构叶的降压作用及其机制初步分析

实验表明构叶浸膏剂(2.5g,5g/kg)灌胃,能剂量依赖性地降低自发性高血压大鼠血压。并观察到在大鼠肛尾肌,构叶总甙(0.1％,0.3％)能使去氧肾上腺素累积量效曲线右移,同时最大效应下降。用L—B公式证明去氧肾上腺素的解离常数未变,说明构叶总甙具有非竞争性α受体阻断作用。该作用可能与构叶的降压效应有关。     

硬膜外腔吗啡对全髋置换术围手术期D-二聚体的影响

目的 研究阿片类药物硬膜外腔持续注射对全髋置换手术围术期D-二聚体的影响。方法选择40例择期全髋关节置换手术患者,随机分成两组。吗啡组：手术开始前15min于硬膜外腔给予吗啡4mg＋0．9％生理盐水10ml,术毕硬膜外腔吗啡80μg／h持续给药48h;对照组：术前15min给予0．9％生理盐水10ml,术毕硬膜外腔给予0．15％罗哌卡因2．0ml／h持续给药48h。分别于麻醉前5min、术毕、术后24h、术后48h4个时点抽取静脉血测定血浆IL-6、D-二聚体含量和凝血酶原时间。结果两组患者术毕、术后24、48h的IL-6、D-二聚体含量较麻醉前均显著升高（P〈0．01）,术毕时达到峰值,随后逐渐回落。吗啡组患者术毕、术后24、48h时间点IL-6、D-二聚体含量均显著低于对照组（P〈0．05）;硬膜外腔注射吗啡对围手术期凝血酶原时间和出血量均无明显影响。结论硬膜外腔注射吗啡可抑制凝血系统的过度激活．减少D-二聚体的生成,改善围术期高凝状态。     

开智灵组方改善小鼠记忆作用研究

目的观察开智灵组方对改善记忆的影响及其作用机制。方法小鼠随机分为六组,分别为正常对照组、开智灵组方低剂量组、中、高剂量组、核桃酶解提取物组(66.67 mg/kg)、牛磺酸组(33.33 mg/kg),实验组小鼠每天灌胃给药0.2 m L/10 g,每日一次,30 d后通过避暗实验、水迷宫实验测试学习成绩,并进行重复性实验和消退实验。在避暗实验重复性实验结束后,试剂盒测定小鼠海马中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;在水迷宫实验重复性实验中,Western blot测定小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B(Trk B)蛋白含量表,Real-time PCR测定m RNA含量表达。结果开智灵组方在小鼠避暗实验、小鼠水迷宫实验前后两次结果均为阳性。避暗实验重复性实验中各给药组小鼠海马组织中SOD含量有升高趋势、MDA含量有降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。水迷宫实验重复性实验中各给药组小鼠海马组织中BDNF、Trk B的m RNA和蛋白表达量均上调,差异有统计学意义(P0.05)。结论开智灵组方对小鼠具有良好的改善记忆的作用,其机制可能与调节脑内BDNF及Trk B表达有关。     

隐丹参酮固体分散体的制备及性质研究

目的制备隐丹参酮固体分散体,提高隐丹参酮的溶出度。方法采用溶剂蒸发法制备隐丹参酮-PVP固体分散体,熔融法制备隐丹参酮-PEG固体分散体,利用体外溶出度、差热分析、显微观察研究固体分散体的性质及其对溶出度的影响。结果PVP及PEG固体分散体在45min的溶出度分别达到原料药的9.7倍和7.5倍,固体分散体的DTA曲线中隐丹参酮的特征熔融峰消失。结论两种固体分散体均能显著提高隐丹参酮的溶出度,而PVP固体分散体比PEG固体分散体具有更高的溶出度。     

PARP-2在大鼠心肌肥大中的作用

目的:在细胞和整体水平研究多聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶2(PARP-2)在心肌肥大过程中表达的变化规律以及PARP-2对心肌肥大的调控作用。方法:健康雄性SD大鼠采用腹主动脉缩窄法(AAC)建立心肌肥大动物模型,采用real-time PCR和Western blot检测PARP-2的mRNA和蛋白表达变化;使用PARP-2特异性的siRNA干扰序列来处理细胞后,通过检测心肌细胞表面积及ANF、BNP和β-MHC的mRNA表达变化来作为评判心肌细胞肥大状况。结果:AAC大鼠心脏组织中PARP-2的蛋白和mRNA表达均显著上调;在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大模型中,AngⅡ能时间和剂量依赖性地上调PARP-2的mRNA和蛋白表达;用siRNA干扰序列沉默PARP-2能够逆转AngⅡ所诱导心肌细胞的肥大。结论:在AngⅡ诱导的心肌细胞肥大的体外模型和腹主动脉缩窄诱导的心肌肥大动物的体内模型中,PARP-2的mRNA和蛋白水平均显著上调;特异性沉默PARP-2能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。     

ERKs及细胞内游离钙在内皮素-1诱导心肌细胞肥大反应中的作用

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERKs)及细胞内游离钙(i)在内皮素-1(ET-1)介导心肌细胞肥大反应中的作用及机制。方法:利用培养的新生大鼠心肌细胞,①以蛋白合成速率、蛋白含量及细胞表面积为心肌肥大反应的指标;②用滤纸法测定ERKs活性;③用Fura-2/AM作为钙荧光指示剂测定心肌[Ca²⁺]i浓度。结果:①ET-1浓度依赖性增加新生大鼠心肌细胞蛋白质含量和心肌细胞表面积、ERKs活性及[Ca²⁺]i浓度,以上作用可被ET_A受体拮抗剂BQ123所完全抑制,被百日咳毒素(PTX)部分抑制,而ET_B受体拮抗剂BQ788则无效;②ERKs激酶特异性抑制剂PD98059可完全抑制ET-1激活ERKs的作用,钙通道拮抗剂硝苯地平可明显抑制ET-1介导的[Ca²⁺]i浓度增加,但二者皆仅部分抑制ET-1介导的心肌细胞肥大反应;③蛋白激酶C(PKC)选择性抑制剂staurosporine并不能明显抑制ET-1介导的ERKs激活,但可抑制ET-1介导的的[Ca²⁺]i浓度增加及心肌细胞肥大反应。结论:ET-1主要通过ET_A受体并经PTX敏感的G-蛋白介导心肌细胞肥大反应,该作用至少涉及两条途径:①通过PKC介导的心肌[Ca²⁺]i浓度增加;②不通过PKC介导的ERKs激活。     

GLP-1类似物的体外活性及宿主杂质测定

胰高血糖素样多肽1 (glucagon-like peptide-1,GLP-1)通过提高细胞内环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)水平刺激胰岛β细胞分泌胰岛素。GLP-1受体(GLP-1 receptor,GLP-1R)是2型糖尿病药物研发的重要靶点,其激动剂也已成为新型抗高血糖药物。本研究基于稳定表达GLP-1受体的GLP-1R-GFP (green fluorescent protein)-HEK293A细胞,通过均相时间分辨荧光法建立了一套适合GLP-1类似物的体外活性检测方法。通过对细胞活性、细胞密度、是否避光等检测条件进行优化后,利用该方法检测了利拉鲁肽等4个GLP-1类似物刺激GLP-1R-GFP-HEK293A细胞后所产生的c AMP含量变化,通过c AMP量效曲线计算其半数有效剂量值(concen‐tration for 50%of maximal effect,EC₅₀),对药物的体外活性进行评价。本研究还利用酶联免疫吸附实验和定量实时聚合酶链式反应实验分别测定了GLP-1类似物宿主细胞蛋白和宿...     

神奇的外用制剂

观看足球比赛时,常常见到这样的画面：运动员腿脚受伤后表情痛苦,卧倒在地,队医立即赶过来拿着一个小喷雾器对着运动员受伤部位喷几下,很快运动员又恢复跑动,继续回到绿茵场。许多人很好奇,给运动员喷的究竟是什么神奇的止痛药呢？     

短链酰基辅酶A脱氢酶在心肌细胞凋亡中的作用

目的:研究短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-Co A dehydrogenase,SCAD)在心肌细胞凋亡中的变化,探讨其与心肌细胞凋亡之间的关系。方法:以叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,t BHP)刺激心肌细胞建立凋亡模型。检测细胞存活率、SCAD mRNA和蛋白表达、SCAD活性以及游离脂肪酸含量变化;并采用SCAD的最优干扰序列siRNA-1186进行干扰,观察其对心肌细胞凋亡的影响。结果:与对照组相比,在t BHP诱导的心肌细胞凋亡模型中,SCAD的mRNA和蛋白表达均显著下调。与阴性对照序列组相比,siRNA-1186干扰后心肌细胞的SCAD表达和活性明显下降,心肌细胞游离脂肪酸含量明显增加,同时,心肌细胞出现了明显凋亡,与t BHP诱导的心肌细胞凋亡趋势一致。结论:SCAD表达失调可能参与心肌细胞凋亡的过程,上调SCAD可能成为干预心肌细胞凋亡的重要环节之一。     

结缔组织生长因子及其在心血管疾病中的作用

结缔组织生长因子(CTGF)是一种新近发现的细胞因子,是即刻早期基因CCN(CTGF,Cyr61,Nov)家族的成员之一,具有重要的生物学功能。其表达受很多因素调节,参与多种生理及病理过程。研究表明,其在动脉粥样硬化、心肌梗死、高血压等心血管疾病的发生、发展中有重要作用,涉及了多条信号通路,有望成为一些疾病的治疗靶点。