补骨脂苷和异补骨脂苷与牛血清白蛋白相互作用研究

[目的]研究补骨脂苷(PO)和异补骨脂苷(IPO)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。[方法]通过紫外吸收光谱法、荧光淬灭光谱法、同步荧光光谱法、三维荧光光谱法分析PO和IPO对牛血清白蛋白的淬灭机制、结合常数、结合位点数及构象影响。[结果]PO和IPO对牛血清白蛋白产生了静态淬灭作用,两种药物与BSA有较弱的结合,在BSA上的结合位点均为位点Ⅱ,并且对BSA上色氨酸氨基酸残(Trp)基微环境产生了微弱的影响。[结论]借助光谱法揭示了PO和IPO与BSA相互作用的机制。     

基于网络药理学和分子对接技术探讨糖网明目颗粒治疗糖尿病视网膜病变的作用机制

[目的] 通过网络药理学和分子对接技术研究糖网明目颗粒治疗糖尿病视网膜病变（DR）的潜在分子机制,为糖网明目颗粒防治DR新药研发提供方向。[方法] 在中药系统药理分析平台（TCMSP）检索糖网明目颗粒组成药物的化学成分信息,通过PharmMapper服务器,Disgenet和GeneCards数据库建立活性成分靶点数据库和DR靶基因数据库,进行靶点匹配获取药物-疾病共同靶点。随后构建PPI网络图,并筛选核心靶点,构建中药-活性成分-核心靶点网络图。用R-4.1.1对药物-疾病共同靶点进行GO和KEGG富集分析。最后使用AutoDock软件进行分子对接分析,并用Pymol和Discovery Studio软件将结果可视化。在此基础上通过体外细胞实验对上述结果进行验证。[结果] 本文筛选得到糖网明目颗粒-DR共同靶点62个;GO富集分析确定了226个项目,KEGG通路富集筛选得到163条信号通路,主要有糖尿病并发症中的晚期糖基化产物（AGE）-晚期糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、FoxO信号通路等多种途径。分子对接结果显示糖网明目颗粒的有效成分木犀草素、表儿茶素及花生四烯酸等能与靶蛋白骨形态发生蛋白2（BMP2）、表皮生长因子受体（EGFR）和纤维连接蛋白1（FN1）等形成较为稳定的分子结合。在高糖诱导的人视网膜母瘤细胞Y79中,糖网明目颗粒能够抑制EGFR和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）14的蛋白表达。[结论] 本研究初步探讨了糖网明目颗粒治疗DR的作用机制,结果表明糖网明目颗粒治疗DR具有多成分,多靶点,多途径协同发挥药效的特点,为后续深入研发提供指导与部分依据。     

基于AHP-CRITIC法的正交设计优化柏参洗剂提取工艺

摘要：目的:设计正交试验优选柏参洗剂提取工艺。方法:采用水蒸气蒸馏法,设计正交试验考察溶媒量、浸泡时间、蒸馏时间等因素对花椒挥发油含量影响优选提取工艺;采用层次分析法（AHP）、指标相关性权重法（CRITIC）、AHP-CRITIC混合加权法确定小檗碱、总苦参碱、蛇床子素和得膏率的权重系数,并结合正交试验结果优选醇提工艺。结果:对花椒挥发油提取率有显著影响的因素为蒸馏时间,优选最佳工艺为6倍溶媒量,浸泡1 h,蒸馏6 h; AHP-CRITIC混合加权法科学优选出对最佳醇提工艺为10倍40%乙醇,提取0.5 h。结论:柏参洗剂的提取工艺稳定可行,可为工业生产提供数据参考。     

金银花抗氧化活性整合指纹图谱的建立及其在质量评价中应用

[目的]建立评价金银花抗氧化活性的方法,比较不同产地金银花药材抗氧化活性大小,确定抗氧化活性成分的贡献率。[方法]采用在线快速活性筛选高效液相色谱-二极管阵列检测器-1,1-二苯基-2-苦基肼(HPLC-DAD-DPPH)甲醇枸橼酸在线体系,建立金银花抗氧化活性指纹图谱。[结果]确定了绿原酸和异绿原酸A为其主要的抗氧化活性成分,以金银花中8个主要活性成分为抗氧化活性指标对不同产地金银花的质量进行控制,确定了广州野生金银花质量最佳。[结论]该方法简便可行,基于活性整合指纹图谱技术筛选药材中的抗氧化活性成分并以活性成分为指标,为全面有效评价中药质量提供了可借鉴的模式。     

新疆两色金鸡菊中绿原酸与总黄酮含量测定

目的:建立HPLC法和UV法分别测定新疆两色金鸡菊中绿原酸和总黄酮的含量。方法:采用HPLC法测定绿原酸含量,Agilent Eclipse Plus C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以流动相0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长348 nm,柱温30℃。采用UV法测定总黄酮含量,NaNO_2-Al(NO_3)_3-NaOH方法显色,以芦丁为对照,在波长522 nm处检测。结果:方法在考察的浓度范围内线性关系良好,精密度、准确度和稳定性RSD均小于5%。不同产地新疆两色金鸡菊绿原酸含量为1.39%～5.76%,总黄酮含量为19.10%～28.40%。结论:本试验建立了含量测定的方法,简便可靠,重现性好,适用于两色金鸡菊中绿原酸和总黄酮的含量测定。     

高效液相色谱法测定菟丝子中绿原酸、对-香豆酸和金丝桃苷的含量

[目的]建立同时测定菟丝子中绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的含量的高效液相色谱法,为菟丝子的质量标准建立提供依据。[方法]色谱柱为依利特ODS C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速为1 m L/min,检测波长为360 nm。[结果]在此色谱条件下,3种成分可完全分离。绿原酸、对-香豆素和金丝桃苷的线性分别为2.00~100μg/m L(r=0.999 3),6.25~100μg/m L(r=0.999 1),0.50~50μg/m L(r=0.999 1)。平均回收率分别为100%(RSD=3.2%)、102%(RSD=1.7%)和102%(RSD=3.1%)。[结论]该方法简便可行,重复性好,可用于菟丝子的质量评价。     

续断中有效成分木通皂苷D大鼠胆汁内排泄研究

【目的]建立液质联用方法同时检测给药后大鼠胆汁中木通皂苷D及其代谢产物,研究木通皂苷D在大鼠胆汁中的排泄情况。【方法】大鼠灌胃给药木通皂苷D后按照设定时间点收集胆汁,通过建立的液相质谱联用方法分析胆汁中的木通皂苷D及其代谢产物的含量变化情况。【结果】实验同时检测到了木通皂苷D与其3个代谢产物,并对浓度较大的木通皂苷D和HNsaponinF进行了定量。木通皂苷D及HNsaponinF在3．2～2000ng／mL与0．8～500．g／mL范围内线性关系良好,日间日内精密度均小于7．72％,给药24h内累积排泄量为5845．5ng与3996．8ng。【结论】该方法符合生物样品测定要求,可用于胆汁中木通皂苷D及其代谢产物HNsaponinF的定量分析。     

“Cocktail”体外探针法评价补骨脂素对人肝微粒体P450酶亚型活性的影响

[目的]利用Cocktail体外探针法,测定补骨脂有效成分补骨脂素对人肝微粒体多种P450酶亚型活性的影响,为补骨脂临床联合用药安全提供参考。[方法]建立液质联用方法,同时测定人肝微粒体P450酶中各探针代谢产物6α-OH紫杉醇、α-OH咪达唑仑、4-OH甲苯磺丁脲、去甲基右美沙芬、7-OH香豆素、对乙酰氨基酚和6-OH氯唑沙宗的含量。通过Cocktail体外探针实验中补骨脂素对人肝微粒体P450酶各亚型的影响,证明补骨脂对人体肝脏的代谢有影响作用。[结果]所建立的液质联用方法精密可靠,符合生物样品测定要求,可用于人肝微粒体中各P450酶探针的代谢产物的定量分析。与对照组相比,补骨脂素组各底物的转化率均下降,其中香豆素的转化率下降最为显著,补骨脂素对其转化的抑制率为95.84%,而紫杉醇的转化的抑制最不明显,仅为10.39%。补骨脂素对其他几种底物的转化抑制率均在82%～91%之间。[结论]补骨脂素对人肝微粒体的CYP1A2、2A6、2C8、2C9、2D6、2E1和3A4亚型均有抑制,其中对CYP2A6、1A2和2D6 3种亚型的影响较为显著,表明补骨脂素对人肝微粒体P450酶不同亚型影响差异显著,长期给药补骨脂应关注药物联合用药安全。     

芒果叶化学成分研究（I）

目的 研究芒果Mangifera indica叶的化学成分。方法 采用正相硅胶、反相ODS、Sephadex LH-20等柱色谱以及高效液相色谱法进行分离纯化,并通过理化性质与光谱分析方法鉴定化合物的结构。结果 从芒果叶70%乙醇提取物中分离了11个化合物,分别鉴定为槲皮素-3-O-β-L-鼠李糖苷（1）、金丝桃苷（2）、槲皮素-3-O-β-葡萄糖苷（3）、7-O-甲基槲皮素-3-O-β-L-鼠李糖苷（4）、鼠李糖-3-O-β-葡萄糖吡喃糖苷（5）、穗花衫双黄酮（6）、芒果苷（7）、鸢尾酚酮-3-C-β-葡萄糖苷（8）、桑橙素-3-C-β-葡萄糖苷（9）、2,4′,6-三羟基-4-甲氧基二苯甲酮-2-O-β-葡萄糖苷（10）、鸢尾酚酮-3-C-(6-O-p-羟基苯甲酰基)-β-葡萄糖苷（11）。结论 化合物4、10为首次从芒果属植物中分离得到,化合物11的NMR数据为首次报道。