耐核糖核酸酶内含HCV RNA病毒样颗粒的表达

目的 构建可以表达耐核糖核酸酶(RNase)的内含HCV RNA病毒样颗粒的载体质粒。方法 将表达载体pI NCCL用Hind Ⅲ酶切后，与用相同内切酶酶切的HCV RNA非编码区(5′-UTR)扩增产物，在T4 DNA连接酶的存在下连接，构建一新的表达载体pI NCCL-HCV RNA 5′-UTR，再转化BL21-DE3 E．coli进行原核表达。结果 成功构建得到了新的表达载体pI NCCL-HCV RNA5′-UTR，经原核表达为耐RNase的内含HCV RNA病毒样颗粒。结论 得到的pI NCCL-HCV RNA 5′-UTR表达载体及原核表达系统，可作为一个耐RNase的HCV RNA标准品和质控品的构建和制备表达载体平台。     

γ-干扰素基因修饰人肝癌细胞的免疫原性研究

目的研究ＩＦＮ－γ基因修饰后人肝癌细胞的免疫原性。方法利用逆转录病毒载体ＬＸＳＮ分别建立了四种ＩＦＮ－γ基因修饰人肝癌细胞，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交进行鉴定分析，流式细胞仪（ＦＡＣＳ）分析细胞表面ＭＨＣ分子表达，灭活肿瘤细胞体外刺激诱导细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）产生。结果Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果表明，ＩＦＮ－γ基因在宿主细胞中获得了正确整合和表达。ＦＡＣＳ分析结果表明，ＩＦＮ－γ基因修饰后人肝癌细胞表面ＨＬＡⅠ类分子表达强度显著增强，Ⅱ类分子的表达阳性百分率有显著提高。一些ＩＦＮ－γ基因修饰人肝癌细胞在体外诱导细胞毒Ｔ淋巴细胞的能力有所提高。结论ＩＦＮ－γ基因修饰可增强人肝癌细胞的免疫原性，为基因工程瘤苗的临床应用提供了一定依据。     

105例酒依赖患者临床特征与MMPI测试结果分析

目的：探讨酒依赖病人的人格特征，以及临床表现与人格特征关系。方法：运用明尼苏达多项个性调查有（MMPI）测查我中心住院的105例酒依赖病人并进行对照分析。结果：与正常人相比，酒依赖病人量表分数存在显著性差异。年龄以35岁为界的两组病人在Hs、D、Hy、Pd量表存在显著性差异。有或无精神病性症状的两组病人在L、F、K、Hs、Hy、Pd、Pa、Sc、Pt、Ma、Si量表存在显著性的差异。结论：低年龄段或伴有精神病性症状的患者具有显著的人格偏离。     

大地震创伤后应激障碍患者的心理与神经内分泌变化

目的 :研究唐山大地震所致慢性创伤后应激障碍患者基础血清皮质醇浓度和地塞米松抑制试验。方法 :唐山大地震所致创伤后应激障碍 3 5例 (研究组 )和 3 3例正常人 (对照组 )接受了基础血清皮质醇水平的测定和地塞米松抑制试验。结果 :两组基础血清皮质醇水平比较差异无统计学显著性 ,各组男女之间基础血清皮质醇水平分别比较差异亦无统计学显著性。两组服用相同剂量的地塞米松后 ,研究组血清皮质醇水平低于对照组和对血清皮质醇的抑制作用高于对照组 ,差异均有统计学显著性。各组男女之间的基础血清皮质醇水平、服用地塞米松后血清皮质醇水平和对地塞米松的抑制率比较差异无统计学显著性。结论 :唐山大地震所致慢性PTSD患者对糖皮质激素的敏感性增高而导致PHA轴负反馈抑制增强 ,无性别差异     

高血压病血压昼夜节律与心肌缺血的关系

目的 探讨高血压病患者血压昼夜节律改变与心肌缺血之间的关系及临床意义。方法对90例高血压病患者,根据动态心电图上有无心肌缺血(MI)分为MI组(40例)和无MI组(50例),并与20例健康体检者进行对照,观察3组的动态血压变化,同时分析血压昼夜节律正常组和异常组的心肌缺血的发生情况。结果 高血压病伴有MI的患者中,除dSBP、24hDBPL、dSBPL、dDBPL与无MI组比较无统计学差异外,其余各项动态血压指标均明显高于无MI组(P<0.01);高血压病血压昼夜节律异常组发生MI者明显高于血压昼夜节律正常组(P<0.05)。结论 高血压病患者中伴有血压昼夜节律异常者更易导致心肌缺血的发生。对高血压病患者的治疗,除积极控制血压外,还应注意检测和逆转异常的昼夜血压节律,对减少心肌缺血的发生和靶器官损害具有重要意义。     

Effect of beta2-glycoprotein I null mutation on reproductive outcome and antiphospholipid antibody-mediated pregnancy pathology in mice

beta(2)-Glycoprotein I (beta(2)GPI) is a principal target antigen for antiphospholipid antibodies associated with recurrent pregnancy loss and fetal growth restriction in women. The significance of disrupted beta(2)GPI activity in contributing to pregnancy pathology in antiphospholipid syndrome (APS) is not clear. In this study the physiological requirement for functional beta(2)GPI in pregnancy was investigated by evaluating reproductive outcomes in beta(2)GPI null mutant (beta(2)GPI-/-) mice. beta(2)GPI-/- mice were fertile and carried viable fetuses to term. However, there was an 18% reduction in the number of viable implantation sites in beta(2)GPI-/- mice and reduced fetal weight and fetal:placental weight ratio in late gestation, suggesting compromised placental function. Placental architecture was altered in beta(2)GPI-/- implantation sites with a 24% increase in the junctional zone: labyrinthine ratio, but placentae showed no evidence of increased thrombosis in the absence of beta(2)GPI. The effect of beta(2)GPI genotype on pregnancy success after passive transfer of human and mouse antibodies reactive with beta(2)GPI was also explored. Two of five anti-beta(2)GPI antibodies induced pregnancy loss in beta(2)GPI+/+ mice but beta(2)GPI-/- mice were refractory to antibody-induced pregnancy failure. We conclude that functional beta(2)GPI is not essential for successful pregnancy in mice, but optimal placental development and fetal growth require this molecule. Together these data are consistent with pathogenic mechanisms in antiphospholipid syndrome involving both neutralization of beta(2)GPI function and beta(2)GPI-immunoglobulin complex formation.     

双重实时PCR快速同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌

目的建立改良分子信标双重实时PCR同时检测霍乱弧菌和副溶血弧菌的快速方法,应用于霍乱监测、副溶血弧菌食物中毒的快速诊断和海产品检验。方法根据GenBank公布的霍乱弧菌肠毒素基因A亚单位(ctxA)和副溶血弧菌的耐热直接溶血毒素基因(TDH)的保守序列,分别设计引物和改良分子信标探针,以10种细菌作对照,建立双重实时PCR改良分子信标检测体系,应用于副溶血弧菌食物中毒快速诊断和霍乱监测。结果改良分子信标双重实时PCR反应体系DNA灵敏度为102.4～166.6fgμl,菌液灵敏度为32～64CFUml或3～6CFUPCR反应体系,无交叉反应。此反应体系同时检测40株副溶血弧菌和50株霍乱弧菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对3起细菌性食物中毒共48份样品和100份海产品进行检测,9份副溶血弧菌实时PCR阳性,其中7份副溶血弧菌细菌培养阳性,其余样品都为阴性。从样品处理到检测结果仅需1天时间。结论改良分子信标双重实时PCR检测体系快速、灵敏度高、特异性强,可用于霍乱和副溶血弧菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

HIV-1准种的变化与疾病进展关系的研究

目的　研究HIV 1准种的变化对疾病进展的影响。方法　PCR方法扩增HIV 1V3～V5区片段 ,采用HMA(异源双链泳动分析 )的方法分析 4 8例HIV/AIDS准种的变化 ,并结合HIV/AIDSCD4 T淋巴细胞计数及病毒载量的结果分析HIV 1准种的变化对疾病进程的影响。结果　在不同的疾病状态下 ,体内病毒变异是不相同的 ,在体内CD4 T淋巴细胞计数较高 ,血浆病毒载量低的个体内 ,病毒毒株有很强的变异特征 ,体内具有很高的准种复杂度 ;而在CD4 细胞数很低 ,病毒载量较高的个体 ,病毒基因变异较少 ,病毒准种较为单一。结论　HIV 1准种的变化与疾病进展相关。     

中国心身健康量表与SCL—90作为筛查工具的应用和适用性比较

目的：比较中心心身健康量表（CPSHS）和SCL90在筛选正常人群心理障碍方面的品质和适用性。方法：采用CPSHS和SCL－90同时测试457例学生。结果：CPSHS与SCL－90的筛查结果虽在判别阴、阳病例的总体上有显著性差异（P＜0．01）。但两者的阳性率（13．6％,10．9％）,经Mcnemar检验无显著性差异（P＞0．05）,一致性检验具有显著性意义（Kappa=0.451)。各量表筛查阳性病例中,CPSHS躯体体化因子的贡献率明显高于SCL－90（88．75,24．0％）。CPSHS与SCL－90的总分以及所有各因子均存在密切相关（r=0.139-0.707,P均＜0．01）。结论CPSHS既与CL－90有较好的平行效度,同时躯体症状因子和测试项目的增多更符合中国国情,对无效或不合作测试也能进行较好判别。完全可以作为中国正常人群心身问题的筛查工具。与SCL－90相比,具有更好的适用性。     

IL—18对狼疮性肾炎患者外周血淋巴细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的：研究LN患者外周血淋巴细胞（PBL）在IL－18刺激下细胞凋亡及凋亡相关基因表达情况。方法：Anniexin V联合PI染色定量法及免疫荧光染色法,分析了12例活动期和26例非活动期狼疮性肾炎患者PBL在IL－18刺激培养后凋亡发生率,凋亡相关基因bcl-2和Fas蛋白的表达以及疾病活动性与淋巴细胞凋亡发生率的相关性。结果：在IL－18刺激培养作用下,活动期LN淋巴细胞凋亡发生率明显增高（P＜0．01）,而非活动期则无明显区别（P＞0．05）,疾病活动性与体外淋巴细胞凋亡率呈正相关（P＜0．01）。bcl-2表达活动期显著性升高（P＜0．05）,非活动期无显著性差异（P＞0．05）。Fas表达活动期显著升高（P＜0．001）,非活动期明显升高（P＜0．05）。结论：IL－18可引起LN患者外周血淋巴细胞凋亡率的增高,表明IL－18在体内凋亡或凋亡相关性免疫机制中起着一定的作用。