三步法提纯白细胞介素2及其应用

本文介绍在我国一般实验室条件下提纯白细胞介素2(IL2)的方法及其提纯物在几项实验中的应用。将粗提 IL2通过硫酸铵沉淀、Sep(?)edex G-100凝胶过柱及蓝葡聚糖亲和层析等三步处理后,所获提纯物与标准 IL2相比较作 SDS-PAGE 电泳,结果证明二者均在分子量为17500道尔顿的电泳位置上呈一条蛋白带,获较满意提纯效果。试用此提纯物作动物免疫及其抗血清的 IL2生物活性中和试验和 ELISA 法测定等,证明抗血清有抗 IL2活性。本文还初步探索用酶标提纯物作 ELISA 竞争法以检测标本中 IL2的可能性。     

用逆转录—多聚酶链反应检测白血病患者多药耐药基因的表达

作者应用逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测２５例急性白血病患者骨髓细胞中ｍｄｒ１基因的表达。以Ｋ５６２敏感细胞和体外诱导的耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２分别作为阴性和阳性对照，发现复发和未缓解患者中ｍｄｒ１表达增高者占９０．０％（１０／１１），而初治患者中仅为２１．４％（３／１４），ｍｄｒ１表达增高化疗效果差。应用单克隆抗体ＪＳＢ－１检测Ｐ－１７０结果与ＲＴ－ＰＣＲ一致。此ＲＴ－ＰＣＲ具有高度敏     

阿霉素诱导的人白血病细胞系K562/A02多药抗药性(英文)

目的:研究白血病细胞多药耐药发生的机制. 方法:用逐步增加培养基中阿霉素(Dox)浓度的方法,诱导出一株耐Dox的人白血病细胞系K562/A02.用[~3H]TdR参入法测定IC_(50),HPLC法测定细胞内药物浓度,免疫组织化学法检测P-糖蛋白的表达,RT-PCR法测定mdr1基因表达,点杂交测定基因组中mdr1DNA和拓扑异构酶Ⅱ(TopⅡ)基因表达,CDNB法测定谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性. 结果:K562/A02对Dox、HHT、Dau、VCR、m-AMSA、VP-16具有较强的交叉耐药性,而对Ara-C耐药较弱,对5-FU、Cis和MTX不交叉耐药,表现出典型的多药耐药表型.K562/A02细胞内药物浓度明显低于K562细胞,P-170阳性表达.K562/A02细胞中MDR1基因拷贝数与K562的无差异,但mdr1mRNA高表达.TopⅡ的mRNA水平低于K562,GST的活性增高. 结论:白血病细胞多药耐药的机制与mdr1基因表达密切相关,也与TopⅡ和GST有关.