重组干扰素α-2a增强HSV-TK基因对前列腺癌细胞的体外杀伤作用

目的：探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶（herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK）自杀基因体系联合重组干扰素α-2a（rlFNα-2a）对前列腺癌PC-3m细胞的体外杀伤作用。方法：应用逆转录病毒栽体将HSV-TK基因转染PC-3m细胞,经RT-PCR鉴定后,MTT法检测应用丙氧鸟苷（ganciclovir GCV）前体药物及联合应用rlFNα-2a对转染PC-3m细胞的杀伤作用,以未转染PC-3m细胞为对照：同时采用流式细胞仪检测药物作用前后的变化。结果：GCV对转染后PC-3m细胞有较强的细胞毒作用,半数抑制浓度（IC50）为8.34μg/m1,但其旁观者效应不明显;联合应用rIFN-α2a可明显增强旁观者效应,两药相互作用指数小于0．7。结论：HSV-TK基因与rIFNα-2a联合应用对前列腺癌细胞具有协同杀伤作用。     

胞嘧啶脱氨酶和单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗肝门部胆管癌的体内外实验研究

目的:观察逆转录病毒介导的胞嘧啶脱氨酶(E.coli-cytosinedeaminase,CD)基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplexvirus-thymidinekinase,HSV-tk)基因转染肝门部胆管癌的作用。方法:在脂质体lipofectamine的介导下将含有双自杀基因的逆转录病毒载体PWZLneoCDglytk导入包装细胞PA317,收集其病毒上清,转染FRH细胞,用RT-PCR检测双自杀基因的表达。给予前体药物5-氟胞嘧啶(5-flourocytosine,5-Fc)和(或)无环鸟苷(ganciciovir,GCV)后,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定转基因组及未转基因组FRH细胞存活率。在0.8cm裸鼠肝门部胆管癌模型转染入双自杀基因后,给予5-Fc500mg/kg体重,GCV100mg/kg体重,1次/d,共10d,观察肿瘤生长情况。结果:双自杀基因在FRH细胞中可稳定表达,联合使用5-Fc和GCV对靶细胞增殖的杀伤作用及旁杀伤效应高于单独使用5-Fc或GCV。在裸鼠实验性肝门部胆管癌,实验组肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05);双自杀基因与单自杀基因的作用有显著差异(P<0.05)。结论:逆转录病毒介导自杀基因可有效地杀死肝门部胆管癌细胞,明显抑制裸鼠肝门部胆管癌生长,双自杀基因共表达较单一自杀基因有更强的抗肿瘤作用。     

西藏日喀则市6540例乙肝五项检测结果分析

目的 了解日喀则地区藏、汉两个民族不同人群乙肝病毒感染状况,为预防控制乙肝传播提供科学依据.方法 对2008年6月至2015年5月间在我院进行乙肝五项检测的6540例检验结果进行回顾性分析.结果 我院就诊行乙肝五项检测的人群中HbsAg阳性率为22.45%,其中藏族男性HbsAg阳性率29.03%,汉族男性19.42%;藏族女性24.62%,汉族女性19.24%.纳入研究的人群中乙肝大三阳率、小三阳率、小二阳率、HbsAb阳性率、乙肝五项全阴率分别为5.96%、10.43%、1.36%、30.32%、38.82%;藏族女性分别为7.92%、9.71%、2.39%、24.87%、43.61%;汉族女性分别为4.41%、9.80%、0.97%、35.04%、34.42%;藏族男性分别为8.47%、12.20%、1.90%、21.39%、42.42%;汉族男性分别为4.42%、10.22%、0.64%、36.30%、35.82%.我区为乙肝高流行地区,以"乙肝小三阳"为主要模式.藏族HbsAg阳性率和乙肝大三阳率明显高于汉族,HbsAb阳性率明显低于汉族.藏族2~18岁组乙肝大三阳率10.26%,小三阳率5.02%,小二阳率6.11%,HbsAb阳性率26.86%,全阴率42.36%;19~35岁组分别为9.05%、10.99%、1.95%、24.42%、40.95%;36~54岁组分别为6.7%、14.23%、0.48%、19.62%、44.38%;54岁以上组分别为4.1%、16.41%、2.56%、14.87%、46.67%.藏族18岁以下组乙肝大三阳率明显高于其他组.结论 日喀则地区为乙肝高流行区,区内藏族人群乙肝流行率高于汉族人群,预防和治疗乙肝的重点应放在18岁以下藏族人群.     

环境对栽培甘草遗传多样性的影响研究

目的研究道地产区的甘草经过栽培后遗传多样性的变化,从分子层面探讨中药离其土,则失其味也的科学性,为栽培甘草选育优良品种提供依据。方法采用ISSR-PCR技术对6组24个栽培甘草样品进行遗传多样性分析。结果用6条引物对24个样品DNA进行PCR扩增,共得到43个条带,其中29个条带具有多态性,多态性百分比为67.45%。用NTSYS-pc2.10分析软件进行聚类分析,基本可将不同道地产区的栽培甘草较好的区分,但同一产区种子栽培的甘草与种苗栽培的甘草并不能较好的聚类。结论栽培甘草不同产地遗传多样性都很丰富,同一产地的甘草由于不同的栽培代数遗传多样性有所改变,说明甘草经过多代有性繁殖后遗传多样性会有部分丢失,这可能与环境的选择有关,为优质甘草的栽培育种提供理论基础。     

甘草鲨烯合酶基因及cDNA的克隆与序列分析

目的:对甘草鲨烯合酶(SQS)基因的cDNA及DNA进行克隆及序列分析.方法:根据已报道的光果甘草SQS1基因的cDNA序列设计引物,采用RT-PCR的方法,提取甘草根的RNA然后反转录成cDNA,以cDNA为模板,扩增出SQS基因的cDNA序列,以甘草总DNA为模板,扩增SQS的DNA序列.结果:序列分析表明,克隆获得的甘草SQS1的cDNA编码区为1242 bp,编码413个氨基酸残基,命名为GuSQS1,登录号为GQ266154,与卢虹玉等报道的甘草的2个SQS(SQS1和SQS2)的氨基酸序列一致性为98.55%,88.62%,对应DNA序列全长为4484 bp,含有13个外显子,12个内含子,登录号为GQ180932.结论:甘草SQS的cDNA及DNA序列的获得为进一步研究甘草酸生物合成机制提供了基础.     

经胫骨隧道重建前交叉韧带过程中等长点的确定☆

背景：前交叉韧带重建中等长点的选择较为关键,关于经前内侧关节镜入路及经胫骨隧道重建前交叉韧带过程中等长点确定的问题讨论类研究较少。 目的：观察经前内侧关节镜入路及经胫骨隧道重建前交叉韧带的疗效并讨论等长点的确定的技术问题。 方法：纳入前交叉韧带损伤的患者48例,查体及磁共振检测显示前交叉韧带完全断裂,随机分为经前内侧关节镜入路组26例和经胫骨隧道入路组22例。 结果与结论：随访平均21个月,结果显示经前内侧关节镜入路及经胫骨隧道重建前交叉韧带重建中选择等长点次数差异均无显著性意义。两组Lysolm 评分、Tegner评分和移植物角度a差异均无显著性意义(P > 0.05)。提示采用经胫骨入路建立股骨侧隧道,利用重建中选择等长点的方法,可获得与经前内侧关节镜入路相近的临床结果。     

基于ITS2条形码SNPs的人参和西洋参PCR-SSCP分子鉴别研究

目的:依据人参和西洋参ITS2条形码的专属性SNP鉴别位点,建立利用PCR-SSCP技术鉴别人参和西洋参的方法.方法:查找GenBank上已收录的人参和西洋参ITS2序列,进行比对分析,筛选人参和西洋参ITS2序列的专属性SNP鉴别位点,据此设计引物,采用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法对11个人参样品和10个西洋参样品进行分析,对PCR产物进行测序验证.结果:人参和西洋参样品的PCR-SSCP谱带与各自的对照药材谱带一致,人参和西洋参的PCR-SSCP谱带有显著差异;PCR-SSCP鉴别结果和经测序鉴别结果一致.结论:和测序法相比,PCR-SSCP方法快速、准确,可用于人参和西洋参药材的鉴定.     

北京地区青黛药材商品质量调查及分析

目的调查北京地区14种青黛商品,进行含量测定,并分析影响青黛质量的主要因素。方法按《中国药典》2010版方法测定青黛中靛蓝和靛玉红的含量。结果 14种青黛商品中靛蓝平均含量为2.031%,靛玉红含量为0.066 7%。结论目前市场上青黛药材商品质量存在很大差异,一些样品的靛蓝、靛玉红含量无法达到药典规定的指标。     

实施基本药物制度对社区卫生服务供需双方的影响及对策研究

目的:分析社区卫生服务机构开展基本药物制度试点对供需双方的影响及其原因,为完善政策提供依据。方法:对机构开展问卷调查,对相关人员进行半结构式访谈。结果:基本药物制度试点对不同地区社区卫生服务机构的影响存在差异,部分机构的服务量和收入有所下降,由于补偿不到位影响了医务人员积极性;基本药物价格水平总体上大幅度下降,但次均门诊费用的变化存在地区差异;由于基本药物目录不完善等原因,影响到患者用药。结论:需要根据实际情况对基本药物目录进行调整;完善基本药物招标和配送机制,保障基本药物的生产供应;采取综合措施提高基本药物使用率,控制医疗费用;进一步建立健全社区卫生服务机构的补偿机制。     

并提汤辨证治疗糖尿病的临床观察

目的观察并提汤辨证治疗初发2型糖尿病的临床疗效。方法募集适宜的初发2型糖尿病患者,应用《傅青主女科》并提汤辨证加减治疗,治疗周期2个月,治疗满2个月及停药2周后测量空腹血糖、餐后2 h血糖,根据测量数据,评价疗效。结果完成治疗31例,总有效率93.5%,无效率6.5%。结论运用并提汤辨证加减治疗初发2型糖尿病,可以有效降低空腹血糖、餐后2h血糖,生活质量明显改善,效果显著。