人乳头瘤病毒11型主要衣壳蛋白L1基因的克隆及序列分析

目的 从临床尖锐湿疣标本克隆人乳头瘤病毒（HPV）11型主要衣壳蛋白L1基因,进行序列测定及序列分析比较,以为研究该临床病毒株的免疫原性及流赞美同学奠定基础。方法 以临床尖锐湿疣标本总DNA为模板,用L1基因保守区简并引物以PCR方法分段扩增衣壳蛋白L1基因在部,重组入pGEM-3zf(-)质粒载体,以双脱氧法双向测定插入片段序列,拼接出L1基因序列,通过BLAST2.0与已报道序列进行比较。结果 从西安地区一尖锐湿疣临床标本克隆到的一株HPV11型L1蛋白编码序列与一文献报道大部分相同,但有些位点有点突变,结论 构建的pGEM-3zf(-)重组质粒为进一步通过杂交、体内分段表达等手段研究研究该株病毒L1蛋白的免疫学和流行病学性质创造了条件。     

膨胀纹的光电治疗策略

膨胀纹具有较高的发生率,临床上分为红色膨胀纹和白色膨胀纹,不同类型膨胀纹的色素、血管、胶原等方面的变化存在差异。根据这些靶色基的变化特点,可以选择相应的光电治疗手段进行针对性治疗。本文通过文献分析发现:以血红蛋白为主要靶基的激光及强脉冲光对红色膨胀纹治疗具有较好的疗效,不良反应小。有增加黑色素效应的激光对白色膨胀纹有效。促进胶原新生、重排的点阵CO_2激光及非剥脱点阵激光能够有效的改善白色和红色膨胀纹,其中非剥脱点阵激光不良反应较小。多种形式联合治疗或者加用具有生长因子等细胞因子可以提高疗效。但是目前的文献,都存在样本量偏小,诊断标准及研究方案不统一等缺陷,这使得各种技术之间无法进行直接比较。     

烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配*★

背景：既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用，但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道。 目的：观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系。 方法：将30只大鼠右侧T9~L1阶段脊神经根切断，制作失神经支配皮肤模型；然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4 cm的深Ⅱ度烫伤创面，设为模型组，左侧对称正常皮肤制作同样的创面，设为对照组，伤后连续观察创面变化，于7，14，21 d采用免疫组织化学法观察Ⅰ和Ⅲ胶原分泌情况，并计算Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化，探讨创面愈合速度及愈合质量。 结果与结论：模型组Ⅰ，Ⅲ型胶原分泌和Ⅰ/Ⅲ型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组(P < 0.05)。模型组Ⅰ型胶原分泌与伤后7，14，21 d逐渐增加(P < 0.05)，Ⅲ型胶原于伤后21 d时分泌明显增高(P < 0.05)，Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与伤后21 d时明显降低(P < 0.05)。结果证实，创面早期神经支配可以促进创面愈合，创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量。     

增生期和成熟期皮肤瘢痕中的神经纤维形态学观察

摘要 背景 目前，虽有许多学者应用LSCM对神经轴突进行了研究，但对末梢神经的研究较少。目的 观察不同时期增生性瘢痕(HS)中神经纤维数量和形态的变化。 设计和时间 本实验为神经生理学对照实验，于2006年6月至2007年7月在山东大学附属省立医院进行。 实验对象 实验对象为创伤愈合后1个月至23年来院行瘢痕整复术的患者，共30例。 方法 标本取自烧伤或创伤后HS形成1月～23年的患者，分为增生期瘢痕组（≤6月）和成熟期瘢痕组(＞6月)，正常对照组取自患者的供皮区。利用单克隆抗神经丝蛋白(NF)抗体免疫荧光染色技术，在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)下观察不同时期瘢痕组织和正常皮肤组织中神经纤维的差异。 主要观察指标 本实验用神经丝蛋白免疫阳性神经纤维的阳性面积比作为评价神经支配强度的指标，同时对神经纤维形态学的改变进行重点描述。 结果 增生期瘢痕组神经纤维的阳性面积比明显高于正常对照组（P＜0.05），神经纤维分布杂乱，形态不规整，有局部的扭曲变细和肿胀断裂；成熟期瘢痕组神经纤维的阳性面积比明显低于正常对照组（P＜0.05），神经纤维排列较规整，内部结构和立体结构均接近正常。结论 瘢痕增生过程中神经纤维的密度和形态皆随时间变化而变化。     

人体表皮神经构筑的研究进展

皮肤感觉神经来自脊神经,为有髓神经,从浅筋膜到达真皮乳头,脱髓鞘后进入表皮及靶组织。进入表皮层的神经,分支并穿过表皮各层伸向角质层构成表皮神经（epidermal nerve）。由于表皮神经异常纤细，研究相对缓慢，随着研究的进展，表皮神经的作用越来越受到重视，本文就表皮神经的研究进展综述如下。     

烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配

背景:既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用,但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道。目的:观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系。方法:将30只大鼠右侧T9~L1阶段脊神经根切断,制作失神经支配皮肤模型;然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4cm的深Ⅱ度烫伤创面,设为模型组,左侧对称正常皮肤制作同样的创面,设为对照组,伤后连续观察创面变化,于7,14,21 d采用免疫组织化学法观察Ⅰ和Ⅲ胶原分泌情况,并计算Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化,探讨创面愈合速度及愈合质量。结果与结论:模型组Ⅰ,Ⅲ型胶原分泌和Ⅰ/Ⅲ型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组(P<0.05)。模型组Ⅰ型胶原分泌与伤后7,14,21 d逐渐增加(P<0.05),Ⅲ型胶原于伤后21 d时分泌明显增高(P<0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与伤后21 d时明显降低(P<0.05)。结果证实,创面早期神经支配可以促进创面愈合,创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量。     

颌面部间隙感染的研究进展

口腔颌面部存在许多筋膜间隙,其中充填有脂肪和结缔组织,如不能准确掌握感染病灶、部位及范围,用药不合理,或未能及时有效切开引流,感染可循潜在筋膜间隙扩散引发多间隙感染,甚至引起严重并发症危及患者生命。现就颌面部间隙感染的好发部位、诊断方法、微生物学研究及治疗等方面的研究进展予以综述。     

严重烫伤大鼠淋巴循环中三种重要炎症介质的变化

目的 了解淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用.方法 制备羰花青荧光染料CM-DIL标记的大肠埃希菌菌液(数量级109CFU/L).将60只成年雄性Wistar大鼠按照信封法随机分为烫伤组、假伤组,每组30只.2组大鼠经胃灌注已制备的标记菌液0.5 mL后,烫伤组致30%TBSA深Ⅱ度烫伤,伤后立即行液体复苏;假伤组大鼠皮肤经25℃水浴10 s模拟烫伤并同法复苏.采集2组大鼠伤后2、24、72 h(每时相点10只)的肠系膜淋巴结(MLN)、肝脏、肠系膜淋巴液(MLF)、肝静脉血标本.分别采用荧光示踪法和细菌培养法检测细菌移位情况;用鲎试剂显色基质法定量测定上述4种标本中内毒素含量,并计算MLF和肝静脉血的内毒素携带量.对实验数据行t检验或单因素方差分析.结果 (1)荧光示踪法检测显示活菌呈短棒状,液体标本中可见单体或两三个联体的可移动活菌;死菌呈不规则碎片状.假伤组伤后2 h有少量标记菌,24 h数量达高峰;烫伤组伤后2 h标记菌较多,24、72 h仍处于较高水平.烫伤组各种标本比较,MLN内标记菌最多,伤后24 h达高峰[(5872±1976)×103 CFU/g],明显多于假伤组[(216±110)×103 CFU/g,t=30.129,P=0.000],72 h有所减少但仍多于假伤组(t=4.323,P=0.000);血液内标记菌最少.(2)细菌培养法检测:假伤组120份标本中,29份细菌培养呈阳性占24.2%;烫伤组120份标本中,72份培养阳性占60.0%.2组大鼠除血液标本在各时相点均未检出活菌外,其余3种标本伤后2 h或24 h可培养出活菌.烫伤组MLN和肝脏较其余2种组织检出更多活菌;伤后24 h,该组MLN、肝脏以及MLF标本中细菌数量均明显多于假伤组(t值分别为4.353、4.354、4.965,P值均等于0.000).(3)内毒素含量:烫伤组大鼠伤后各时相点4种标本的内毒素含量均高于假伤组,其中肝脏、MLF内毒素含量伤后2 h即达高峰.此时相点烫伤组4种组织间内毒素含量比较,差异有统计学意义(F=258.47,P=0.000),其中肝脏、MLN、MLF内毒素含量较高,且明显高于假伤组(t值分别为43.378、43.123、22.423,P值均等于0.000);MLF内毒素含量约为血液中含量的9倍.(4)烫伤组伤后各时相点MLF、血液内毒素携带量均高于假伤组.结论 用CM-DIL标记细菌能够较全面反映细菌移位情况,淋巴途径在细菌移位中发挥重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the role of lymphatics in bacterial translocation from intestine of rats with burn. Methods Escherichia coli (E. coli) labeled with chloromethylbenzamidodialkylcarbocyanine (CM-DIL) were prepared. Sixty adult male Wistar rats were randomly divided into scald group and sham injury group according to the envelope method, with 30 rats in each group. Rats in both groups were gavaged with 0. 5 mL fluid containing CM-DIL-labeled E. coli. Rats in scald group were inflicted with 30% TBSA deep partial-thickness scald (verified by pathological section) and resuscitated with fluid. Rats in sham injury group were sham injured by bathing in 25 ℃ water for 10 s(verified by pathological section)and also received with fluid infusion. Mesenteric lymph node (MLN), liver, mesenteric lymph fluid (MLF), and liver vein blood (LVB) were harvested at post injury hour (PIH) 2, 24, and 72. Bacteria translocation was detected with fluorescent tracing technique and bacteria culture. The endotoxin content in above-mentioned four kinds of specimens was quantitatively determined with chromogenic substrate limulus amebocyte lysate. The carrying capacity of endotoxin in MLF and LVB was calculated. Data were processed with t test or one-way analysis of variance. Results (1) Living bacteria were in short-stick form, and they were seen moving in single or in doubles or triples in sample fluid. Dead bacteria were in irregular aggregates. Labeled bacteria in small amount were detected in sham injury group, their number peaked at PIH 24. A large amount of labeled bacteria were detected in scald group at PIH 2, which peaked at PIH 24 and decreased at PIH 72. The largest amount of labeled bacteria were found in MLN in scald group as compared to those in the other samples, and the number peaked at PIH 24 [(5872 ± 1976) × 103 CFU/g], which was obviously higher than that [(216 ± 110) × 103 CFU/g, t =30. 129, P =0.000] in sham injury group. The number of bacteria decreased at PIH 72, but it was still significantly different from that in sham injury group ( t =4. 323, P =0.000). The number of bacteria in LVB was the smallest. (2) 29 (24.2%) samples out of the 120 samples in sham injury group were positive for bacteria. 72 (60.0%) samples out of the 120 samples in scald group were positive for bacteria. No alive bacterium was detected at any time point in LVB sample in both group; the other three samples were detected with alive bacteria since PIH 2. There were more alive bacteria detected in MLN and liver as compared with the other two kinds of samples in scald group. The amount of bacteria in MLN, liver, and MLF in scald group were higher than those in sham injury group(with t value respectively 4. 353, 4. 354, 4. 965, P values all equal to 0. 000). (3) The endotoxin level in each kind of sample at each time point was obviously higher in scald group than that in sham injury group, and it peaked at PIH 2 in liver and MLF. The difference of endotoxin level among 4 kinds of samples in scald group at PIH 2 was statistically significant(F = 258.47, P = 0. 000) , and the endotoxin level was higher in liver, MLN, and MLF. They were obviously higher than those in sham injury group(with t value respectively 43. 378, 43. 123, 22. 423, P values all equal to 0. 000). The endotoxin level in MLF was 9 times of that in LVB. (4) The carrying capacity of endotoxin in LVB and MLF at each time point in scald group was higher than that in sham injury group. Conclusions CM-DIL marked bacteria can reflect the microbial translocation condition. The lymphatic route is an important pathway for bacteria translocation.     

脊索瘤中MMP-13的表达特点及意义

应用免疫组织化学SP法检测基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在脊索瘤中的表达。结果：MMP-13在脊索瘤中阳性表达率为84．4％；星形细胞为主型脊索瘤阳性率为72．7％（16／22），复发脊索瘤MMP-13阳性率为88．0％。认为MMP-13蛋白参与了脊索瘤细胞的浸润，其高表达与脊索瘤的高复发率有关。     

年龄因素对瘢痕组织中神经构筑的影响

目的 探讨年龄对瘢痕组织神经构筑的影响。方法 26份瘢痕组织标本取自来我院行整形修复手术的26例患者，正常皮肤来自供皮区，利用HE染色，单克隆抗体免疫荧光法，免疫荧光显微镜下观察不同年龄瘢痕患者及正常皮肤中的神经丝蛋白（NFP）、蛋白基因产物（PGP9．5）在末梢神经组织中的标记情况。结果 创面愈合后1～20a，≤20岁和〉20岁患者瘢痕组织中的神经纤维密度差异无统计学意义；1～9a患者瘢痕组织中的神经纤维密度明显少于正常皮肤的密度，〉9a患者瘢痕组织中的神经纤维密度基本恢复到正常皮肤水平。结论 20岁前后两个年龄段患者瘢痕组织中神经纤维密度差异无统计学意义，瘢痕的年龄段差异可能是神经系统以外其他因素作用的结果。