转录调控因子Shh促进胎鼠脊髓神经干细胞体外增殖的效应

目的:观察体外转录调控因子Shh对脊髓神经干细胞的增殖效应,探讨其在脊髓损伤中可能的应用。方法:以一定含量的Shh处理原代和传代的脊髓神经干细胞,分别在接种细胞后的第2,4,6天计数神经球的形成情况;并用胎牛血清作分化诱导剂,观察Shh中干细胞球的分化情况,8d后,免疫组化双标鉴定并计数神经微丝-200(NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的比例,对比碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作统计学分析。结果:Shh(5～50nmol/L)在体外可以促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖,且表现为剂量依赖性,Shh(50nmol/L)的增殖效应几同bFGF(20μg/L);增殖的细胞可分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞,其神经元与星形胶质细胞的比例同bFGF组的分别为64%∶36%和63%∶37%。结论:Shh(5～50nmol/L)在体外可以剂量依赖性的促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖,且增殖的细胞具有多分化潜能,其分化细胞的趋向类似于bFGF组。     

两种万古霉素藻酸盐微缓释球释放曲线的对比研究

目的制备两种不同的万古霉素藻酸盐微球(Vanco-AB),对比其体外缓释性能和抗菌活性,探讨其在骨科抗感染治疗中的可能应用。方法应用滴注法制备万古霉素藻酸盐微球,通过分别改变万古霉素和藻酸盐溶液的浓度,优选万古霉素含量高的微球,然后用不同浓度纤维蛋白凝胶包裹,通过检测各组万古霉素有效的释放时间来筛选适当包裹微球。结果随着万古霉素和藻酸盐溶液浓度的升高,微球中的万古霉素含量增高,16%藻酸盐和50 mg/mL万古霉素等体积混合液制备的微球中万古霉素含量最高,达(27.36±0.90)%。在前述微球的基础上,75 mg/mL纤维蛋白包裹的微球释放万古霉素的浓度可有效杀灭金黄色葡萄球菌19 d。结论优选后的FG-Vanco-AB可达到有效杀菌浓度的释放天数显著延长,增加了临床应用的可能。     

胚胎干细胞定向分化运动神经元的基因调控

本文着重就胚胎干细胞 (ESCs)定向诱导分化为脊髓运动神经元过程中两个重要阶段及相关基因的表达调控进行综述。运动神经元分化的基因调控研究将有利于阐明其发育和分化的模式 ,为其应用于脊髓损伤修复和运动神经元退行性疾病的替代治疗提供理论依据     

组织工程脊髓修复脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤可以导致损伤平面以下神经功能的破坏性丢失,严重地影响身体多个系统.脊髓损伤的效应随着损伤部位不同而不同,这是脊神经有序地按照脊髓排列的缘故.除了损伤平面以下运动功能受损,同时还伴有感觉异常.其造成的功能缺陷包括心血管系统功能、呼吸系统功能、胃肠道消化功能、排汗功能、性功能以及排尿功能,这些缺陷可继发泌尿系感染、褥疮、肌肉痉挛、慢性神经性疼痛和感觉异常等,更严重的可致命.因此,脊髓损伤成为人类急需解决的医学难题之一,至今仍困扰着无数医学工作者。     

维甲酸对神经干细胞的增殖和分化效应

目的 探讨不同浓度维甲酸对神经干细胞的增殖和分化的效应。方法 分离、培养胎龄14d的Wistar孕鼠的神经干细胞，通过与碱性成纤维细胞生长因子（bFGF对比观察维甲酸的促增殖效应；运用神经微丝200（NF-200）和神经胶质酸性纤维蛋白（GFAP）对维甲酸诱导分化的细胞进行组化染色，通过4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染胞核，计数各种分化细胞的比例，并对分化的神经元进行胆碱能表型鉴定。结果 维甲酸的增殖效应明显弱于bFGF，但其具有明显的促神经元生成的分化效应，并表达递质，在分化第24天，500nmol／L的浓度使分化的神经元占分化的总细胞数的90．80％。结论 维甲酸具有显著的促神经干细胞分化成神经元的效应。     

神经干细胞向神经元和胶质细胞分化调控机制的研究进展

自1992年Reynolds体外成功培养出成年哺乳动物的干细胞、提出成年人体内存在神经干细胞以来,有关神经干细胞分化及调控机制的研究已成为国内外学者关注的热点。由于成年神经干细胞的使用不存在伦理道德问题,具有多分化潜能,能够携带外源性治疗基因,且可通过导入原癌基因获得永生细胞系等优点,神经干细胞移植为中枢与外周神经损伤修复及神经退行性疾病的治疗提供了一个新的途径,其应用前景十分广阔。神经干细胞的分化方向主要取决于其在神经管中的最初定位以及从神经管迁移后在大脑中的最终定位,但同时也受细胞外的环境因素影响。神经干细胞…     

自体骨髓富集骨修复技术临床应用专家共识(2023版)

由创伤、骨感染等原因造成的骨缺损临床十分常见且治疗困难, 通常需要骨移植材料进行修复。目前临床常用的骨移植材料主要包括自体骨、同种异体骨、异种骨、人工合成材料等, 而自体骨以外的骨移植材料均存在不同程度的成骨活性不足。骨髓中含有干细胞、细胞因子等利于成骨的有效成分, 基于高效骨髓利用的骨髓富集骨修复技术应运而生, 其核心理念是将自体骨髓中具有促成骨作用的细胞和细胞因子浓聚于支架材料, 快速构建为具有高成骨活性的骨移植材料。但该技术的临床适用范围、应用方法、安全性、有效性等尚缺乏科学指导和应用规范。为此, 由中华医学会骨科学分会牵头, 依据循证医学方法制订了《自体骨髓富集骨修复技术临床应用专家共识(2023版)》, 主要从常用自体骨髓促进骨修复临床技术特点、自体骨髓富集骨修复技术适用范围、安全性和应用注意事项等方面提出相应的推荐意见, 为规范该技术的临床应用提供指导。     

兔间充质干细胞在Vanco-AB-FG三维支架中的增殖和分化

目的 观察兔间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from bone marrow,BMSCs)在带有万古霉素藻酸盐微球的纤维蛋白凝胶(vancomycin alginate beads embedded in fibrin gel,Vanco-AB-FG)中增殖和成骨分化情况.方...     

骨应力监测传感系统的构建及在牵张成骨中的应用

目的 构建一种能够对骨愈合状态进行实时监控的骨外固定传感系统. 方法利用Solidworks2007软件设计扣合式全环外固定装置,并与半环外固定装置进行生物力学稳定性比较.将S型拉压力传感器、数据采集盒、数据分析软件组合成骨应力监测传感系统.进行基于动物实验的胫骨应力检测,通过实时X线判断骨愈合情况,形态学观察不同速度延长组愈合效果的差异,并与实时监测的应力值相对应. 结果力学性能测试证明,全环扣合式外固定装置的抗扭转、抗水平方向压力强度显著高于半环滑槽式外固定装置,还具有轻便、便于安装的特点.整套骨应力监测传感系统已经能够实现骨应力的实时检测与数据分析.X线和组织形态学结果表明,随着延长速度的增加,骨愈合效果略差,但是耗时短,此结果与监测的骨应力呈一致性. 结论成功构建了具有自主知识产权的新型骨应力监测传感系统,并初步探寻了骨愈合过程中的骨应力变化规律,为进一步深入研究骨愈合机制奠定了坚实的基础.     

可预防感染的组织工程骨在修复山羊大段骨缺损中的抗感染及成骨效果研究

 目的 构建可预防感染的组织工程骨并评估其在修复山羊大段骨缺损中的抗感染能力及成骨效果。方法 设计可控性缓释抗生素系统“纤维蛋白凝胶修饰的藻酸盐-万古霉素缓释微球”（FG-Vanco-AB）,以此为基础构建可预防感染的组织工程骨并进行检测,然后移植到山羊右侧股骨临界骨缺损的部位,对侧作为对照将组织工程骨（不含可控性缓释抗生素系统）移植到同样的临界骨缺损区。抗生素发挥抗菌作用的标准浓度为5 mg/ml,即对金黄色葡萄球菌的最低杀菌浓度,术后通过高效液相色谱法检测骨缺损区局部、周围及血液中万古霉素浓度,检测其缓释剂抗感染能力;组织学、CT、ECT检测骨愈合情况,以此来评价预防感染组织工程骨的成骨效果。结果 通过扫描电镜、激光共聚焦以及体内示踪等检测,种子细胞在体内及体外的存活情况与组织工程骨组类似;山羊股骨右侧局部、左侧局部及血液中持续超过杀菌浓度的时间分别为28 d、2 d和7 d。万古霉素在股骨中的浓度自移植部位向两侧逐渐递减。山羊双侧股骨术后第28天及56天ECT检查结果均提示无明显区别,CT及组织学检查证明在术后第14天、28天、112天,山羊双侧股骨缺损的修复是同步的,并且在第112天时均被新生骨组织覆盖。结论 成功构建抗感染的组织工程骨,FG-Vanco-AB在移植的部位可以发挥杀菌作用,并且不会影响组织的重建与修复。