大同市妊娠期女性HPV感染调查及基因型分析

目的 调查大同市妊娠期女性人乳头瘤病毒(HPV)感染及亚型分布情况.方法 采用PCR以及线形杂交法(LA)对177例妊娠期女性宫颈脱落细胞标本进行HPV检测和基因分型.结果 大同市妊娠期女性HPV感染率为38.42％,妊娠早期感染率最高(57.35％,P＜ 0.005),且以多型别为主(73.92％).HPV-16、HPV-58、HPV-18、HPV-11以及HPV-6的感染率最高,分别为15.82％,4.52％,3.95％,3.95％和3.39％.结论 大同市妊娠期女性HPV的感染较为普遍,HPV亚型分布具有明显的地域特征,妊娠早期女性为易感人群.     

HMGB1与原因不明复发性流产的关系

目的探讨原因不明复发性流产(URSA)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达水平,及其对Th17/Treg平衡的影响。方法选取42例早孕期原因不明复发性流产患者为研究对象(URSA早孕组),并以32例正常早孕孕妇为正常早孕组(NP组)。采用流式细胞术(FCM)检测外周血中Th17和Treg细胞的比例;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测外周血中HMGB1、RAGE、IL-17、IL-6、TGF-β及IL-10表达水平。结果 URSA早孕组外周血中Treg细胞比例低于正常早孕组(P0.05),而Th17细胞比例和Th17/Treg比值均高于正常早孕组(P0.05);URSA早孕组外周血HMGB1和RAGE表达高于正常早孕组(P0.05);与正常早孕组相比,URSA早孕组外周血IL-17、IL-6表达水平均增高(P0.05),而TGF-β、IL-10的表达水平均下降(P0.05);在相关性分析比较中,URSA早孕组外周血HMGB1表达水平与RAGE、IL-17、IL-6均呈正相关,而HMGB1表达水平与TGF-β、IL-10均呈负相关。结论 URSA外周血中HMGB1表达水平增高,HMGB1可能通过直接或间接的方式调节Th17/Treg平衡模式参与URSA的发病机制。     

抑癌基因RASSF1A微卫星变异与宫颈癌发生发展的关系

目的 探讨抑癌基因RASSF1A微卫星变异在宫颈癌发生发展中的作用及其与HPV感染的关系.方法 选择RASSF1A基因的两个微卫星多态标记位点,采用PCR技术对宫颈组织进行杂合性丢失与微卫星不稳定性的检测,同时检测宫颈组织中HPV16的感染状况.结果 两位点的LOH发生率在宫颈癌组织临床分期及病理分级之间差异有统计学意义(P＜0.05).双位点的LOH及MSI在宫颈癌有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P＜0.05).RASSF1A基因的LOH发生率在HPV16感染阳性组中明显高于阴性组(P＜0.05).结论 RASSF1A基因的改变是宫颈癌发生过程中的较晚期事件,RASSF1A基因的LOH与MSI对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值.RASSF1A基因的LOH与HPV16感染二者共同作用在宫颈癌的发生发展过程中更有意义.     

流产模型孕鼠脾脏调节性T细胞分离纯化方法的初步建立

目的探索流产模型孕鼠CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞快速高效的分选方法。方法采用免疫磁珠两步法分离流产模型孕鼠脾脏中T细胞,分离后的细胞经台盼蓝染色检测细胞存活率,经流式细胞仪检测分离的纯度。结果流产模型孕鼠脾脏细胞经过免疫磁珠细胞分选法2次分选得到CD4+/CD25+调节性T细胞纯度为(93.51.1)%,CD4+/CD25-T细胞纯度为(96.60.6)%。结论采用免疫磁珠细胞分选法能够快速高效的得到高纯度的CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25-T细胞。     

应用表观遗传学方法探索孕妇血浆中胎儿游离DNA

目的应用表观遗传学DNA甲基化技术从母血浆中检测胎儿DNA序列,扩大了非创伤性产前诊断的检测范围。方法随机选择早、中、晚期正常孕妇及非妊娠健康妇女各20名,以非妊娠妇女20名作为对照组。提取血浆中的游离胎儿DNA,应用表观遗传学DNA甲基化技术检测其目的基因u-maspin的表达水平,进行定性及相对定量,并对各期孕妇的样本均数进行对比式统计学分析。结果未甲基化maspin在非妊娠健康妇女血浆中未能检测到,在早、中、晚期孕妇血浆中的浓度随妊娠进展呈升高趋势。结论应用表观遗传学DNA甲基化技术从母血浆中检测妊娠期特异性表观遗传学标志物u-maspin可行,扩大了非创伤性产前诊断的检测范围。     

流产模型孕鼠脾脏调节性T细胞分离纯化方法的初步建立

目的探索流产模型孕鼠CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25-T细胞快速高效的分选方法。方法采用免疫磁珠两步法分离流产模型孕鼠脾脏中T细胞,分离后的细胞经台盼蓝染色检测细胞存活率,经流式细胞仪检测分离的纯度。结果流产模型孕鼠脾脏细胞经过免疫磁珠细胞分选法2次分选得到CD4＋/CD25＋调节性T细胞纯度为（93.5±1.1）%,CD4＋/CD25-T细胞纯度为（96.6±0.6）%。结论采用免疫磁珠细胞分选法能够快速高效的得到高纯度的CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25-T细胞。     

婴儿肺炎的护理体会

目的提高肺炎婴儿的存活率和存活质量。方法回顾分析256例肺炎婴儿的护理。结果有效和正确的护理是降低肺炎婴儿死亡率的重要措施。结论护士积极有效的护理措施,准确的观察病情变化,积极控制感染,防止并发症等措施,对提高肺炎婴儿痊愈率非常重要。     

未甲基化Maspin基因在孕妇分娩前后含量变化探讨

本研究旨在检测在孕妇分娩前后未甲基化maspin基因的含量变化及表达水平,为寻找一种更加安全、可靠、简便、快捷、易于被患者接受的非创伤性产前诊断创造条件。报告如下。     

宫颈癌中RASSF1A基因杂合性丢失及HPV感染状态的研究

[目的]研究RASSF1A基因的杂合性丢失(Ioss of heterozygosity, LOH)及人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染与宫颈癌临床病理参数之间的关系.[方法]选择3p上2个微卫星位点,对110例宫颈组织进行LOH及HPV感染状态的分析.[结果]宫颈癌及CIN中RASSF1A基因LOH阳性的比例明显高于正常宫颈(P<0.05);官颈癌Ⅲ和Ⅳ期LOH的阳性率明显高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05);低分化宫颈癌的LOH阳性率明显大于高中分化官颈癌(P<0.05);随CIN级别的增加LOH阳性率也呈逐渐递增趋势,高级别CIN(CINⅢ及原位癌)明显高于低级别CIN(CIN I/Ⅱ)(P<0.05).宫颈癌中HPV感染阳性率明显高于CIN组及正常宫颈组(P<0.05);RASSF1A的LOH阳性率在HPV感染阳性组明显高于阴性组(P<0.05).[结论]RASSF1A基因的改变是宫颈癌发生过程中的较晚期事件,RASSF1A基因的LOH对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值.HPV感染与RASSF1A基因的LOH共同作用在宫颈癌发展过程中更有意义.     

阻断协同刺激分子对大鼠母胎界面中Caspase-3、LamininB的表达及妊娠结局的影响

目的探讨阻断协同刺激分子CD86对自然流产模型孕鼠母胎界面Caspase-3和Laminin B的表达及妊娠结局的影响。方法实验组于妊娠第4.5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单克隆抗体,对照组注射大鼠同型IgG2b,而正常妊娠组不作任何处理。于妊娠第13.5天计算胚胎吸收率,用免疫组化法测定Caspase-3和Laminin B的表达。结果实验组的胚胎吸收率显著低于对照组(x2=7.441,P<0.05);实验组中Caspase-3蛋白阳性表达率明显低于对照组(P<0.05),实验组中Laminin B蛋白阳性表达率明显高于对照组(P<0.05)。结论妊娠早期阻断协同刺激分子CD86可使母胎界面中的Caspase-3和Laminin B分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用,并使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平。