RNA干扰沉默MIF基因对HeLa细胞生长、迁移和黏附性的影响

目的:探讨巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)对宫颈癌HeLa细胞生长、迁移和黏附能力的影响.方法:通过反转录病毒载体介导RNA干扰,获得稳定抑制MIF表达的HeLa细胞株.Western印迹法检测MIF蛋白沉默效果以及FAK、ICAM-1、Bax和Bcl-2蛋白表达情况.观察HeLa细胞生长状态的变化,采用迁移实验、黏附实验和软琼脂糖克隆形成实验检测MIF对HeLa细胞迁移和黏附能力的影响.通过裸鼠成瘤实验观察沉默MIF基因后HeLa细胞的成瘤效果.肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)和放线菌酮(cycloheximide,CHX)诱导细胞凋亡后,FCM法检测沉默MIF基因对HeLa细胞凋亡的影响.结果:构建获得稳定抑制MIF蛋白表达的HeLa-pSUPER-MIF细胞株.MIF基因沉默后细胞生长减慢,迁移能力和黏附功能减弱;HeLa细胞中FAK、ICAM-1的表达量减少,无法在裸鼠中形成肿瘤;同时能减少TNF-α 和CHX诱导的细胞凋亡,并且使Bax表达量下降.结论:MIF通过影响HeLa细胞中FAK、ICAM-1的表达,促进肿瘤细胞生长,增加肿瘤细胞的迁移和黏附能力,因此MIF可能是肿瘤形成过程中的重要因子.     

卡维地洛对急性心肌梗死大鼠心功能的保护作用

目的:探讨卡维地洛对急性心肌梗死(AMI)后Sprague-Dawley大鼠心功能的保护作用.方法:用手术结扎左冠脉前降支法,制备50只大鼠AMI模型,随机分为生理盐水组[0.9%NaCl,2 mL/(kg·d)]、福辛普利治疗对照组[3.0mg/(kg·d)]、卡维地洛3治疗组[1.5、3.0、6.0mg/(kg·d)],连续给药4周;另设正常组和假结扎组.进行体重、心率、超声心动图和血浆生化等指标检测.结果:与生理盐水组比较,中、高剂量治疗组大鼠的心率明显降低(P<0.01);超声心动图示EF和FS、IVSd、IVSs均明显增加(P<0.01),LVIDd和LVIDs显著降低(P<0.05);离体心功能示CF、LVSP、LVDP和±dp/dtmax 均增加,LVEDP则明显减小(P<0.01);血清中MDA明显降低,而NO、SOD、GSH-PX均增高(P<0.01).结论:卡维地洛能很好地改善AMI后大鼠的心功能,抑制心室的重枸作用.     

芦沙坦与依那普利联用对慢性心衰患者的影响

目的比较芦沙坦(ｌｏｓａｒｔａｎ)和依那普利(ｅｎａｌａｐｒｉｌ)联用与依那普利单用,对慢性心衰(ＣＨＦ)患者在心脏功能及安全性等方面的影响。方法采用随机两阶段交叉试验研究设计。符合入选条件的ＣＨＦ患者随机分配至两个组,接受治疗方案的顺序不同的两阶段治疗,两治疗方案分别为芦沙坦和依那普利合用与依那普利加安慰剂治疗。每阶段各治疗８ｗｋ,其间设２ｗｋ的洗脱期。结果联合治疗与依那普利单用相比,收缩压和舒张压的降低、ＬＶＥＦ的改善等均显著(Ｐ＜０．０５)。两治疗方案间对血钾、肌酐的影响无统计学差异（Ｐ＜０．０５）。…     

血管紧张素转换酶2基因转染对人血管内皮细胞中氧化应激水平的影响

背景血管紧张素转换酶2(ACE2)是迄今为止发现的人类 ACE 的第一个同源基因,是血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的主要降解酶,但其在氧化应激中的调控作用尚不清楚。目的探讨重组 ACE2基因转染对体外培养人血管内皮细胞中由 AngⅡ诱导的 NAPDH 氧化酶 p22~(phox)表达和丙二醛(MDA)水平的影响。方法克隆和构建含人 ACE2基因全长的重组质粒(pACE2),并将之转染人人血管内皮细胞中。分别采用实时定量 PCR 和 Western印迹技术检测转染细胞中的 p22~(phox)的 mRNA 与蛋白表达情况。采用硫代巴比妥酸比色法测定细胞中 MDA 含量。结果 AngⅡ(100 nmol/L)和 AngⅣ(100 nmol/L)刺激后均可诱导人内皮细胞中 p22~(phox)的 mRNA 及蛋白表达大大增加,伴有细胞中 MDA 水平升高(n=6,P 均<0.01)。pACE2基因转染可抑制细胞中由 AngⅡ和 AngⅣ诱导的 p22~(phox)表达,同时伴 MDA 水平下调(n=5～6,P 均<0.01)。结论 ACE2基因过表达可明显抑制人内皮细胞中 p22~(phox)的表达,而且降低 MDA 水...     

糖尿病心肌病变的研究进展

糖尿病心肌病变是糖尿病心脏并发症的重要组成部分,主要表现为心室舒张功能受损和心功能不全。研究提示,糖尿病时,心肌细胞能量代谢紊乱,功能改变,凋亡增加,促使心肌纤维化的一些细胞因子和炎症因子异常表达。这些发现揭示,糖尿病从多个方面损害心肌细胞,引起心室重构,这为进一步阐明糖尿病心肌病变发病机制提供了有力证据。     

全反式维甲酸对高血压大鼠心脏氧化应激水平的影响

目的:探讨全反式维甲酸(atRA)对高血压心脏还原型辅酶I氧化酶P22亚单位(p22phox)表达以及氧化应激水平的影响。方法:采用12周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同源对照WKY大鼠,经腹腔注射at-RA,为期1月。分别采用免疫印迹、硫代巴比妥酸比色以及透射电镜技术测定atRA治疗后SHR心脏p22phox的表达、丙二醛(MDA)含量以及心肌超微结构情况。结果:与WKY对照组相比,SHR心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA含量明显升高(P均<0.01)。而atRA治疗后SHR(低、高剂量atRA组)大鼠心脏组织中p22phox蛋白表达与MDA水平出现下调(P均<0.05),同时伴有心肌损伤减轻。结论:长期atRA治疗可降低SHR大鼠心脏组织中p22phox表达与MDA水平,提示atRA在高血压病中具有一定的抗氧化效应。     

HERG基因转染HEK293细胞及其编码通道电流的记录

目的建立HERG基因在HEK293细胞稳定表达的方法。方法利用Lipofectamine2000将pCDNA3.0-HERG转染进入HEK293细胞,通过G418筛选阳性克隆细胞系,采用免疫荧光细胞化学方法检测该蛋白的表达,用全细胞膜片钳技术测定HERG基因介导的快速激活延迟整流钾电流(Ikr)。结果免疫荧光细胞化学检测证实转染HEK293细胞中HERG通道蛋白的表达,膜片钳全细胞实验记录到Ikr。结论该方法有效地将HERG基因转染进入HEK293细胞,并稳定表达HERG通道蛋白及介导Ikr。     

自体心肌细胞移植、hTERT与心肌细胞永生化

解决自体心肌细胞移植细胞来源问题的策略之一是实现心肌细胞永生化。本文对永生化的心肌细胞 :AT 1细胞 ,HL 1细胞 ,心脏干细胞以及hTERT与心肌细胞永生化的关系作一综述。     

氯沙坦对高血压患者心脏和血管内皮功能影响的相关性研究

目的　评价应用氯沙坦 12周治疗原发性高血压患者心脏结构和血管内皮功能改变的相互关系。方法　入选 46例高血压患者 ,其中 ,男 2 0例 ,女 2 6例 ,平均年龄52 2 9± 10 2 7岁。氯沙坦治疗 4～ 6周前后根据所达目标血压 (舒张压 <90mmHg ,调整降压药 ,未达标者加寿比山 2 5mg ,观察氯沙坦治疗前后血浆内皮素的变化及应用二维和多普勒超声检测心脏结构和肱动脉血管内皮功能。结果　收缩压、舒张压、血浆内皮素、左心室重量指数在治疗 12周后明显降低 (P <0 0 1) ,反应性充血引起肱动脉内径的增加在治疗 12周后显著增加 (P 0 0 5)。左心室重量指数的变化与反应性充血后肱动脉内径的变化无相关性 (β =-0 14 82 ,P >0 0 5) ,与收缩压变化 (β =0 443 ,P <0 0 0 1)、内皮素变化 (β =0 3 8,P <0 0 1)有显著相关性。 结论　氯沙坦对心血管系统的影响不仅与血压降低有关 ,同时与逆转左室肥厚、改善血管内皮功能有关。