冬凌草甲素抗消化系肿瘤的研究进展

冬凌草甲素具有清热解毒、消炎止痛、健胃活血及抗肿瘤等作用,近年来其抗肿瘤作用受到国内外学者关注。研究表明该药对多种肿瘤有效,笔者对近年冬凌草甲素抗消化系肿瘤的研究进展进行综述。     

冬凌草甲素抑制SW1990细胞增殖

目的：研究冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞增殖抑制作用并探究其可能机制。方法：以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,光学显微镜观察药物对细胞形态的影响,DAPI染色法后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变,流式细胞仪检测结果显示不同浓度组细胞凋亡率明显高于对照组。结论：冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞增殖有明显抑制作用,其作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

胰腺癌近距离放疗研究进展

胰腺癌是一病情凶险、治愈率低、预后极差的消化道恶性肿瘤,5年生存率仅为5.0%或更低[1].放疗是治疗胰腺癌的重要手段之一.但由于胰腺癌对放射线的敏感性较低,而周边的胃、十二指肠、大小肠、肝、肾及脊髓对放射线耐受性较低,故传统的体外放疗极易造成副损伤.因此,许多学者对胰腺癌局部放疗产生了兴趣.胰腺癌局部放疗主要集中在立体定向照射、术中局部放疗、组织间近距离治疗等.现介绍组织间近距离治疗及其对胰腺癌的疗效.     

放射性塑料胆管支架的实验研究

目的 设计及制作放射性塑料胆管支架,评价其可行性和安全性.方法 设计及制作携带125Ⅰ粒子的塑料支架.选用健康家养猪16只,胆总管植入放射性塑料胆管支架,放射计划系统(TPS)计算距粒子轴心5 mm处的参考点剂量,根据剂量不同分为3个照射组:50 Gy照射组(n=4)、100 Gy照射组(n=4)、150 Gy照射组(n=4).另选同级别猪4只,分为2组:空白对照组(n=2),仅作胆管造影,不植入支架;支架对照组(n=2),植入无放射活性碘粒子的塑料支架.术前及支架植入后第1、7、14、30和60天分别检测血常规、血清淀粉酶、肝功能和肾功能.在支架植入后第14、30和60天分别处死动物,观察腹腔有无出血、积液和腹膜炎性反应,胆管有无穿孔、狭窄或者扩张,支架周围脏器有无损伤.胆管组织经H-E染色,光学显微镜分析并摄像.结果 成功制作并植入放射性塑料胆管支架,各剂量照射组支架周围脏器无渗出、出血和坏死,未发现胆管穿孔.胆总管病理检查:对照组黏膜和黏膜腺体明显增生;各剂量照射组支架周围黏膜层明显坏死,50Gy照射组黏膜上皮层缺损,黏膜腺体轻度增生;100 Gy照射组黏膜上皮层消失,黏膜腺体无明显增生;150Gy照射组黏膜上皮层消失,黏膜腺体明显减少.各组外周血实验室检查未见明显变化.结论 放射性塑料胆管支架的设计安全、可行,除对胆总管黏膜有机械作用外,照射作用明显.     

猪内镜逆行胰管造影的实验研究

背景:内镜逆行胰管造影(ERP)是胰腺疾病的重要诊治手段之一,该技术需经验丰富的内镜医师操作,初学者操作会有一定风险。直接以患者为对象培训该技术有很大的局限性,因此寻找合适的动物模型成为内镜医师关注的问题。目的:对家猪行ERP,探讨其作为ERP操作培训动物模型的可行性和应用价值。方法:6只健康家猪术前肌内注射氯胺酮20mg镇静,动物安静后予腹腔注射3%戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉。麻醉稳定后行ERP操作和胰管支架植入。术中全程监测心率和呼吸。结果:4只家猪ERP操作获成功,2只找到胰管开口但操作失败。猪胆管与胰管不汇合,各自开口于十二指肠壁。造影显示胰管左右支汇合成主胰管,开口于十二指肠壁。ERP术后1d,部分动物血白细胞计数和淀粉酶水平显著升高,7d后基本恢复至正常水平。结论:对猪行ERP是可行的,且可采用较简单的麻醉方式。以猪为动物模型行ERP操作,可作为初学者培训的方法之一,也可用于相关医学研究。     

β-榄香烯抗肝癌的促凋亡机制研究

目的：研究中药莪术提取物β-榄香烯对人肝癌HepG2 细胞增殖抑制及诱导凋亡,以及小鼠肝癌H22 荷瘤小鼠凋亡相关蛋白表达的作用。方法:体外培养人肝癌HepG2 细胞,MTT 法检测β-榄香烯对细胞增殖的影响,Annexin V-FITC/PI 双染检测细胞凋亡。通过建立H22 小鼠肝癌荷瘤模型,观察β-榄香烯对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对HepG2 细胞具有抑制增殖的作用,呈剂量和时间的依赖性;Annexin V-FITC/PI 法检测到早期凋亡细胞。不同实验组对荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用程度不同,各药物浓度组Caspase-3 蛋白均上调（P<0.05）,P65 蛋白均下调。结论：β-榄香烯可有效抑制人肝癌HepG2 细胞的增殖,其抑制癌细胞增殖的途径是通过诱导细胞发生凋亡,并且与上调凋亡相关蛋白Caspase-3、下调NF-κB P65 相关。     

^125I粒子组织间植入对人胰腺癌裸鼠移植瘤PCNA、VEGF表达的影响

背景：组织间近距离放射疗法是一种有效局部控制胰腺癌的方法,目前已用于前列腺癌、乳腺癌、脑胶质瘤、舌癌、直肠癌等的临床治疗。目的：观察^125I粒子组织间植入对人胰腺癌裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其治疗胰腺癌的分子机制。方法：BALB／c裸鼠腋下接种人胰腺癌SW1990细胞。按不同剂量率将裸鼠分为2．18cGy／h组、4．46cGy／h组、5．62oCy／h组和7．26cGy／h组,通过TPS计算各治疗组所需植入粒子的放射活度和数量,并设立相应对照组。粒子植入后每4d测量肿瘤体积．21d后处死所有裸鼠,取胰腺癌移植瘤组织行HE染色,以免疫组化SP法检测移植瘤组织PCNA和VEGF表达。结果：治疗组肿瘤体积增长缓慢,可见大片坏死;而对照组肿瘤体积增长迅速,无明显坏死。2．18cCy／h组、4．46cGy／h组、5．62cGy／h组和7．26cGy／h组PCNA（49．7％±6．0％、37．8％±3．6％、30．6％±2．1％和20．8％±2．3％）和VEGF（17．1％±2．7％、9．4％±1．5％、7．4％±0．5％和3．6％±0．9％）阳性率逐渐减弱,且均显著低于相应对照组（P〈0．01）。结论：^125I粒子组织间植入人胰腺癌裸鼠移植瘤可引起肿瘤组织坏死,明显抑制肿瘤生长,可能与其诱导肿瘤组织PCNA和VEGF表达降低有关。     

冬凌草甲素对SW1990细胞的增殖抑制作用

背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应较小且疗效尚佳,在胰腺癌防治方面有较大的潜力与优势,正日益受到国内外医学界的关注.本研究观察中草药冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制作用,并探讨其可能机制.方法:以不同浓度(12.5、25和50 μmol/L)的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,光学显微镜下观察药物对细胞形态的影响.DAPI法染色后,用荧光显微镜观察细胞核凋亡,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测细胞凋亡前后端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化.结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的细胞凋亡形态学改变.冬凌草甲素12.5、25和50 μ mol/L给药组早期细胞凋亡的百分率显著高于未给药组[(2.17±0.57)%、(5.83±0.57)%、(4.43±0.78)%vs(0.30±0.17)%,P＜0.05],晚期细胞凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组[(5.10±0.98)%、(7.03±1.52)%、(10.13±0.70)% vs 2.63±0.06)%,P＜0.05].冬凌草甲素12.5、25和50 μmol/L给药组端粒酶hTERT mRNA的表达水平显著高于未给药组(7.72±0.33、8.17±0.67、10.36±1.65 vs 5.94±0.17,P＜0.05).结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与药物引起端粒酶hTERT mRNA的表达水平均降低有关.     

提高西医诊断学操作课教学质量的探讨

本文通过西医诊断学操作课教学进行规范化体检方法的操作,在病理体征检查和问诊、书写病史的训练时,有效应用模拟人或标准化病人、虚拟诊断系统参与教学,有效进行操作效果反馈、考试环节的改革,并设想改善教学环境和条件。经过上述教学实践,可使学生掌握诊断疾病的基础理论、基本知识和基本技能,培养学生独立进行全身体格检查和综合分析临床资料的能力。同时,探索适合中医药院校西医诊断学操作课质量的教学新模式。     

冬凌草甲素对胰腺癌细胞骨架蛋白F-actin的影响

背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,DAPI染色法染色后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态学变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,25、50μmol/L冬凌草甲素给药组早期凋亡的百分率显著高于对照组(3.78±0.46,9.51±0.63 vs 0.73±0.06,P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(14.40±1.78,20.53±2.54 vs 4.16±0.31,P<0.05)。细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚状态。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白F-actin解聚。