登革病毒4型E蛋白的表达与多克隆抗体的制备

 目的 在原核细胞中表达登革病毒4型E蛋白及E蛋白III区,分别以两种蛋白免疫家兔,获得可检测登革病毒的多克隆抗体。方法 将登革病毒4型E蛋白与E蛋白III区编码序列克隆到pET-32a（+）质粒中,分别构建两种蛋白的表达载体,以IPTG诱导其在Rosetta细胞中的大量表达,并进行SDS-PAGE检测。分别以两种蛋白免疫家兔,制备出针对E蛋白与E蛋白III区的多克隆抗体,并对其进行Western blot鉴定。结果 登革病毒4型E蛋白与E蛋白III区在Rosetta细胞中以包涵体的形式大量表达;利用所制备的多克隆抗体对登革病毒进行检测,出现了预期的条带。结论 本研究制备获得的多克隆抗体可用于登革病毒的检测,为登革病毒相关研究奠定了基础。     

无小鼠神经毒力的乙型脑炎病毒/登革病毒1型嵌合病毒的筛选与序列分析

目的  采用蚀斑纯化法筛选对小鼠无神经毒力的乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）/登革病毒（dengue virus,DENV）1型嵌合病毒（JD1）纯化株,分析影响JD1小鼠神经毒力的相关位点。方法  将JD1在乳地鼠肾细胞中进行3轮蚀斑纯化,检测JD1纯化株对小鼠的脑内神经毒力。然后提取无神经毒力纯化株的基因组RNA,用逆转录PCR分段扩增全基因组序列并进行序列测定。将测序结果分别与原DENV-1 的前膜-包膜蛋白和JEV骨架病毒株SA-14-14-2的基因序列进行比对。选取2个无神经毒力纯化株进行小鼠免疫保护实验。采用单侧t检验对结果进行比较。结果  经过3轮蚀斑纯化后,获得大、中、小3种蚀斑形态的6个JD1纯化株。3个纯化株对小鼠无神经毒力,小鼠脑内注射后全部存活;1株神经毒力较弱,70%以上小鼠存活;2株具有强神经毒力,小鼠全部死亡。测序结果显示,对小鼠无神经毒力的3个纯化株存在2处相同的氨基酸突变。将其中2个纯化株JD1-PP-61和JD1-PP-31腹腔免疫小鼠后,再用1 000半数致死量DENV-1鼠脑适应株进行脑内攻击。JD1-PP-61能较好地保护小鼠抵抗病毒攻击,仅20.0%小鼠死亡（t=7.237,P<0.001）;JD1-PP-31保护效果稍弱,41.9 %小鼠死亡（t=4.752,P<0.01）。结论  通过蚀斑纯化筛选出对小鼠无神经毒力的JD1纯化株,并发现了可能与神经毒力减弱相关的位点。     

Al Kaissi综合征1例患儿的基因变异分析及文献复习

目的探讨1例Al Kaissi综合征患儿的遗传学病因, 并为其家系提供产前诊断。方法选取2021年3月6日于河南省郑州大学第一附属医院就诊的1例Al Kaissi综合征患儿为研究对象。提取患儿基因组DNA, 应用拷贝数变异测序(CNV-seq)和全外显子组测序(WES)技术对患儿进行遗传变异筛查, 应用PCR-琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR技术(qPCR)对筛查结果进行验证, 同时验证其父母以明确变异来源, 并对该家系的产前绒毛样本进行检测。结果患儿为6岁4个月男性, 具有低耳位、招风耳和三角脸等特殊面容, 语言和智力发育迟缓, 存在先天性室间隔缺损。CNV-seq结果未见明显异常, WES结果提示患儿CDK10基因第1、2外显子纯合缺失, PCR-琼脂糖凝胶电泳和qPCR结果进一步证实患儿父母均为CDK10基因第1、2外显子杂合缺失携带者。该家系产前绒毛样本提示胎儿为CDK10基因第1、2外显子杂合缺失携带者。结论结合临床表型, 上述患儿考虑为CDK10基因第1、2外显子纯合缺失所致的Al Kaissi综合征。     

MSCT后处理技术在腕关节损伤中的应用

目的：探讨MSCT后处理技术在腕关节损伤诊断中的价值。方法：MSCT扫描腕关节损伤患者20例,分析薄层重建、多平面重组（MPR）及容积显示技术（VRT）对腕关节损伤的显示及价值,并与常规横断面对比分析。结果：桡骨远端、尺骨茎突骨折8例,合并舟状骨骨折2例,合并舟状骨骨折伴月骨脱位1例;舟状骨骨折8例;月骨脱位4例;三角骨骨折2例,合并钩骨、豆状骨骨折1例;第4、5掌骨基底部骨折各1例。MSCT三维重建图像能全面、直观地显示相应的腕关节骨折、脱位及关节腔内骨片情况,尤其是MPR对骨折、脱位、骨碎片显示率为100％。结论：MSCT通过薄层重建配合MPR、VRT能够克服横断扫描限制,在不增加患者辐射剂量的情况下,能够更加直观、立体地显示腕关节损伤的基本征象,为腕关节损伤的诊断提供更多信息。     

相位对比法MRA在颅内静脉窦病变中的应用

目的 评价相位对比法(PC)磁共振血管造影(MRA)对颅内静脉窦病变的显示能力及其应用价值.方法 累及静脉窦的病变共44例.动静脉畸形(AVM)19例,动静脉瘘(AVF)6例,静脉窦血栓形成(DST)2例,脑膜瘤16例,结核1例.其中行2DPC法MRA检查的息者共35例,3D PC法MRA检查6例,3例同时行2D PC法和3D PC法检查.9例同时行DSA检查.结果 PC法MRA对AVM供血动脉的显示不如3D TOF法,但能更好地显示引流静脉的数量、方向、受累及静脉窦的形态,瘤巢的信号也较3D TOF法高;PC法MRA能清晰显示Galen静脉型动静脉瘘(AVF)扩张的Galen静脉和引流静脉以及海绵窦动静脉瘘(CS-DAVF)时"血管湖"状扩张的海绵窦和眼上静脉、蝶顶窦、岩上窦、岩下窦等引流静脉;静脉窦血栓形成时Pc法MRA出现血流缺损和引流静脉的扩张;PC法MRA能显示镰旁和后颅窝脑膜瘤和结核灶造成的静脉窦移位、狭窄、闭塞等形态的改变.结论 结合常规MBI检查,PC法MRA能直观、清晰地显示静脉窦受病变累及时其形态特点.     

1例不完全性川崎病伴呼吸心跳骤停患儿的护理

正川崎病(Kawasaki disease,KD)于1967年由日本川崎富作首次报道,是一种病因不明的,80%发生在5岁以下婴幼儿的急性发热性疾病,男性发病多于女性,比例约为1.5∶1,约15%-20%患儿未经治疗可发生冠状动脉扩张和冠状动脉瘤。随着对川崎病认识的不断深入,我们发现有许多不完全性川崎病(Incomplete Kawasaki Disease,IKD),约占KD的20%,由于各种临     

泽兰提取物对慢性前列腺炎的治疗作用及调控炎性小体NLRP3信号通路的机制

目的 探讨泽兰提取物对慢性前列腺炎（CNP）的治疗作用,并基于炎性小体NOD样受体蛋白3（NLRP3）通路探讨其抗CNP的可能作用机制。方法 采用5 mg·L^-1脂多糖（LPS）诱导人正常前列腺基质细胞WPMY-1,通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测3.125、6.25、12.5、25、50、100 mg·L^-1泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6含量的影响,并计算其半抑制浓度（IC₅₀）值。WPMY-1细胞给药50、75、100 mg·L^-1泽兰提取物后,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测NLRP3通路关键蛋白表达。应用角叉菜胶诱导法复制CNP大鼠模型。苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠前列腺组织病理学变化;测定大鼠前列腺器官指数;ELISA检测大鼠血清5α-二氢睾酮（5α-DHT）及前列腺组织IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、环氧合酶-2（COX-2）、前列腺素E₂（PGE₂）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的含量;Western blot检测大鼠前列腺组织中COX-2、TGF-β₁及NLRP3通路关键蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠前列腺组织COX-2、白细胞介素-1β（IL-1β）、TGF-β₁、TNF-α mRNA表达。结果 与正常组比较,模型组细胞分泌IL-6浓度显著升高（P<0.01）;细胞NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的蛋白表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,泽兰提取物对LPS诱导WPMY-1细胞分泌IL-6的IC₅₀为38.26 mg·L^-1;泽兰提取物低、中、高剂量组NLRP3、ASC和IL-1β蛋白表达水平明显下调（P<0.05,P<0.01）,泽兰提取物中、高剂量组细胞Caspase-1蛋白表达水平明显下调（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠前列腺器官指数显著升高（P<0.01）,前列腺组织大量炎细胞浸润,组织病理学评分明显升高（P<0.05）,血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE₂、IL-6、TGF-β₁、NOS₂/iNOS、COX-2含量,COX-2、IL-1β、TGF-β₁ mRNA表达水平明显升高（P<0.05,P<0.01）,前列腺组织COX-2、TGF-β₁、NLRP3、Caspase-1、ASC及IL-1β蛋白表达水平明显上调（P<0.05,P<0.01）;与模型组比较,泽兰提取物低、高剂量均能有效减轻角叉菜胶所致的前列腺组织病理学改变,明显降低血清5α-DHT含量、前列腺组织TNF-α、PGE₂、TGF-β₁及iNOS含量（P<0.05,P<0.01）及COX-2、IL-1β、TGF-β₁ mRNA表达水平（P<0.05,P<0.01）,明显下调前列腺组织COX-2、Caspase-1、ASC及NLRP3蛋白表达水平（P<0.05,P<0.01）。泽兰提取物低剂量组前列腺器官指数显著降低（P<0.01）。泽兰提取物高剂量组前列腺组织COX-2含量明显降低,TGF-β₁及IL-1β蛋白表达水平明显下调（P<0.05）。结论 泽兰提取物对CNP有明显的治疗作用并可能通过抑制炎性小体NLRP3信号通路的激活来减轻炎症反应。     

冠状动脉造影与心电图的对比分析

随着人民生活水平的提高,冠心病的发病率逐年提高,心电图在冠心病诊断中有重要意义,冠状动脉造影(简称冠脉造影)一度被认为冠心病诊断的金标准。本文对冠心病患者进行了心电图及冠脉造影检查,并对其结果分析如下。1对象与方法1.1病例选择选择2001年1月-2002     

bcl-2蛋白在慢性萎缩性胃炎胃粘膜的表达

目的了解慢性萎缩性胃炎bcl-2蛋白的表达情况,探讨胃粘膜癌前病变与细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学S—P法对73例慢性胃炎胃粘膜上的bcl-2表达情况进行观察。结果bcl-2在慢性萎缩性胃炎腺上皮上的表达明显高于慢性浅表性胃炎（P〈0．01）。结论bcl-2在慢性萎缩性胃炎中的表达增加,可能是胃粘膜上皮细胞增殖和凋亡失衡的重要机制之一。     

老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者牙周基础治疗后牙周感染控制疗效分析

目的探讨老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者采用牙周基础治疗对其牙周感染的控制效果。方法选取2016年12月—2018年6月期间在该院接受治疗的老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者,60例作为研究对象,按照随机数字表法将其分为观察组(n=30)与对照组(n=30),对照组不接受牙周治疗,观察组采用牙周基础治疗,分析治疗前后牙周相关指标、糖代谢指标以及牙周感染控制率。结果观察组SBI为(2.46±0.25)、PD为(3.14±0.45)mm、PLI为(1.96±0.25);FPG为(5.42±0.84)mmol/L、2 h PG为(7.95±1.01)mmol/L、HbAlc为(6.34±0.53)%,均相对于对照组较低,牙周感染控制率为93.33%,相对于对照组较高(P0.05)。结论老年中重度牙周炎伴2型糖尿病患者采用牙周基础治疗效果显著,可有效改善患者血糖指标以及牙周相关指标,降低牙周感染发生概率。