异（P＜0．01）。PZQ200mg／kg、400mg／kg组减虫率分别为59．2％和79．1％。L－PZQL疗效较PZQ高4倍。形态学观察，化疗后血吸虫成虫皮层受损害，以L－PZQL100mg／kg组和PZQ400mg／kg组尤为明显。肝脏病理学改变提示，脂质体药物组与对照组相比，肝脏嗜酸性由芽肿减少，以慢性虫卵结节居多，虫卵结书直径变小。实验说明，L－PZQL100mg／kg治疗小鼠血吸虫病的疗效类似于PZQ400mg／kg。     

2012年中国CHINET无菌体液中分离的细菌构成和耐药性监测

目的：了解国内不同地区15所医院2012年从临床分离自脑脊液及其他无菌体液（胸水、腹水、胆汁等）的细菌构成及其对抗菌药物的耐药性。方法对国内主要地区（13所综合性医院、2所儿童医院）临床分离菌株采用纸片扩散法或自动化仪器法按统一方案进行细菌药敏试验,按CLSI 2012版标准判断结果。结果3945株非重复的细菌中,革兰阴性菌2214株,占56．1％,革兰阳性菌1731株,占43．9％。无菌体液中最常见的细菌依次为大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）,屎肠球菌,粪肠球菌。无菌体液标本中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（金葡菌）和CNS（MRSA和MRCNS）的检出率分别为61．3％和77．2％。未发现对万古霉素、利奈唑胺耐药的葡萄球菌。无菌体液中发现1株对万古霉素耐药的粪肠球菌和1株对利奈唑胺耐药的粪肠球菌,还发现6株对万古霉素耐药的屎肠球菌。无菌体液标本中产ESBL大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别为48．1％和24．4％。无菌体液标本中泛耐药鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的检出率分别为24．5％、5．5％和1．4％。结论应防范泛耐药肠杆菌科细菌和鲍曼不动杆菌对临床造成严重威胁。     

2007年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测

目的 了解2007年我国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物.方法 对全国12所教学医院临床分离的3 988株铜绿假单胞菌采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,按CLSI 2007年标准判定药敏结果,并用WHONET 5.4软件进行数据分析.结果 2007年12所医院从临床标本中共分离出3 988株铜绿假单胞菌,其中 94.3% 自住院患者中分离,76.2%的菌株分离自呼吸道标本.铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为18.7%,对其他抗菌药物的耐药率均高于20%.上海华山医院的临床分离株除头孢哌酮-舒巴坦外,对其他抗菌药物的耐药率均高于30%,北京医院除对阿米卡星和环丙沙星外,对其他各抗菌药物的耐药率均高于39%,上海儿科医院对各抗菌药物的耐药率均低于10%,甘肃省人民医院除庆大霉素和环丙沙星外,对其他各抗菌药物的耐药率均低于10%. 泛耐药铜绿假单胞菌的检出率为3.2%.结论 我国铜绿假单胞菌的耐药性仍处于较高水平,不同医院抗菌药物的耐药性相差较大,应加强监测,指导临床合理使用抗菌药物并控制医院耐药菌感染的流行.     

重症监护病房下呼吸道感染或定植嗜麦芽窄食单胞菌患者48例分析

目的分析ICU患者下呼吸道检出嗜麦芽窄食单胞菌的常见因素，探讨嗜麦芽窄食单胞菌的定植、感染及其转归。方法将笔者单位ICU 2004年1月-2005年12月收治的48例痰培养有嗜麦芽窄食单胞菌生长的患者进行定植或感染的初步诊断后，回顾性分析比较其在院内采取的各项措施、病情发展等，并对嗜麦芽窄食单胞菌进行体外药物敏感试验，将敏感药物用于上述48例患者的治疗。结果48例患者中嗜麦芽窄食单胞菌感染者32例、定植者16例。气管插管时间较长、使用碳青霉烯类抗生素或糖皮质激素的时间较长、合并低蛋白血症、急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ评分较高（〉15分者占87．5％）均与下呼吸道感染嗜麦芽窄食单胞菌明显相关。与定植者相比，下呼吸道感染嗜麦芽窄食单胞菌易发展为重症肺炎，伴发呼吸功能衰竭（感染者中有84．4％，定植者中有31．3％），且体外敏感的抗菌药物对其临床治疗效果欠佳。嗜麦芽窄食单胞菌主要对新型氟喹诺酮类药物莫西沙星、左氧氟沙星敏感率高，分别为83．3％和75．0％；对常用的第三代头孢菌素及碳青霉烯类抗生素耐药率达80％左右。结论对ICU患者缩短气管插管时间、合理使用抗菌药物、增强机体免疫功能等，有利于防治下呼吸道感染嗜麦芽窄食单胞菌。     

2011年中国CHINET铜绿假单胞菌耐药性监测

目的了解2011年中国不同地区铜绿假单胞菌临床分离株的耐药性和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法对全国15所医院临床分离的6012株铜绿假单胞菌按照统一方案,采用统一材料、方法(K-B法或自动化仪器)和判断标准(CLSI 2011年版),进行铜绿假单胞菌的耐药性监测,并用WHONET5.6软件进行数据分析。结果 2011年15所医院从临床标本中共分离6 012株铜绿假单胞菌,其中92.9%分离自住院患者,73.7%的菌株分离自呼吸道标本。铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为14.3%。耐药性最高的医院分离株对大多数抗菌药物的耐药率均高于30%,而耐药性最低的成人医院分离的菌株对大多数抗菌药物的耐药率均低于20%,2所儿童医院分离菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于17%;分离自门诊的菌株对各种抗菌药物的耐药率均低于25%,而分离自ICU的菌株除了对阿米卡星的耐药率为16.1%外,对其他各种抗菌药物的耐药率均高于23%。各医院泛耐药铜绿假单胞菌的检出率平均为1.8%。结论我国不同地区、不同医院临床分离的铜绿假单胞菌对抗菌药物的耐药率仍处于较高水平,但近年耐药性增长趋势稳定。各地区、各医院、各科室患者的分离株对抗菌药物的耐药性相差较大,医疗机构应加强细菌耐药监测,指导临床合理使用抗菌药物。