石菖蒲水提物对PC12细胞增殖及细胞突起的作用

目的研究石菖蒲水提物对PC12细胞增殖及细胞突起的作用,观察药物是否具有神经营养功能或促进细胞分化的功能。方法采用细胞计数试剂盒检测不同浓度的石菖蒲水提物对细胞活力的影响;采用Image J软件统计PC12细胞的梭型细胞率、细胞分化率、细胞突起长度及阳性细胞分化率,以评价石菖蒲水提物对细胞分化的影响。结果石菖蒲水提物在完全培养条件和低血清培养条件下对PC12细胞增殖有显著的促进作用,对细胞突起的长出、分支、延伸有明显的抑制作用。结论石菖蒲水提物具有一定的神经营养功能。     

大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液对皮层神经元活性的影响以及通络救脑注射液的干预作用

目的:探讨脑微血管内皮细胞条件培养液对神经元活性的影响,以及通络救脑注射液对此过程的干预作用。方法:制备正常、正常用药、拟缺血损伤、拟缺血损伤用药4种脑微血管内皮细胞条件培养液(N-CM、NT-CM、I-CM、IT-CM),分别作用于培养的皮层正常神经元和拟缺血损伤神经元,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率检测分析各个条件培养液对神经元活性的影响特征。结果:①N-CM对正常神经元无明显影响,但对拟缺血损伤的神经元表现出一定的保护作用,尤其是NT-CM可明显提高受损的神经元活性;②I-CM可降低正常神经元活性,对已受损的神经元则进一步加重损伤,IT-CM可明显改善这种损伤状态。结论:脑微血管内皮细胞的旁分泌作用可能在中枢系统缺血性损伤中起重要作用,有可能是不能透过血脑屏障的中药成分发挥治疗作用的靶点。     

复方通络救脑促进神经细胞突触可塑性

目的: 检测中药复方通络救脑及其主要成分三七总皂苷和京尼平苷对神经突触可塑性有无促进作用。 方法: 实验分为对照组和给药组,采取细胞活力检测法,即CCK-8检测法检测药物对稳转的过表达的瑞典型突变淀粉前体蛋白(swAPP)突变的人神经母细胞瘤(SY5Y)细胞的增殖曲线的影响;通过Western blotting检测药物对于神经细胞突触相关蛋白树突棘肌动蛋白结合蛋白(drebrin)和突触后密度蛋白-95(PSD-95)的表达的变化;用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞长出神经突起后,检测药物对于细胞突起的作用。 结果: 复方通络救脑及其主要组成成分京尼平苷和三七总皂苷不影响过表达的瑞典型突变淀粉样前体蛋白的神经母细胞瘤(swAPP-SY5Y)的细胞增殖曲线,且复方通络救脑中京尼平苷能够显著增加swAPP-SY5Y细胞drebrin和PSD-95的表达(P<0.01),显著增加PC12细胞总突起数(P<0.01);而三七总皂苷没有相应的作用。 结论: 复方通络救脑能促进神经细胞的突触可塑性,初步断定起主要作用的成分是京尼平苷而不是三七总皂苷。     

精制清开灵及其组分对中风后大鼠内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的：清开灵是一种治疗脑中风的传统中药复方。精制清开灵是从清开灵衍生出的有效成分复方,既往研究证明,此药具有减轻大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠血管内皮细胞损伤和抑制炎症过程的作用,从而体现出神经保护的效果。而内皮型一氧化氮合酶（eNOS）来源的一氧化氮在脑缺血发作后的病理过程中起到重要的保护作用,是近年药理学研究的热点之一。本实验研究了大鼠持久性局灶性脑缺血72h后精制清开灵及其各组分对抗脑缺血损伤的作用以及它们对eNOS表达的影响。方法：以线栓法复制SD大鼠持久性大脑中动脉栓塞（PMCAO）模型。缺血72h后,取出脑组织做冠状切片,1TrC染色计量梗死程度,并以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆内皮细胞凝血因子Ⅷ相关抗原（血管性假血友病因子,vWF）含量。以免疫组织化学染色方法观察大鼠脑组织eNOS的表达情况。并根据免疫组织化学分析的结果,取缺血侧脑组织以免疫印记法验证精制清开灵及其各组分对eNOS表达水平的影响。结果：PMCAO72h,模型组大鼠eNOS蛋白在缺血半暗带的血管内皮细胞表达增加。与模型组动物相比,精制清开灵及其各组分治疗组动物eNOS蛋白的表达明显增加,而脑梗死范围则显著缩小。结论：持久性局灶性脑缺血后,在缺血半暗带血管内皮细胞表达增加的eNOS可能具有重要的代偿作用。精制清开灵及其各组分能够不同程度地促进缺血后半暗带eNOS的表达,这可能是它们阻抑脑缺血损伤的重要机制之一。     

新型冠状病毒导致神经损伤的研究进展及中医药治疗价值

对新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染导致神经系统损伤的临床症状特点、机制研究及中医药治疗的潜在应用和价值进行了综述。新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)患者除典型呼吸道症状外,还出现中枢神经、周围神经及骨骼肌损伤三类神经系统症状,部分症状出现在病毒感染早期,重症患者比例高于轻症患者,且可能导致长期并发症,反映了神经损伤症状多、早、重的特点。现有研究发现SARS-CoV-2感染导致神经系统损伤的机制与病毒直接损伤神经细胞、诱导过度炎症反应及免疫失调,下调血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)受体表达相关。中医药治疗疾病具有辨证论治、整体调节的特点,我国COVID-19的诊疗方案充分考虑到谵语神昏,视物错瞀,四肢抽搐等神经系统并发症,推荐处方的多味中药及中成药都对神经系统症状和脑部疾病有治疗效果,具有缓解头痛、恢复意识、清热止血、恢复颅脑神经及肢体活动等功效。基于感染性及无菌性脑炎的...     

通络救脑注射液对氧糖剥夺大鼠脑微血管内皮细胞分泌巨噬细胞炎性蛋白-1β的影响

[目的]观察通络救脑注射液对氧糖剥夺损伤(OGD)的大鼠脑微血管内皮细胞条件培养液中巨噬细胞炎性蛋白-1β(MIP-1β)分泌情况及其受体--趋化因子受体5(CCR5)表达的影响.[方法]氧糖剥夺法建立内皮细胞OGD模型,酶联免疫银光法(ELISA)法检测脑微血管内皮细胞条件培养液中MIP-1β含量的变化,免疫组化法及Western blot法观察内皮细胞中MIP-1β及其受体CCR5的表达情况.[结果]OGD组的内皮细胞分泌大量MIP-1β至上清液,该组内皮细胞胞浆大量表达MIP-1β,同时CCR5的蛋白表达量亦随之上升,加入通络救脑注射液的OGD组,其上清液中MIP-1β分泌量显著性下降(P<0.01),MIP-1β及其受体CCR5在内皮细胞上的表达也有不同程度的下降.[结论]通络救脑注射液能够抑制OGD损伤时内皮细胞M1P-1β的分泌,减少MIP-1β和CCR5的表达,对内皮细胞缺氧损伤后趋化因子释放的抑制是其发挥解毒通络药效的途径之一.     

血管源性认知障碍自我辨识筛查系统的Logistic回归分析

目的通过血管源性认知障碍自我辨识筛查量表建立筛查数学模型,初步筛查出轻度血管源性认知障碍患者。方法收集年龄≥50岁、存在血管源性危险因素的人群共计610例,通过简易智能精神状态检查量表(MMSE)及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)分为认知正常组和认知障碍组。调查病例的一般资料、自我辨识筛查量表资料以及MMSE、MoCA量表资料,并对其进行Logistic回归分析。结果年龄、学历、高血压病、脑血管病对认知功能影响较大。通过Logistic回归分析得到的函数总体预测结果的一致率达到66.3%,灵敏度(Sen)为79.8%,特异度(Spe)为44.3%。结论本研究建立的数学模型适用于在具有血管源性危险因素的人群中进行轻度认知障碍患者的筛查。     

“肺与大肠相表里”现代生物学认识浅谈

"肺与大肠相表里"是中医的重要基础理论,随着现代医学的发展,其中医理论方面的内涵认识已日趋深入,并且现代生物学技术对肺与肠的关系提供了更多分子方面的证据。二者在生理关系方面,从胚胎发育角度,肺与肠的发育过程紧密相关;在病理关系方面,肠缺血/再灌注病理状态下可能导致肺功能受到影响,肺病在一定的病理状态下也可以转移至肠,引起肠部病变。肺与大肠无论在生理方面还是在病理方面都存在联系,文章试对现代生物学关于肺与大肠在生理病理上的关系进行综述。     

TDP-43在人胚胎肾细胞中的代谢及其产物对细胞活力的影响

目的研究TAR DNA结合蛋白43 kD(TDP-43)在人胚胎肾细胞HEK293中的代谢过程及其产物对细胞活力的影响。方法应用不同浓度十字孢碱(STS)作用于HEK293细胞,检测TDP-43含量的变化,并联合使用不同的蛋白降解通路阻滞剂研究其代谢机制,再通过转染外源性TDP-43研究其对细胞活力的影响。结果 STS对HEK293细胞中TDP-43蛋白含量影响不大,在较高浓度时(5、10μM)会诱导HEK293细胞产生35 kD片段。进一步研究发现这一35 kD片段是通过泛素-蛋白酶体通路降解的,且其过表达时会明显降低HEK293细胞的活力。结论过表达外源性TDP-43及其35 kD片段可对HEK293细胞活力产生抑制作用,可能是导致TDP-43相关疾病的原因。