微波照射后小鼠睾丸损伤及凋亡的研究

目的 研究微波辐照对小鼠睾丸的损伤效应.方法 采用平均功率密度为65mW/cm2和90mW/cm2 微波辐照小鼠15min,采用HE染色和透射电镜方法观察小鼠睾丸组织的改变,用免疫组化方法观察计数睾丸内Caspase-3阳性细胞的表达情况.结果 微波急性辐照后12h,小鼠睾丸组织在光镜和电镜水平均出现损伤性改变,但65mW/cm2及90mW/cm2两个剂量组之间在形态学改变方面差异无统计学意义;辐照后0.5h Caspase-3蛋白阳性细胞数开始出现升高,24h达到高峰,其中90mW/cm2组升高幅度高于65mW/cm2组.结论 微波对小鼠睾丸组织存在明显损伤效应,并且能诱导凋亡相关因子Caspase-3表达增强,诱导效应存在着时效和量效依赖关系.     

微波诱导小胶质细胞的促炎症反应

Objective To explore the relationship between microglia] proinflammatory and electro-magnetic radiation and unveil the role of microglia in microwave radiation induced central nervous system in-jury. Methods N9 microglia cells cultured in vitro were exposed to microwave at 90 mW/cm2. Cell flow cy-tometry was used to observe the expression of CD1 lb at different time points after exposure; ELISA was used to detect the concentration of TNF-α in N9 cell culture supernatant; RT-PCR analysis confirmed iNOS mRNA ex-pression in N9 microglia cells; and Nitrate Reductase Method was used to test NO amount in culture super-natant. Results The CD11b positive microglial cells increased significantly at 3 h after microwave exposure (P<0.05), continued to increase until 24 h and peaked at 6 h after exposure. The amount of TNF-α rose dra-matically from 1 h to 24 h after exposure (P<0.01) and peaked at 3 h [(762.1±61.5) pg/ml] after exposure (P< 0.01). The level of NO started to increase at 1 h [(4.48±0.59) μmol/L] and lasted for 24 h after exposure. The expression of iNOS mRNA increased significantly at 1 h(P<0.05), and tripled the original expression at 6 h af-ter exposure, hereafter, it decreased slightly, but all were higher than the control group within 24 h after exposure. Conclusion Microwave radiation could induce the activation of microglia cells. The activated microglia cells could induce microglial proinflammatory by producing large amounts of TNF-α, NO, etc.     

驱动蛋白家族成员5A介导的溶酶体功能在镉神经毒性中的作用

目的 探讨驱动蛋白家族成员5A(kinesin family member 5A,KIF5A)介导的溶酶体功能损伤在镉神经毒性中的作用.方法 以原代培养的SPF级C57BL/6J小鼠皮层神经元为模型,分为对照组和镉暴露组.检测氯化镉暴露24h后皮层神经元的半数抑制浓度(IC50).进一步用1、2、3μmol/L氯化镉处...     

热休克蛋白对中枢神经的保护作用

热休克蛋白(HSP)是细胞在应激条件下产生的一类蛋白质,它与细胞的许多病理及生理过程密切相关,近年来研究表明HSP在中枢神经系统中并不是传统上认为的参与神经损伤,相反具有神经保护作用。热休克蛋白家族中几种主要的HSP都具有中枢神经保护作用,而每种HSP的保护作用都具有各自的特异性。由于HSP的中枢神经保护作用,其临床应用前景也成为人们关注的焦点。     

SOMAN诱发惊厥后c-fos在大鼠杏仁核簇─氧化氮神经元中的表达

运用FOS免疫组化结合NADPH－d组化双重标记技术，研究了soman诱发惊厥大鼠杏仁核内c－fos高表达神经元与NADPH－d阳性神经元之间的关系。结果显示：在soman诱发惊厥后的1．5h至48h，杏仁核簇内c－fos呈现持续过度表达、FOS免疫阳性神经元的分布具有显著的亚核定位特征。NADPH－d活性在惊厥后明显增强。有10％的FOS阳性神经元同时也呈现NADPH－d阳性。而几乎所有的NADPH－d阳性神经元均呈FOS染色阳性。鉴于FOS表达的诱导和NADPH－d的激活具有共同的上游事件，即NMDA介导的钙内流，可以认为FOS引发的目的基因表达及NO的神经毒作用可能存在于杏仁核的神经元损伤机制中。     

硫化氢中毒的预防实验研究

采用高铁血红蛋白形成剂──对氨基苯丙酮为主药，辅以地塞米松、山莨菪硷等药物预防硫化氢吸入中毒。结果表明，犬口服预防药复方能够预防绝对致死量硫化氢吸入中毒，预防药起效时间为口服后２０～３０ｍｉｎ，维持时间为４．５～５．０ｈ。     

微波辐照对大鼠海马脑区NMDA受体亚基基因表达的影响

目的从亚基基因表达方面探讨NMDA受体在微波辐照所致的学习记忆功能障碍中的作用。方法采用平均功率密度为65mW/cm2的微波全身一次辐照大鼠20min(SAR12.0W/kg),在辐照后0h、3h、12h、24h和3d时相点,大鼠腹腔麻醉断头,分离海马,用RT-PCR技术分别检测NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B、NR2C、NR2D在基因表达水平上的变化。结果微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2C、NR2D基因表达异常。表现为功能亚基NR1mRNA表达在辐照后3h、24h、3d时相分别比对照组下降21.1%(P<0.05)、14.2%(P<0.05)、30.3%(P<0.01);辐照后0h、3h、12h,NR2AmRNA表达较对照组分别降低37.0%(P<0.01)、35.9%(P<0.05)、35.3%(P<0.05);NR2BmRNA表达与对照组比无统计学差异;辐照后0h和24h,NR2CmRNA表达较对照组分别降低24.3%(P<0.05)和27.1%(P<0.05);辐照后0h、12h、24h、3d,NR2DmRNA表达较对照组分别升高67.9%(P<0.05)、45.7%(P<0.05)、49.7%(P<0.01)、75.4%(P<0.01)。结论微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体结构组成发生改变,NMDA受体自身的复杂调节功能下降,从而影响受体介导的LTP的产生。     

海马脑片LTP中胞内钙变化及硫氮卓酮的影响

本文利用脑片胞内荧光钙指示剂 F ura-3标记和场电位测定技术 ,观察了海马 CA1 区 NMDA受体依赖型长时程增强(L TP)中钙离子变化及 L型钙通道阻断剂硫氮卓酮的影响。结果发现 ,条件刺激在诱出 L TP(NMDA受体依赖型 )产生的同时 ,胞内钙荧光强度显著升高。激光共聚焦显微镜下 ,可见 CA1 区锥体细胞轮廓明显。而海马其它各区胞内钙荧光强度无显著变化。在 LTP维持期 ,胞内钙荧光强度出现显著下降。硫氮卓酮 (3 0μmol/ L)显著抑制 CA1 区 L TP诱出和胞内钙荧光强度升高。这些结果表明 ,在海马 CA1 区 NMDA受体依赖型 LTP中 ,L 型钙通道可能发挥重要作用     

硫化氢吸入中毒肺毒理学及救治方案研究

应用支气管肺泡灌洗术、超速离心、光镜和电镜技术对大鼠硫化氢吸入中毒肺毒理学进行了研究。以支气管肺泡灌洗液(BALF)中的酶活性改变(LDH、AKP、ACP、ACE)作为细胞损伤的指标;BALF中白细胞数的变化作为炎症反应的指标;蛋白浓度和伊文思蓝浓度的改变作为通透性变化的指标。此外,还对硫化氢所致的脂质过氧化及天然抗氧化系统的作用,能量物质的受损以及BALF中磷脂含量的变化进行了研究,结合光镜和电镜观察,所得结果表明:(1)硫化氢对肺有强烈的细胞毒作用,因而导致肺各型细胞和肺组织严重损伤,并出现明显的肺水肿;(2)硫化氢所致的肺水肿是多种因素综合作用造成的;(3)生化改变较之病理变化出现早,恢复快。 对硫化氢吸入中毒的防治药物进行了筛选,证明高铁血红蛋白形成剂对小鼠、家兔、犬均有显著效果,但不能预防或减轻肺损伤;伍用激素、自由基清除剂、血管活性物质对减轻和促进肺损伤的恢复有良好作用。 根据实验研究结果,提出了硫化氢吸入中毒的救治方案。     

糖皮质激素对海马功能损伤机制的研究进展

糖皮质激素（glucocorticoid，GC）是由肾上腺皮质产生的一类具有神经活性的甾体激素，在脑内具有广泛的作用，能调节下丘脑-垂体-肾上腺轴（hypothalamic—pituitary—adrenal axis，HPA轴）的平衡，参与学习记忆的过程，在应激中过高的糖皮质激素会对中枢神经系统造成危害。在中枢神经系统中，海马是与学习记忆功能密切相关的脑区，因富含糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR），极易受高浓度糖皮质激素的攻击而损伤。