腺病毒相关病毒增强型mIL-10质粒的构建及表达

构建腺病毒相关病毒增强型mIL 10质粒 ,并在心肌细胞内进行表达。利用分子克隆技术 ,将腺病毒相关病毒 (AAV )中的末端重复序列 (ITR )插在pORF5 mIL 10质粒启动子的上游 ,构建pORF AAV mIL 10质粒。在阳离子脂质体Lipofectin介导下 ,pORF5 mIL 10和pORF AAV mIL 10分别转染次代培养心肌细胞 ,TRIzol一步法提取总RNA ,RT PCR检测mIL 10的mRNA ;ELISA检测培养细胞上清中mIL 10的表达。结果是用双酶切证实成功构建质粒 ,分别在转染 2 4h、 4 8h、 72h、 96h、 12 0h后 ,用RT PCR在心肌细胞中检测到相应的目的条带 ,ELISA检测各组mIL 10的表达量。证实在阳离子脂质体Lipo fectin介导下 ,pORF AAV mIL 10能在一定时间内稳定的增加mIL 10在心肌细胞内的表达。     

肿瘤相关新基因pp4519在肺癌中的表达差异及初步功能研究

目的探讨肿瘤相关新基因pp4519在肺癌细胞系、人肺癌及癌旁组织中表达差异及其初步生物学功能.方法合成肿瘤相关新基因pp4519特异性多肽,免疫家兔制备兔源性多克隆抗体;从体外细胞集落形成试验,生长曲线,裸鼠体内成瘤试验,半定量RT-PCR,蛋白印迹,免疫细胞化学及免疫组化检测pp4519基因的表达差异,以及转染肺癌细胞系的细胞凋亡检测等方法研究pp4519基因对体内外细胞生长和生物学功能的影响.结果 SPC-A1肺癌细胞系的体外集落形成试验表明,pp4519基因转染组集落形成数明显少于空载体组(P<0.05);转染pp4519基因的肺癌细胞系的裸鼠体内成瘤试验结果表明该基因对SPC-A1细胞系的成瘤有明显抑制作用(P<0.01);瞬时转染细胞的流式细胞凋亡检测结果表明该基因具有促进SPC-A1细胞凋亡的作用;半定量RT-PCR,蛋白印迹检测结果表明肺癌及癌旁组织中pp4519 RNA和蛋白表达无明显差异(P>0.05),但免疫组化结果显示PP4519在人肺癌癌旁组织中的表达略高于肺癌.结论 pp4519是一个具有抑制肺癌细胞生长功能的新基因.     

消脂方调控AMPK/ACC信号通路对DIO小鼠减重降脂作用研究

目的 通过对高脂饮食诱导肥胖(Diet-induced obesity,DIO)模型小鼠的干预,探讨消脂方减重降脂的作用机制.方法 C57BL/6J雄性小鼠高脂饮食造模成功后的DIO模型小鼠,分为肥胖模型组(蒸馏水,n=6)、低剂量实验组(消脂方汤剂,药物浓度0.458 3 g/mL,n=6)、中剂量(等效剂量)实验组...     

148例糖尿病患者糖化血红蛋白及空腹血糖结果分析

目的探讨糖化血红蛋白在糖尿病患者的治疗过程中与空腹血糖的关系。方法对148例糖尿病患者采用酶法检测糖化血红蛋白和己糖激酶法测定空腹血糖水平。结果糖化血红蛋白水平与空腹血糖水平呈正相关。结论糖化血红蛋白可以用于评价治疗方案是否可靠,避免空腹血糖结果的片面性。     

流式微载体技术检测类风湿因子方法的研究

目的 建立基于流式微载体技术(flow cytometric microcarrier assay,FCMA)的血清类风湿因子(RF)的检测方法.方法 分别用FCMA和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测89例类风湿性关节炎(RA)患者、52例非RA的自身免疫性疾病患者和60例健康对照血清标本中IgM-RF和IgA-RF.结果 FCMA所测IgM-RF的组内和组间CV分别为3.1%±1.7%和5.6%±2.2%,显著(P＜0.05)低于ELISA组(6.7%±3.6%和11%±3.9%).IgA-RF亦是如此.以健康体检者为对照,FCMA IgM-RF和IgA-RF敏感度为80.9%和77.5%,特异度均为98.3%.以非RA的自身免疫性疾病患者为对照,FCMA IgM-RF和IgA-RF的敏感度为80.9%和77.5%,特异度为80.7%和82.7%.FCMA结果显著(P＜0.05)高于ELISA结果.结论 结果提示测定血清RF,FCMA比ELISA有更好的灵敏度、特异度和稳定性,建议临床推广和应用.     

细胞角蛋白-20基因在大肠癌患者外周血中表达的初步研究

目的 检测大肠癌患者外周血CK-20mRNA并评价其临床意义。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤细胞株及大肠癌患者外周血CK-20mRNA。结果 大肠癌细胞株CK-20mRNA阳性;前列胀癌、肾癌、乳腺癌等肿瘤细胞株及20例健康志愿者外周血未见CK-20mRNA的表达。51例大肠癌患者外周血中25例CK-20mRNA表达阳性,阳性卑为49.0％。大肠癌患者外周血CK-20mRNA的表达与临床分期关系为:A期14.3％(1/7)、B期25.0％(3/12)、C期55.0％(11/20)、D期83.3％(10/12);其中C、D期与A、B期相比有显著性差异(P<0.01)。结论 CK-20mRNA可以作为对大肠癌血行转移进行早期诊断的生物学标志物,并能监测大肠癌的疗效。     

中山地区人群KCNQ1基因多态性与妊娠期糖尿病相关性研究

目的探讨电压门控性钾通道Q亚家族成员1（KCNQl）基因rs2237892（C／T）,m2237895（A／C）,rs2237896（AVG）位点单核苷酸多态性与中山地区人群妊娠期糖尿病（GDM）的关系。方法本研究共采用2011年-2013年中山市南朗医院和中山市博爱医院共285例孕妇,其中GDM组185例,血糖正常100例设为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）检测KCNQl基因多态性,评估其与GDM的相关性。GDM组和对照组基因型分布运用logistic回归模型分析。GDM组相关表型运用多重回归模型分析。结果（1）SNPrs2237896的三种基因型（AA、AG、GG）在GDM组和对照组分布频率分别是4．8％,42．2％,53．0％和3．0％,28．0％,69．0％,两组的基因型分布频率差异显著（P=0．032,P〈0．05）。Rs2237896等位基因A、G的分布频率（26％。74％）高于对照组（17％,83％）,差异具有显著性（P=0．015）。（2）SNPm223782中,其三种基因型（CC、CT、1Tr）在GDM组和对照组分布频率分别是24．8％,68．1％,8．1％和38％,49％,13％,其基因型分布频率两组具有显著差异（P=0．007,P〈0．05）,但是Rs2237892等位基因C、T的分布频率并不具有差异（P=0．279,P〉0．05）。结论KCNQ1基因SNPrs2237896多态性可能与中国中山市人群中GDM发病具有一定相关性。     

医学研究生社会适应能力教学探讨

文章就当前医学研究生社会适应能力进行阐述,结合某医科大学研究生社会适应能力调查问卷的客观数据,针对如何增强医学研究生社会适应能力提出观点,对医学生教育培养模式起到借鉴、推动作用。     

UEV蛋白,一个保守的类泛素结合酶蛋白家族

泛素是一个高度保守的蛋白。泛素结合酶参与各种真核生物的代谢过程。泛素结合过程中所必需的泛素结合酶在真核生物中是高度保守的。近几年来，人们发现了一组与泛素结合酶具有较高同源性的蛋白，包括ＭＭＳ２，ＣＲＯＣ－１等。但这组蛋白都不具有泛素结合酶与泛素结合的活性半胱氨酸残基，它们被命名为纱结合酶变体蛋白。有实验表明，ＵＥＶ蛋白参数与真核生物扔细胞分化，细胞周期调节，ＤＶＡ修复等过程，而且与肿瘤发生有关。Ｕ     

坚持两个保偿制 促进防保事业健康发展

坚持两个保偿制促进防保事业健康发展冯强，杜冰（湖北省长阳土家族自治县卫生局４４３５００）我县１９８９年根据国务院批转卫生部《关于全面深入贯彻预防为主方针进一步加强预防保健工作若干意见的通知》精神，为切实做好预防保健工作，在全县推行了儿童计划免疫和母婴...