黄药子与当归配伍对大鼠肝脏CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达的影响

目的：观察单用黄药子和黄药子配伍当归后对大鼠肝CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定大鼠肝CYP1A2、CYP2E1基因mRNA在给药后的变化。结果：黄药子组明显诱导CYP1A2、CYP2E1基因mRNA表达，黄药子配伍当归后mRNA表达受到抑制。结论：黄药子诱导P450酶系CYP1A2和CYP2E1mRNA的表达，导致肝中毒。当归配伍黄药子后抑制mRNA表达拮抗肝中毒。     

基于“以药测证”评价大鼠细菌性肺热证候模型

目的基于"以药测证"评价大鼠细菌性肺热证模型。方法 32只大鼠随机分为空白组、模型组、黄芩低剂量组和黄芩高剂量组,每组8只。以肺炎链球菌所致的肺热证候模型为切入点,利用黄芩低剂量和高剂量的干预对比,探讨肺热证模型的评价指标和方法。结果通过各组症状、体温、白细胞及病理切片镜下结果等级的对比研究,说明肺炎链球菌所致的大鼠细菌性肺热证模型符合临床肺热证的表征。结论大鼠细菌性肺热证模型建立成功。     

基于代谢组学整体表征的黄药子肝毒性研究

目的 研究经黄药子染毒后大鼠尿液的代谢表型的改变及其与血浆生化指标的相关性,探讨代谢组学在中药黄药子肝毒性研究中的可行性.方法 运用UPLC-Q-TOF/MS技术手段对空白组、黄药子组的大鼠7 d的尿液进行分析,建立各组大鼠的尿液代谢轮廓图,并进一步借助模式识别方法-主成分分析,从体内微观角度表征各组大鼠代谢网络的异同,来探讨代谢组学在中药黄药子毒性研究中的可行性.结果 初步确定空白和黄药子组大鼠尿液代谢轮廓图的差异,在主成分得分图中给药后大鼠尿液代谢物组发生变化且被明显分为两类,给予黄药子后大鼠尿液中的代谢物在主成分得分图上的落点离散分类,且黄药子组的代谢产物谱变化与血液生化改变相一致,表明代谢组学可用于中药黄药子肝毒性研究.结论 从代谢物组的角度可以诠释传统中药黄药子肝毒性,为传统中药毒性研究从机体整体的观点提供了新的思路、方法和技术手段.     

运用代谢组学方法探讨淫羊藿水段组分对代谢轮廓靶点的干预作用

目的:运用代谢组学方法分析淫羊藿水段组分对正常大鼠尿液中内源性物质代谢的影响,通过寻找相关代谢途径及潜在作用靶点来探究其标志物表达的差异是否会随着体液代谢的循环分布影响着机体的不同系统功能,从而产生潜在的干预作用。方法:SD大鼠分为空白组和淫羊藿水段组分给药组,每组10只,给药组每天按87.3 mg·kg~(-1)给予淫羊藿水段组分1次,空白组给予等量生理盐水,连续灌胃20 d,于最后1次给药后用代谢笼收集大鼠12 h尿液,经处理供UPLC-Q-TOF/MS分析,正离子扫描模式下电喷雾离子源(ESI),毛细管电压1.3 k V,样本锥孔电压60 V;负离子扫描模式下ESI,毛细管电压1.5 k V,样本锥孔电压70 V。结果:鉴定出10个潜在生物标志物,6条主要代谢通路,发现淫羊藿水段组分可通过N,N'-双(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺,N-(3-氨基丙基)-1,4-丁二胺的高表达起到对心脑血管疾病的保护作用,低表达的N-(ω)羟基-L-精氨酸和β-酪氨酸分别表现出不利于肿瘤和神经性疾病的预防。结论:淫羊藿水段组分对正常大鼠心脑血管疾病有显著的保护作用;对神经系统及肿瘤相关疾病存在着药效与毒性共存的特点。其作用机制与氧化胺代谢、酪氨酸代谢、鞘脂类代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等通路有关。     

黄药子配伍当归合煎液与单煎混合液主要成分的含量比较

目的:建立测定黄药子配伍当归中主要成分含量的分析方法,比较黄药子配伍当归合煎液与单煎混合液中阿魏酸和黄独乙素的含量差异.方法:采用HPLC/PDA方法,对黄药子配伍当归合煎液与单煎混合液中的上述2个主要成分进行含量测定.应用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),0.1%乙酸水与纯色谱甲醇进行梯度洗脱,流速为0.8ml·min-1,检测波长300 nm,柱温为30℃,进样量为10μL.结果:这2个化合物在测定的范围内表现出良好的线性(r>0.9995),方法的回收率在93.7%～102.8%之间.黄药子配伍当归合煎液中阿魏酸的含量高于单煎混合液,而黄独乙素在黄药子配伍当归合煎液中的含量低于单煎混合液.结论:黄药子配伍当归合煎可提高有效成分的溶出,降低有毒成分的含量.     

黄芩、黄连和黄柏分别干预热病证候的代谢组学层面差异分析

目的:比较分析黄芩、黄连和黄柏干预热病证候的异同。方法:运用代谢组学技术,以2,4-二硝基苯酚复制的热病证候模型为载体,分别利用黄芩、黄连和黄柏对热病证候进行干预。结果:以热病证候的整体代谢和内源性生物标志物的变化为评价指标,黄芩、黄连和黄柏对表达上调(下调)的热病证候生物标志物的干预数量分别为30,28,21(14,6,3)个。结论:从干预热病证候生物标志物数量得出,黄芩干预作用最佳,黄连次之,黄柏最弱;从干预热病证候生物标志物种类上看,三药的干预作用各有异同。     

基于尿液代谢组学的黄芩抗肝纤维化作用研究

该文运用代谢组学技术并结合病理学,评价黄芩水煎液及黄芩苷抗肝纤维化作用,探究其可能的作用机制、干预靶点及代谢路径。实验采用皮下注射四氯化碳(CCL4)8周诱导大鼠肝纤维化模型,并同时灌胃给予高、中、低剂量的黄芩水煎液及黄芩苷,检测大鼠病理组织形态并进行定量评分,采用UPLC-Q-TOF-MS分析方法进行尿液代谢组学研究,比较不同组在不同时间对肝纤维大鼠尿液中潜在生物标志物含量变化规律。结果表明,黄芩水煎液可通过调控L-色氨酸、3-甲基二氧吲哚、5-羟基吲哚乙酰苷氨酸、甲基丙二酸、亮氨酸,黄芩苷可通过调控左旋色氨酸、3-甲基二氧吲哚、5-羟基吲哚乙酰甘氨酸、4-(2-氨基-3-羟苯基)-2,4-二酮丁酸、犬尿酸及甲基丙二酸,参与色氨酸及亮氨酸代谢有效改善肝纤维化,体现了黄芩"多靶点、多途径"的作用特点。两者均以低剂量为佳,且病理结果无统计学差异。     

基于微透析-UPLC技术的异嗪皮啶 大鼠脑纹状体细胞外液药动学研究

目的：考察大鼠口服给药异嗪皮啶（Isofraxidin）之后的脑纹状体细胞外液药动学特性。方法：大鼠单次灌胃给予异嗪皮啶10 mg·kg-1和20 mg·kg-1后,采用脑微透析活体取样技术和超高效液相色谱质谱联用技术（UPLC-MS）,测定给药后60 min内各时间点大鼠脑纹状体细胞外液中透析液异嗪皮啶的浓度,经回收率校正后,采用WINONLIN 6.1程序以非房室模型法拟合药动学参数。结果：大鼠单次灌胃给予异嗪皮啶10 mg·kg-1和20 mg·kg-1后,其主要药动学参数分别为AUC0-∞（13973.88±1582.984）、（28059.76±4207.66）ng·min·mL-1;t1/2（16.68±0.49）、（17.41±2.88）min;Cmax（498.87±64.36）、（899.81±133.22） ng·mL-1;tmax均为15 min,其中Cmax和tmax均为实测值。结论：异嗪皮啶经大鼠口服给药后能够迅速透过血脑屏障,到达纹状体部位,15 min浓度达到最大值,之后药物以较快速率消除,纹状体细胞外液异嗪皮啶浓度具有明显的剂量依赖性。     

应用Caco-2细胞模型进行毒性中药研究的思路

本文概述了Caco-2细胞模型的基本特点、培养方法及其在中药研究方面的应用, 提出了应用Caco-2细胞模型对毒性中药进行研究的新思路。     

集约化动物养殖区饲料-粪便-饮用水中β受体激动剂的残留特征及其健康风险

目的 以中国东部某养殖区为例,探讨β受体激动剂的饲料添加情况和粪便残留特征,评估饮用水中β受体激动剂的人体健康风险。 方法 利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/MS)检测不同养殖场饲料(n=70)、粪便(n=75)和饮用水(n=59)中12种β受体激动剂的含量,利用Kruskal-Wallis检验分析其在不同畜种粪便间的差异性,通过每日允许摄入量(ADI)评估其健康风险。 结果 该地区各类样品中均存在β受体激动剂残留。饲料中12种β受体激动剂的检出率均高于50%,其中溴布特罗检出率高达100%,非诺特罗浓度最高(102.94 μg/kg)。粪便中β受体激动剂的检出率高于80%,其中溴布特罗和溴代克伦特罗的检出率达到100%,浓度最高为非诺特罗(395.84 μg/kg)。不同畜禽粪便的β受体激动剂存在浓度差异,除特布他林外,其他11种物质均以牛粪中残留浓度最高(P<0.05)。饮用水中亦检出所有12种β受体激动剂,且检出率大部分在80%以上,其中溴布特罗检出率达到100%,非诺特罗浓度最高(30.09 ng/L)。通过单一饮用水暴露,克伦特罗和莱克多巴胺非致癌健康风险较低。 结论 该养殖区饲料中存在添加β受体激动剂的情况并导致较高的粪便残留,已通过环境扩散引起饮用水的污染,需引起相关部门的高度重视。