ANP基因敲除小鼠的饲养繁育及基因型鉴定

目的繁殖和鉴定心房钠尿肽(ANP)基因敲除小鼠。方法将引进的ANP敲除杂合子小鼠进行饲养并繁殖,提取子代小鼠尾部DNA,用PCR方法检测子代小鼠基因型。结果获得子代小鼠,基因型分别为杂合子(ANP+/-)、纯合子(ANP-/-)和野生型(ANP+/+),子代小鼠纯合率为9.09%。结论 ANP基因敲除小鼠的繁育和鉴定均获得成功,为进一步研究ANP缺失对肿瘤发生发展的影响提供了理想的动物模型。     

Tricine-SDS-PAGE分析抑肽酶相对分子质量的方法初探

目的:分析小分子多肽抑肽酶的相对分子质量。方法:用Tricine-SDS-PAGE法,采用三羟甲基氨基甘氨酸(Tricine)代替甘氨酸作为尾随离子,用来检测小分子多肽的相对分子质量。结果:根据标准曲线测算抑肽酶分子量分别为6 487.5 Da(1μg)、6 677.6 Da(2μg),接近真实值。结论:本方法能够消除由于多肽分子与标准蛋白质空间构象的不同带来的误差,并克服了普通SDS-PAGE小分子蛋白条带带型弥散的缺点。     

川芎嗪联合顺铂对老年肺癌病人基质细胞衍生因子?1、凋亡抑制蛋白因子与基质金属蛋白酶表达的影响

目的探究川芎嗪联合顺铂对老年病人(SDF?1)、凋亡抑制蛋白因子(Livin)、基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响。方法选取 2016年 6月至 2018年 6月攀钢集团总医院密地院区收治的老年肺癌病人 140例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组各 70例。对照组采用 NP化疗方案,观察组在对照组基础上联合使用川芎嗪。比较两组治疗效果、生活质量、 SDF? 1、Livin α、Livin β、MMP?2、MMP?9水平。结果两组治疗有效率比较,差异无统计学意义［32(45.7%)比 43(61.4%),χ2＝3.475,P＝0.062］;观察组生活质量评分高于对照组［(23.46±4.21)分比(14.19±3.32)分, t＝14.466,P＝0.000］;观察组 SDF?1、 Livinα、Livin β、MMP?2、MMP?9等均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);观察组不良反应发生率低于对照组［40(57.1%)比 51(72.9%),χ2＝4.272,P＝0.039］。结论川芎嗪联合顺铂治疗老年肺癌病人能够降低肿瘤组织 SDF?1、Livin、 MMPs表达,提高临床疗效,有助于提高病人生活质量,降低不良反应的发生。     

靶向CD24的siRNA表达载体构建及其沉默效应的研究

目的构建CD24特异的RNA干扰质粒,为探讨CD24在肿瘤中的作用及以其为靶点的肿瘤治疗奠定基础。方法根据Genbank提供的核苷酸序列,设计、合成靶向CD24基因的寡核苷酸序列,并与表达质粒psilence3.1-H1-Hygro连接,将构建成功的重组质粒pSi-CD24转染到宫颈癌上皮细胞Hela中,用RT-PCR和Western blot检测转染后Hela细胞CD24表达的变化。结果成功构建CD24 siRNA表达载体pSi-CD24,转染Hela细胞后在mRNA水平和蛋白水平均能显著抑制CD24的表达。结论成功构建了CD24特异性siRNA表达载体pSi-CD24,能有效阻断Hela细胞CD24的表达,为进一步研究奠定了基础。     

后路间接减压治疗不同椎管侵占率的胸腰椎爆裂骨折的效果观察

背景:胸腰椎爆裂骨折突入椎管的骨块可通过韧带复位技术间接复位椎管减压,但椎管被侵占至何种程度可采用韧带复位存在争议,而目前对较高椎管侵占率病例韧带复位的效果报道较少。目的目的:比较后纵韧带连续、椎管侵占率不同的胸腰椎爆裂骨折患者行后路间接椎管减压治疗的临床及影像学结果。方法方法:回顾性分析2010年6月至2014年6月收治的后纵韧带连续的胸腰椎爆裂骨折患者175例,按术前椎管侵占程度不同分为两组。低侵占率组:术前椎管侵占率<50%,高侵占率组:术前椎管侵占率≥50%。比较两组ASIA分级、伤椎后凸Cobb角、椎体压缩率、术后椎管侵占率。同时观察高侵占率组手术前后影像学结果的变化。结果结果:两组术前ASIA分级差异有统计学意义(P<0.05),但术后ASIA分级差异无统计学意义(P>0.05)。术前低侵占率组的伤椎后凸Cobb角、椎体压缩率、椎管侵占率分别为28.18°±12.00°、35.68%±10.72%、36.68%±6.75%;高侵占率组分别为36.64°±10.85°、52.50%±12.20%、63.57%±11.33%;两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后低侵占率组的伤椎后凸Cobb角、椎体压缩率、椎管侵占率分别为5.95°±2.75°、6.41%±3.19%、11.59°±5.99%;高侵占率组的上述三个值分别为7.00°±3.88°、8.21%±3.49%、15.79%±6.70%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。同时,高侵占率组的上述三个参数手术前后比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论结论:对后纵韧带连续的胸腰椎骨折,椎管侵占率≥50%的高侵占率患者也可应用韧带复位技术行后路间接减压手术,后纵韧带的完整性可作为后路间接减压的指征之一。     

早期应用神经营养因子对周围神经损伤修复的研究观察

[目的]研究探索神经生长因子(nervegrowth factor NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor bFGF)联用对大鼠坐骨神经钳夹损伤后神经纤维再生修复的促进作用和对失神经支配的小腿三头肌的保护作用。[方法]手术钳夹损伤坐骨神经后，损伤处神经内注射NGF和bFGF，对照组注射等量生理盐水，术后每日在术侧腓肠肌内注射药物，术后4、8、12周，进行足印分析及坐骨神经功能指数测定，取小腿三头肌称湿重，取脊髓及神经肌肉行组织病理观察。[结果]联用NGF bFGF，能显著改善神经损伤后引起的神经功能指数，有效地减轻由于失神经支配后肌肉的萎缩，促进神经纤维的修复与再生。[结论]联用NGF、bFGF对大鼠坐骨神经钳夹损伤后神经纤维再生修复具有显著的促进作用，可减轻失神经支配的小腿三头肌的萎缩。     

miR-126-5p靶向抑制ERCC1增加结肠癌细胞对奥沙利铂化疗的敏感性

目的 探讨miR-126-5p通过靶向抑制切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complement 1,ERCC1)促进结肠癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)的敏感性及其分子机制。方法 利用L-OHP浓度梯度递增法处理结肠癌细胞HCT116,建立耐L-OHP的人结肠癌细胞株HCT116/L-OHP。CCK-8法检测并计算L-OHP作用后的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)值。qRT-PCR法检测miR-126-5p和ERCC1在HCT116和HCT116/L-OHP细胞株中的表达。利用Lipofectamine^? 2000转染miR-126-5p mimics(miR-126-5p mimics组)和miR-NC质粒(miR-NC组)后,CCK-8法检测HCT116/L-OHP细胞对L-OHP的敏感性的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率。利用双荧光素酶报告实验验证miR-126-5p和ERCC1的相互作用机制。Western bl...     

伽玛刀治疗听神经瘤失败后再手术的方法及疗效分析

目的探讨伽玛刀治疗听神经瘤失败后再行手术治疗的方法及其效果。方法 20例听神经瘤患者接受伽玛刀治疗后不同时期复查MRI发现肿瘤继续生长或临床症状加重,采用枕下乙状窦后入路行听神经瘤切除术。结果术中发现肿瘤与面神经及周围结构粘连明显。肿瘤全切及近全切除共18例(占90%),次全切除共2例(占10%)。面神经解剖保留18例(占90%),功能保留16例(占80%)。结论采用枕下乙状窦后入路肿瘤切除术是挽救伽玛刀治疗听神经瘤失败后的有效方法,面神经功能保护满意。