自然流产胚胎绒毛细胞染色体着丝粒点（Cd）变异研究

采用Cd带技术对20例自然流产胚胎绒毛细胞以及部分自然流产胚胎的双亲外周血细胞染色体着丝粒点变异进行了分析。结果表明：1．自然流产胚胎细胞染色体着丝粒点消失频平显著高于正常人胚胎绒毛组；2．着丝粒点迟滞复制和小着丝粒点的出现频率在两组间无显著性差异；3．在自然流产胚胎组及其双亲组中．着丝粒点消失主要集中发生在C组染色体上。本文对自然流产胚胎细胞非整倍性畸变的机制作了初步讨论。     

Klinefelter综合征X染色体着丝粒区α-卫星DNA变异

目的从DNA分子水平建立研究X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异的方法,发现Klinefelt综合征患者的X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA串联重复序列结构变化与染色体不分离的关系。方法采用（representative sampling of multiple repetitive units,rep）PCR方法,通过设计适当的引物,对α-卫星DNA多个单拷贝串联重复序列同时进行扩增,检测重复序列中结构变化的种类、频率及重组位点。结果首次发现由缺失产生的562bp和220bp变异片段和重组位点,异常组的570、562、220bp构成显著高于正常组（P〈0．05）。Logistic回归分析显示：570、562bp和220bp3个短片段同时出现和任两个短片段同时出现均是疾病相关的危险因素。结论Klinefelt综合征的X染色体着丝粒区α-卫星DNA过多的重组可能是造成X染色体不分离的重要原因之一。     

教育部"生殖与发育国际合作联合实验室"——基础研究团队(生殖生物学研究室)介绍

1团队介绍 生殖生物学研究室依托重庆医科大学公共卫生学院,予2004年建立,2016年成为教育部"生殖与发育国际合作联合实验室"核心组成部分,2019年进入重庆市教委"高水平科研创新平台培育计划".     

113. 小鼠子宫内膜LIF基因表达与孕激素的关系

白血病抑制因子（Leukemia Inhibitory Factor, LIF）是一种多生物学功能的细胞因子,因其能诱导小鼠M1型白血病细胞分化为巨噬细胞和抑制白血病细胞增殖而命名。近年来,关于LIF在胚胎着床、妊娠维持和胚胎发育中发挥的作用越来越引起国内外学者的重视。小鼠的LIF基因位于染色体的11A1A2区,小鼠胚泡的成功着床LIF基因的表达必不可少,并在受孕第4天（着床期）的小鼠子宫腺上皮细胞中大量转录,然而LIF基因表达的调控机制尚不清楚。有学者认为LIF基因表达受母体调控,子宫内膜LIF基因表达可能受到卵巢激素的调节。为此我们对小鼠子宫内膜LIF基因表达与血清中孕酮水平的关系进行了研究。本实验用本校动物实验中心的NIH小鼠130只,取孕期为4～5 d的小鼠子宫内膜及心脏血分别用于检测LIF基因表达和血清中孕酮的水平。其结果显示,在妊娠第4～5 d的130只小鼠中,LIF基因表达12只为阴性（阴性组）,118只为阳性（阳性组）,详见附图。阴性组和阳性组血清中孕酮含量的变化水平分别为：0～3.33 (ng/ml)和1.43～6．39 (ng/ml),阴性组和阳性组孕酮的平均值分别为1.43和2.98,经统计学分析(t检验）,两组间差异极显著(P＜0．01),即阳性组孕酮水平显著高于阴性组,这说明了孕酮在小鼠LIF基因表达起着重要的调控作用。根据阳性组孕酮的平均水平,小鼠血清中孕酮水平达到1.43 ng/ml左右很可能是启动LIF基因表达的一个阈值。综上所述,LIF基因的表达很可能受控于生物体内一个复杂的、多因素的相互制约和协调的调控体系。我们推测孕激素对LIF基因的表达是LIF基因表达调控系统中的一个重要因素。在保证孕激素作用能正常发挥、LIF基因表达的调控相关的调节基因正常和有关细胞因子得到满足的情况下,孕激素水平的高低可起到调节LIF基因表达的作用。     

高胰岛素增加早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管紧张素Ⅱ的表达

目的探讨高水平胰岛素对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管标志分子血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响。方法皮下注射胰岛素构建高水平胰岛素动物模型。将其与正常雄鼠交配后收集妊娠第6、7和8天(D6、D7和D8)的子宫组织及血清,并监测血糖。另将其与输精管结扎的雄鼠交配构建人工诱导蜕膜化模型,于假孕D8收集子宫组织。ELISA检测血清中胰岛素及雌、孕激素的变化,real-time PCR检测子宫内膜Ang-ⅡmRNA的表达,Western blot对子宫内膜Ang-Ⅱ蛋白表达进行检测。结果高胰岛素模型中血清胰岛素水平于妊娠D6、D7和D8均明显升高(P0.001)、雌激素水平于妊娠D8出现显著下降(P0.05),孕激素水平于妊娠D6、D8出现明显下降(P0.01)。与对照组比较,高胰岛素模型中子宫内膜组织中Ang-Ⅱ的mRNA及蛋白的表达显著增加(P0.05)。结论高胰岛素增加孕鼠蜕膜化进程中子宫内膜组织Ang-Ⅱ的表达,从而影响子宫内膜蜕膜化进程中的血管生成。     

CD146在胚泡植入和肿瘤侵袭转移中的作用研究进展

胚泡植入属于生殖生物学研究领域,而肿瘤浸润转移则是肿瘤学的研究范畴,彼此交叉和渗透无论对肿瘤还是胚泡植入机制的探讨都是非常新颖和富有挑战性的。CD146与肿瘤侵袭转移密切相关,同时也参与了胚泡植入。     

正常女性子宫内膜LIF基因表达研究

本文采用RT－PCR技术对32例正常女性分泌期子宫内膜LIF基因表达进地了研究,结果在32例女性这一时期子宫内膜组织中均检测到有强烈的LIF基因表达。这提示在人类非妊娠分泌期子宫内膜组织中存在LIF基因表达LIF在胚泡着床中可能起着十分重要的作用。     

DOWN′S综合征遗传规律探讨

目的 探讨Down′s综合征的遗传规律.方法 Down′s综合征患儿及其双亲21号染色体上D21S11和D21S1414 2个短串联重复序列用聚合酶链反应进行扩增,用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(8%)、硝酸银染色技术对扩增后的产物进行分离.结果 Down′s综合征患儿电泳条带包含了母亲的全部电泳条带,而与父亲的电泳条带只有部分相同.结论 Down′s综合征发病与父母的核型无关,它是减数分裂时不分离的结果,多余的一条21号染色体一般来自母亲.     

小鼠胚胎白血病抑制因子基因表达研究

目的 探索白血病抑制因子（ＬＩＦ）基因在小鼠胚泡着床后有无表达。方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ技术对孕龄５ｄ、７ｄ、１０ｄ、１２ｄ和１５ｄ的小鼠胚胎（共５０个，每组１０个）ＬＩＦ基因表达进行检测。结果 在孕龄５ｄ的二个胚胎和孕龄７ｄ的一个胚胎中检测到ＬＩＦ基因弱表达。而在孕龄１０ｄ以上的胚胎中均未发现有ＬＩＦ基因表达。结论 推测ＬＩＦ基因的表达在小鼠胚胎组织中受到限制。     

Mayven不同截短体原核表达载体的构建、表达和纯化

为了探索Mayven蛋白的功能,进一步研究多发性硬化症的发病机制,我们通过PCR扩增得到Mayven 4个不同长度的基因片段,包括片段P1(1-902 bp)、片段P2(1-523 bp)、片段P3(507-182 bp)和片段P4(887-1782 bp),将这些片段克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2, 转化大肠杆菌BL21,并用IPTG诱导表达, 对表达产物进行SDS-PAGE及western blot方法分析,采用GST蛋白纯化系统对融合蛋白进行纯化.实验结果显示我们成功构建了4个包含不同截短体的重组融合表达质粒GST-Mayven(P1、P2、P3、P4),诱导后表达得到4个截短体的Mayven融合蛋白,其表达形式均为可溶性表达,其相对分子质量与预期相符,纯化后得到各自的目的蛋白,为后续的Mayven蛋白的功能研究奠定了基础.