依达拉奉对脂多糖诱导的PD大鼠模型神经保护作用的实验研究

目的 研究依达拉奉对脂多糖(LPS)诱导的帕金森病(PD)大鼠模型的保护作用及机制.方法 大鼠黑质内立体定向注射14μg LPS建立PD大鼠模型.选取造模成功PD大鼠24只,随机分成大、小剂量组和未治疗组.3组大鼠分别接受不同剂量的依达拉奉注射液(5.0mg/kg,1.0mg/kg)或生理盐水;另外选取正常大鼠5只,作为正常对照组.注射4w后观察各组大鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的数量以及超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)表达变化.结果 与未治疗组相比,依达拉奉大、小剂量组TH阳性细胞数显著增多,SOD表达也明显增多(P＜0.05),MDA表达明显减少(P＜0.05).结论 依达拉奉可能通过减少LPS诱导的自由基产生而对PD大鼠发挥神经保护作用.     

食管癌及癌前病变中p53、CD44v6蛋白的表达及其意义

目的 定位分析p53、CD44v6蛋白在食管正常黏膜、单纯增生、不典型增生、原位癌及浸润癌中的表达及与食管癌病理特征的关系。方法 采用免疫组化方法检测p53蛋白、CD44v6蛋白在45例原发性食管鳞癌大体标本中的不同病变区域的表达。结果 p63蛋白在食管癌自然病史中呈现渐进性高表达，而CD44v6蛋白则在其中呈现渐进性低表达。p53蛋白表达在单纯增生和不典型增生中有显著性差异(P＜0．01)，CD44v6蛋白则在原位癌与浸润癌中存在显著性差异（P＜0．01)。p53蛋白在食管癌自然病史中的渐进性高表达与CD44v6蛋白在其中的渐进性低表达有相关性(P＜0．01)。结论p53蛋白表达和CD44v6蛋白表达的改变与食管癌自然病史密切相关，可以作为判断食管癌生物学行为的指标。     

食管癌中肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达

目的探讨肺耐药蛋白(LRP)和多药耐药相关蛋白(MRP)在食管癌组织的中表达。方法运用免疫组织化学方法检测LRP蛋白和MRP蛋白在81例食管癌组织中的表达。结果食管癌组织LRP蛋白的表达(54.3%)明显高于正常组织(35.9%,P<0.05),LRP在食管癌组织中的表达与癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移与否无关(P>0.05)。MRP蛋白在癌组织中的表达(54.3%)明显高于正常组织(34.6%,P<0.05);MRP蛋白在深层浸润组的表达(60.7%)高于浅层浸润组(35.0%,P<0.05),在有淋巴结转移组的表达(69.7%)高于无淋巴结转移组(43.8%,P<0.05),与癌组织的分化程度无关(P>0.05)。MRP与LRP 2者之间无显著相关性(P>0.05)。结论食管癌组织中LRP的高表达可能与食管癌的耐药性有关。MRP蛋白表达增高可能反映肿瘤的浸润深度和提示肿瘤的淋巴结转移。LRP蛋白与MRP蛋白在食管癌发生发展中相互协同的可能性较小。     

食管鳞癌及癌旁粘膜中核转录因子κB p65及IκBα基因和蛋白表达及意义

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)p65基因及其抑制基因IκBα的表达与食管鳞癌发生的关系。方法:用RT-PCR及免疫组化SP法检测了61例食管鳞癌及其正常粘膜上皮、癌旁粘膜上皮中NF-κBp65基因、IκBα基因mRNA及蛋白的表达。结果:食管鳞癌中p65mRNA、IκBαmRNA的表达量明显高于正常上皮(P<0.01),p65蛋白、IκBα蛋白胞浆表达或胞核表达率均明显高于正常上皮(P<0.01)。癌旁粘膜中,NF-κBp65蛋白、IκBα蛋白在癌旁正常上皮中的胞浆或胞核阳性率均明显低于不典型增生上皮、原位癌和浸润癌(P均<0.05)。结论:NF-κBp65、IκBαmRNA表达和蛋白表达均与食管鳞癌的发生有关。     

糖皮质激素受体激动剂地塞米松对大鼠血清促炎因子IL-6、TNF-α表达及神经病理性疼痛的影响

目的:探索坐骨神经分支选择性损伤诱导的早期神经病理性疼痛(SNI)模型中给予糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)激动剂对痛行为及促炎因子IL-6、TNF-α分泌的影响。方法:成年雄性SD大鼠随机均分为四组:Sham+Vehicle(生理盐水组),SNI+Vehicle组,SNI+DEX(GR激动剂地塞米松)组,SNI+RU(GR抑制剂米非司酮)组。Von Frey纤维丝检测各组大鼠缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)的变化;Western Blot和免疫荧光染色检测各组脊髓中GR的表达水平;Elisa检测血清IL-6和TNF-α表达变化。结果:与SNI+Vehicle组比较,SNI+DEX组大鼠PWT阈值和脊髓GR的表达增高(P<0.05),血清IL-6和TNF-α浓度降低(P<0.05);SNI+RU组大鼠PWT阈值和脊髓GR表达降低(P<0.05),血清IL-6和TNF-α浓度升高(P<0.05)。结论:GR在脊髓水平能够通过下调促炎因子IL-6和TNF-α的表达缓解SNI诱导的早期神经病理性疼痛。     

人精子顶体膜相关蛋白32真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的表达

目的:研究人精子顶体膜相关蛋白32(hSAMP32)mRNA在体外细胞NIH3T3中的表达。方法:利用RTPCR及亚克隆技术构建pcDNA3.1( )hSAMP32质粒,实验组以脂质体介导基因转染法将pcDNA3.1( )hSAMP32真核表达载体导入NIH3T3细胞中,同时设置空白和阴性对照组(转染空载体pcDNA3.1( ))。原位杂交检测hSAMP32mRNA在3组细胞中的表达。结果:①RTPCR扩增产物与预期的目的基因hSAMP32长度一致。亚克隆酶切鉴定可见目的片段。②实验组阳性细胞胞浆中可见hSAMP32mRNA的表达,镜下可见蓝紫色阳性颗粒,空白和阴性对照组未见蓝紫色阳性颗粒。结论:脂质体介导基因转染法能够将pcDNA3.1hSAMP32真核表达载体高效导入NIH3T3细胞中,实现了hSAMP32基因的体外表达。     

食管细胞学与活检诊断对比分析

对在食管癌高发区普查中诊断为重度增生的患者,进行食管拉网细胞学、内镜刷检细胞学与内镜活检组织学的复查,并对诊断结果进行对比。结果细胞学诊断与组织学诊断在癌前增生阶段的符合率较低。细胞学癌前增生检出率高于组织学。二者对于鳞癌的诊断符合率较高。提示:食管拉网细胞学检查适合于食管癌前病变的研究,并可作为早期食管癌诊断及筛选方法。     

食管鳞癌组织AgNOR计数与DNA倍体的关系

本文应用ＡｇＮＯＲ技术对２０例食管鳞癌手术切除标本中癌细胞核内ＡｇＮＯＲ进行计数，同时运用流式细胞分析技术测定其ＤＮＡ指数（ＤＩ）及Ｓ期细胞百分率，并与ＡｇＮＯＲ计数进行比较。结果显示：食管鳞癌细胞核内平均ＡｇＮＯＲ数目与Ｓ期细胞百分率呈明显正相关（ｒ＝０．７３）。而ＤＩ与ＡｇＮＯＲ计数无明显相关关系（ｒ＝０．３０）。     

KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的相关性

目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1和nm23与人黑色素瘤细胞转移潜能的关系.方法:应用Northern blot杂交检测不同转移潜能人黑色素瘤细胞中KAI1和nm23基因的表达.结果:4种不同转移潜能的人黑色素瘤细胞中(WM35,WM451,WM983a,WM1341b),KAI1 mRNA和nm23 mRNA均有表达且表达量基本一致,KAI1在4种细胞中的积分光密度值分别为0.1798,0.1800,0.1501,0.1582;nm23分别为1.0428,1.0607,1.0141,1.0754.结论:KAI1基因与nm23基因的表达降低与人黑色素瘤的浸润转移无关.     

不同转移潜能人肺癌细胞系KAI1基因的表达

目的:探讨KAI1基因与人肺癌细胞系转移潜能的关系.方法:利用逆转录-PCR和Northern blot杂交法分析不同转移潜能人肺癌细胞系中KAI1 mRNA的表达,并用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测与突变的关系.结果:在高转移潜能细胞系PG中KAI1 mRNA表达降低,在无转移潜能的PAa细胞中KAI1的表达量比PG细胞高10倍以上(积分光密度比值分别为0.7313和0.0549).PCR-SSCP结果显示在PG细胞KAI1基因第7外显子出现异常改变.结论:肺癌细胞的转移潜能可能与KAI1基因表达量有关,KAI1基因的低表达可能由基因突变所致.