转录因子LAP反式激活α1(I)胶原基因在肝脏星状细胞中的表达

目的　了解激活的肝脏星状细胞 (hepaticstellatecell,HSC)中一种肝脏组织特异的转录因子 肝脏激活蛋白 (liveractivatorprotein ,LAP)在α1(I)基因表达调控中的作用。方法　采用链霉蛋白酶、胶原酶原位灌注、Nycodenz密度梯度离心分离大鼠HSC ,并进行体外培养使之活化。构建含人α1(I)胶原基因启动子片段 ( -80 4～ 14 5 2或 -80 4～ 2 2 2碱基 )的荧光素酶报告基因质粒。用构建的报告基因质粒与LAP表达质粒一起 ,用阳离子脂质体介导的方法 ,瞬时共转染激活的HSC细胞。α1(I)基因启动子的活性通过测定荧光素酶活性来确定。结果　构建的含α1(I)基因第一内含子片段的荧光素酶报告基因 (PGL3 col)比不含α1(I)基因第一内含子的报告基因〔PGL3 col( △intron)〕在HSC中有较强的表达 (荧光素酶活性为 3 15± 45U/mg蛋白与 2 2 0± 70U /mg蛋白 ,P <0 .0 5 )。瞬时共转染LAP表达质粒可明显增强PGL3 col及PGL3 col( △intron)报告基因在HSC中的表达 (荧光素酶活性分别为 5 87± 62U /mg蛋白与3 15± 45U /mg蛋白及 3 2 6± 5 2U/mg蛋白与 2 2 0± 70U /mg蛋白 ,两者比较 ,P <0 .0 5 )。 结论　LAP可以反式激活 (诱导 )α1(I)基因在活化的HSC中表达 ,在其转录调控中起重要作用     

可溶性肿瘤坏死因子受体研究进展

随着对肿瘤坏死因子及其受体系统的深入研究，人们发现了可溶性的肿瘤坏死因子受体，并发现它在机体的免疫调节和与肿瘤坏死因子相关珠病理过程中发挥着重要作用。     

肿瘤生长因子β1及血小板衍生生长因子对肝窦内皮细胞整合素α6β1及黏着斑激酶表达的影响

目的：观察肿瘤生长因子β1(TGFβ1）及血小板衍生生长因子（PDGF）对大鼠肝窦内皮细胞（sinusoidal endothelial cell,SEC)整合素α6β1表达及黏着斑激酶（focal adhesion kinase,FAK)活性的影响。方法：用胶原酶原位灌注、Prercoll不连续密度梯度离心法分离大鼠SEC,并进行体外培养。采用细胞－ELISA和免疫沉淀－蛋白质酪氨酸激酶活性测定法,分别观察TGFβ1及PDGF对SEC表面整合素α6β1表达及FAK活性的影响。结果：经TGFβ1及PDGF作用24h后,α6β1蛋白表达明显强于对照组（P＜0．05）,且呈剂量依赖性。作用至48h,表达继续增强,细胞中FAK的活性也明显增高（P＜0．05）,虽于48h后回落,但仍明显高于对照组。结论：TGFβ1及PDGF可促进SEC表面整合素α6β1的表达及FAK活性增高,可能是它们参与肝纤维化发生的机制之一。     

槲皮素对活化大鼠肝星状细胞TGF-1信号的影响

目的　了解槲皮素对肝脏星状细胞 (HSCs)通过转化生长因子 (TGF)β1诱导的结缔组织生长因子(CTGF)及纤维连接素 (FN)表达的影响。方法　通过胶原酶与链霉蛋白酶原位灌注、Nycondenz一步法梯度离心分离雄性 Wistar大鼠 HSCs。培养活化的 HSCs无血清饥饿后与 10 - 9～ 10 - 5m ol/ L浓度的槲皮素孵育 2 4 ,4 8或 72h。以流式细胞术测定 TGFβ1的表达与分泌。逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)检测 CTGF基因表达 ,免疫组化检测FN表达。结果　流式细胞术检测免疫荧光强度显示 10 - 8～ 10 - 5m ol/ L浓度槲皮素可抑制 HSCs TGFβ1表达 ;10 - 7mol/ L浓度槲皮素孵育 4 8h可显著抑制 HSCs TGFβ1表达 (特异性平均荧光强度分别为 13.33± 2 .4 4和 18.0 8±2 .5 4 ,t=16 .5 2 ,P<0 .0 1)。 TGFβ1可明显促进活化 HSCs CTGF m RNA表达 ,但 10 - 7mol/ L浓度槲皮素在 72 h内几乎可完全拮抗此效应。与对照相比 ,10 - 7mol/ L浓度槲皮素孵育 4 8h可显著抑制 HSCs FN表达。结论　槲皮素可抑制 TGFβ1信号通路 ,包括抑制 TGFβ1、FN表达及 CTGF的基因表达 ,具有潜在的抗肝纤维化治疗作用。     

压力超负荷诱导的心肌肥厚/心力衰竭模型鼠肝肾损伤及巨噬细胞活化水平的变化

  目的  观察压力超负荷诱导的心肌肥厚/心力衰竭小鼠模型中肝肾组织功能有无损伤,以及在此过程中巨噬细胞活化水平的变化。  方法  C57BL/6小鼠通过胸主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)构建压力超负荷诱导的心肌肥厚/心力衰竭小鼠模型,假手术组小鼠主动脉弓不进行结扎。在TAC术后4周（4周TAC组）及8周（8周TAC组）,各组小鼠分别进行超声心动图检查、采血及处死小鼠后取小鼠心、肝脏、肾脏组织标本,检测小鼠肝功能〔包括丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase, ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase, AST）、总胆红素（total bilirubin, TBil）〕,以及肾功能〔血肌酐（serum creatinine, Scr）〕,小鼠心、肝、肾组织苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)观察病理形态学的改变,免疫组织化学染色法检测心脏、肝、肾组织中巨噬细胞活化的标志物F4/80蛋白的表达变化。  结果  心脏超声检测结果显示,与假手术组相比,4周、8周TAC组小鼠心功能指标中左室舒张末期后壁厚度(left ventricular end-diastolic posterior wall thickness, LVPWd)、左室内径(left ventricular internal diameter in diastole, LVIDd)升高,左室射血分数（left ventricular ejection fraction, EF%）和左室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening, FS%）均下降（P<0.05）。与假手术组比较,4周、8周TAC组小鼠血ALT、AST、TBil及Scr含量均升高（P <0.05）;HE染色显示4周TAC组小鼠肝组织即出现空泡化、肝窦轻度充血、炎性浸润等病理改变,8周TAC组小鼠肝损伤更加显著。TAC小鼠肾组织亦有轻微损伤表现,如肾小球轻度损伤,轻微出血。F4/80蛋白免疫组织化学染色结果显示,与Sham组比较,4周及8周TAC组小鼠心脏、肝脏的巨噬细胞活化增强（P <0.005）,而肾脏中巨噬细胞活化水平无明显差异。  结论  压力超负荷诱导的心肌肥厚/心力衰竭小鼠有肝肾损伤发生,此过程有巨噬细胞参与。     

PI3K/Akt信号通路在眼科疾病发生发展过程中的调控作用研究进展

眼科疾病的发生发展与眼组织的异常发育和功能障碍有关,其中相关信号通路的活化在眼科疾病的发生和发展过程中发挥重要作用.PI3 K/Akt信号通路(磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路)广泛存在于各类细胞中,是参与细胞生长、增殖、分化调节的重要信号转导通路.研究发现,PI3 K/Akt信号通路在白内障、糖尿病视网膜病变等多...     

Clara细胞分泌蛋白在实验性气道炎症中的表达

目的　研究哮喘大鼠气道局部 Clara细胞分泌蛋白 (CCSP) m RNA的表达及作用。方法　用卵白蛋白致敏、激发建立大鼠哮喘模型 ,以逆转录聚合酶链反应、斑点免疫印迹及免疫组化方法分别检测大鼠激发哮喘后3、7和 14天肺组织 CCSP m RNA、支气管肺泡灌洗液 (BAL F)中 CCSP蛋白水平及细小支气管 Clara细胞比率。结果激发哮喘后大鼠 CCSP m RNA表达减少 (对照为 0 .6 5± 0 .0 5 ,激发 3天、1周及 2周后分别为 0 .5 7± 0 .0 5、0 .5 1±0 .0 4及 0 .5 0± 0 .0 3,P均 <0 .0 1) ,BAL F中 CCSP蛋白含量降低 (对照为 5 9.6 7± 4 .72 ,激发 3天、1周及 2周后分别为 4 9.33± 4 .6 3、4 4 .0 0± 4 .6 3、4 3.5 0± 2 .5 9,P均 <0 .0 1) ,Clara细胞比率下降 (P<0 .0 1或 0 .0 5 )。结论　哮喘大鼠 CCSP m RNA表达减少 ,CCSP水平降低 ,可能通过对磷脂酶 A2的抑制作用的减弱而促进气道炎症     

可溶性肿瘤坏死因子受体研究进展

随着对肿瘤坏死因子及其受体系统的深入研究.人们发现了可溶性的肿瘤坏死因子受体,并发现它在机体的免疫调节和与肿瘤坏死因子相关疾病的病理过程中发挥着重要作用。     

舍曲林对兔心力衰竭时左室电机械重构的影响

慢性心力衰竭（心衰）患并发抑郁症常见，其患病率为13．0％-77．5％，但临床对心衰合并抑郁症的诊断率极低，因为心衰的表现往往会掩盖抑郁症的精神症状。当心脏情况控制后，仍有疲乏、缺乏快感、睡眠障碍及体重下降等诸多症状时，应考虑合并有抑郁症的可能。     

胃泌素和丙谷胺对人胃癌细胞增殖的调控

为探讨胃泌素及其受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对体外培养的人胃癌细胞株HGC803生长的影响,我们采用MTT比色分析法检测了它们对细胞增殖的调控作用。并用EIA法测定了胃部细胞的胃泌素自分泌。将对数生长期HGC803细胞接种于96孔板,待其贴壁后换为无血清RPMI1640液培养24小