维甲酸和Shh因子联合诱导神经干细胞分化为胆碱能神经元及其体内移植的实验研究

目的 探讨维甲酸和Shh因子联合诱导大鼠神经干细胞(NSCs)分化为胆碱能神经元的可行性. 方法 分离、培养和鉴定大鼠的NSCs,联合应用维甲酸和Shh因子诱导NSCs分化,应用胆碱能细胞特异抗体VAChT作组化鉴定,通过流式细胞仪计数诱导后胆碱能神经元的比例;并将其注射到大鼠脊髓,观察体内存活情况. 结果 维甲酸和Shh因子联合诱导NSCs可以产生较高比例的VAChT阳性细胞,阳性率达77.26%±0.99%,明显优于对照组:移植体内的细胞可以存活并具有一定迁移能力. 结论 应用维甲酸和Shh因子联合诱导NSCs能产生较高比例的胆碱能神经元,可以为修复脊髓损伤提供新的细胞来源.     

神经生长因子促再生周围神经血管生成的实验研究

[目的]证实神经生长因子（NGF）具有促进大鼠再生坐骨神经中的血管生成作用：[方法]用单通道的砷胶管桥接75只Wistar大鼠1cm的坐骨神经缺损，在桥接管内给药，并将它们随机分为三组：生理盐水组、医用几丁糖组、NGF＋医用几丁糖组，每组25只，在5个不同时相点（0，2，7，14，30d），用免疫组化的方法检测大鼠再生坐骨神经新生血管内皮细胞中CD34的表达。[结果]随着时间的增加（30d以内），CD34的表达呈逐渐增长的趋势，其中在0.2d时，坐骨神经中没有CD34表达：7、14、30d时，NGF＋医用几丁糖组的CD34阳性染色显著多于医用几丁糖和生理盐水对照组（P〈0．01），医用几丁糖组和生理盐水组间并无显著差异（P〉0．05）：结论]NGF能促进再生周围神经的血管生成；NGF能促进毛细血管的生成。     

医学实习生骨科临床手术学习的带教体会

从一名医学院学生最终成长为合格的骨科医师,需要漫长的学习和实践过程.在这个过程的最初阶段,即临床实习阶段,骨科临床手术的学习是重点.在实习阶段,老师一方面教会学生做一个医德高尚的人,另一方面是培养学生对手术整体的认识、授予学生局部解剖学知识以及进行基本功的训练.     

加强医患沟通能力培养 提高临床实践教学质量

处于临床实践教学阶段的医学生是医院里的特殊角色,既是学生,也是医生,如何提高医学生医患沟通能力,引导、培养医学生建立和谐的医患关系,成为一项刻不容缓的课题。加强对实习医生的医患沟通教育,全面提高素质能力,可提高医院的医疗服务质量,减少医疗纠纷的发生;使临床医学生逐步适应新型医疗模式的要求,通过临床学习与实践,尽快成为一名合格的临床医生。笔者结合多年从事临床医疗及教学的工作     

骨科临床带教的体会

临床见习和实习是医学理论联系实践的桥梁，在医学教学中起着承前启后的作用。医学生能否将课堂上和书本上学习的理论知识同患者的实际情况结合起来，临床见习和实习是非常重要的一环。骨科在外科系统的教学中占有重要地位，其内容繁多、概念抽象、专业性强、专科检查复杂，令不少学生感到困难。现将临床带教的体会总结如下。     

多向自锁钛板内固定一期前路治疗腰骶段结核的临床研究

目的 探讨采用自主研发的多向自锁钛板内固定行一期前路病灶清除、植骨融合术治疗腰骶段结核的安全性和有效性.方法 2010-2015年我科采用一期前路病灶清除、植骨融合与多向自锁钛板内固定术治疗腰骶段结核共35例.术前常规支持及抗结核治疗,采用CT血管造影技术评估髂血管走行与腰骶段结核病灶的关系及骨质破坏情况.术中采用多向自锁钛板选择骨质结构相对完整的区域进行固定.术后定期随访,评估结核活动、植骨融合、矫形维持、神经功能恢复及并发症等情况.结果 35例患者均获随访,随访时间18 ～36(26.06±6.16)个月.手术时间(148.57±17.68) min,术中失血量(257.14±29.66)mL.术中无大血管、神经及输尿管损伤.术后腰腿痛症状均获明显缓解,无结核复发、下肢深静脉血栓、逆行射精及勃起功能障碍等并发症,术后12个月椎间植骨均达Ⅰ级骨愈合.术前、末次随访红细胞沉降率分别为(32.14±9.87)、(5.34±2.30) mm/h,术前、末次随访C反应蛋白分别为(23.66±9.98)、(1.26±0.55) mg/L,术前、末次随访平均VAS评分分别为(4.80±1.02)、(0.83±0.71)分,术前、末次随访平均ODI评分分别为(27.47±6.79)％、(4.31±1.49)％,术前、术后及末次随访平均腰骶角分别为(23.09±3.21).、(29.21±1.16).和(26.71±1.57)..结论 一期前路结核病灶清除、植骨融合与多向自锁钛板内固定术治疗腰骶段结核安全且有效,多向自锁钛板是适合腰骶段结核前路手术的有效内固定装置.     

异基因大鼠骨髓间充质干细胞成骨效应的初步观察

目的观察异基因大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的成骨效应。方法将BN品系大鼠来源的MSCs（A组）和经成骨诱导的MSCs（B组）分别与其松质骨制备的脱钙骨基质（DBM）构建组织工程骨,然后分别移植到F344品系大鼠肌袋内,以空白DBM作为对照（C组）。术后6、12、18周通过X线、HE染色和血清碱性磷酸酶检测观察移植物的成骨效应。结果术后X线显示：A和B组在12周时才出现云雾状骨块影像,边界模糊,而C组未显像;18周A和B组骨块显影较12周时明显清晰,C组有云雾状骨块影像。HE染色显示：所有动物6周时均有炎症细胞浸润,未见新生骨小梁;12周时炎症细胞减少,A和B组的新生骨小梁较C组明显增多;18周时炎症细胞消失,A和B组骨小梁较C组明显趋于成熟。血清碱性磷酸酶检测显示：各组6周最低;12周数值最高,其中B组高于A组,C组明显偏低;18周较12周降低,B组和A组仍远高于C组。结论由未诱导的和经成骨诱导的异基因MSCs分别构建的组织工程骨均具有异位成骨能力。提示异基因MSCs可作为种子细胞构建异基因组织工程骨。     

转录调控因子Shh促进胎鼠脊髓神经干细胞体外增殖的效应

目的：观察体外转录调控因子Shh对脊髓神经干细胞的增殖效应，探讨其在脊髓损伤中可能的应用。方法：以一定含量的Shh处理原代和传代的脊髓神经干细胞，分别在接种细胞后的第2，4，6天计数神经球的形成情况；并用胎牛血清作分化诱导剂，观察Shh中干细胞球的分化情况，8d后，免疫组化双标鉴定并计数神经微丝-200(NF-200)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞的比例，对比碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作统计学分析。结果：Shh(5～50nmol／L)在体外可以促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖，且表现为剂量依赖性，Shh(50nmol／L)的增殖效应几同bFGF(20μg／L)；增殖的细胞可分化神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞，其神经元与星形胶质细胞的比例同bFGF组的分别为64％：36％和63％：37％。结论：Shh(5～50nmol／L)在体外可以剂量依赖性的促进胎鼠脊髓原代和传代的神经干细胞增殖，且增殖的细胞具有多分化潜能，其分化细胞的趋向类似于bFGF组。     

羊脱钙骨基质作为骨组织工程支架材料的性能评估

目的 制备山羊脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM),研究其物理和生物力学特性,为其作为理想的组织工程骨支架材料提供理论依据.方法 制备山羊完全脱钙骨基质,观察其色泽、质地、孔隙度等物理性状,并用扫描电镜观察其孔隙度,测量其孔径;通过测定吸水率评估其亲水性;用生物力学测定仪测定其不同压缩比率下的瞬时形变恢复率、最大形变恢复率及最大极限压缩强度.结果 标准化制备DBM呈乳白色,密度均匀,表面布有较多的微孔,扫描电镜观察其孔径范围为350～450(409.2±39.7)μm,吸水后膨胀,最大值吸水率达(419.0±44.4)%;生物力学测定显示,DBM位移是压缩强度的函数,DBM压缩20%和30%时其最大极限强度分别为(1.43±0.35)N和(1.62±0.51)N,瞬时形变恢复率分别为100%和(91.0±8.2)%.结论 完全脱钙骨基质孔径大,亲水性强,形变恢复好,利于细胞的黏附生长,是理想的组织工程支架材料.     

动态固定与椎间融合治疗腰椎退行性滑脱的比较

[目的]比较Dynesys动态固定与经椎间孔椎间融合术(transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF)治疗腰椎退行性滑脱症的临床疗效.[方法] 2012年4月-2017年4月,共113例L4椎退行性Ⅰ度滑脱症患者纳入本研究.依据术前医患沟通结果,52例采用Dynesys动态固定...