血管内皮生长因子受体启动子驱动重组腺病毒双自杀基因系统选择性杀伤大肠癌细胞

OBJECTIVE: To observe the selective killing effect of adenovirus (Ad)-mediated double suicide gene driven by kinase domain-containing receptor(KDR) promoter on human colorectal cancer LoVo cells and human umbilical vein endothelial ECV304 cells. METHODS: The plasmid pAdEasy-KDR-CDglyTK was transfected into 293 packaging cells for amplification of the infectious Ad and used to infect the KDR-producing cells (ECV304 and LoVo) and the KDR-nonproducing cells (LS174T) respectively. The three cells were treated with the prodrugs 5-flurocytosine (5-FC) and ganciclovir (GCV) at different concentrations after infection. The killing effects of the fusion gene system on the cells were evaluated. The distribution of cell cycle was detected by flow cytometry. RESULTS: The infection rates of the recombinant Ad were similar among the 3 cells, gradually increasing with the increment of multiplicity of infection (MOI) and reaching 100% with the MOI of 200. The LoVo cells and ECV304 cells infected with Ad-KDR-CDglyTK were highly sensitive to both of the prodrugs (P>0.1), whereas the infected LS174T cells failed to exhibit similar sensitivity (P<0.001). The killing effect of CD/TK fusion gene on the target cells was much stronger than that of either suicide gene (P<0.001). The cell cycle of LoVo cells was arrested at G1 phase. CONCLUSION: The CD/TK fusion gene system driven by KDR promoter can selectively kill KDR-expressing human colorectal cancer LoVo cells and endothelial cells.     

Small interfering RNA inhibits SARS-CoV nucleocapsid gene expression in cultured cells and mouse muscles

SARS-CoV isa newly identified coronavirus that causes severe acute respiratory syndrome （SARS）. Currently, there is no effective method available for prophylaxis and treatment of SARS-CoVinfections. In the present study, the influence of small interfering RNA （siRNA） on SARS-CoV nucleocapsid （N） protein expression was detected in cultured cells and mouse muscles. Four siRNA expression cassettes driven by mouse U6 promoter targeting SARS-CoV N gene were prepared, and their inhibitory effects on expression of N and enhanced green fluorescence protein （EGFP） fusion protein were observed.     

Cr:LiSAF激光在组织自体荧光光谱研究中的应用

目的　该文以Cr:liSAF激光作为激发光源 ,针对生物大分子设计了荧光实验 ,以探讨其在组织自体荧光研究中的应用。方法　氙灯泵浦Cr:LiSAF二次谐波用来产生可调谐蓝光脉冲激光输出 ,并设计了自体荧光试验。结果　最后设计并实现了可调谐蓝光脉冲激光输出 ,得到了良好的输出特性。结论　氙灯泵浦Cr:LiSAF二次谐波产生可调谐蓝光脉冲激光输出得到了良好的输出特性 ,该实验为进一步研究肿瘤组织与正常组织自体荧光产生机制打下了基础。     

原代培养神经细胞膜经N—甲基—D—D天冬氨酸和MK—801作用后原子力微镜观察

目的：对比观察正常培养皮层神经元在N－甲基－D－天冬氨酸（NMDA）及其受体拮抗剂－MK－801作用下膜表面三维构像形态的改变。方法：利用分辨率为0．1－0．01nm的原子力显微镜（AFM）对原代培养大鼠皮层神经细胞膜表面进行纳米尺度的扫描观测。结果：正常神经元膜表面光滑，起伏均匀，隆起的颗粒状蛋白密集，间隔规律。NMDA损伤后神经元破碎，崩解，膜失去连续性，NMDA＋MK－801作用下神经元膜皱折增加，边缘粗糙，起伏程度介于前两者之间，结论：（1）AFM具有分辨率高，制样简单特点，（2）AFM能细微地分辨损伤保护作用后引起的细胞膜表面三维形态改变。（3）NMDA作用后膜结构开始解体，膜蛋白颗粒聚集增大，脂质凹陷加深，间距增宽，表面粗糙度增加。     

正常血钾型周期性麻痹SCN4A基因新突变的检测

目的　报道正常血钾型周期性麻痹 (normoPP)一家系的临床特点 ,并筛查SCN4A基因以期发现有义突变。方法　提取知情同意的患者及部分家属外周血基因组DNA ,应用变性高效液相色谱分析 (DHPLC)技术筛查患者SCN4A基因全部 2 4个外显子 ,对发现异常者进行测序分析。结果先证者常规实验室检查未见异常 ,发作期肌酸激酶 (CK) 112 6U/L(正常值 <2 0 0U/L) ,肌电图正常。发作间期行肌肉活检未见显著异常。基因研究发现先证者及其父亲 (患者 )SCN4A基因发生同一新突变G2 10 1A ,并引起氨基酸序列改变Arg6 75Gln。该突变不同于目前发现的明确导致高钾型周期性麻痹(hyperPP)的突变 ,也不同于已知的SCN4A基因所有突变。结论　normoPP患者存在一新突变Arg6 75Gln ,该突变可能与疾病相关。     

抑肽酶对瓣膜置换术患者心肌粘附分子表达及细胞凋亡的影响

目的探讨抑肽酶对二尖瓣置换术患者围体外循环（CPB）期心肌细胞及心肌血管内皮细胞上细胞间粘附分子-1（ICAM-1）、血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）表达及心肌细胞凋亡的影响。方法择期二尖瓣置换术患者30例,年龄24～59岁,体重46～73 kg,心功能分级Ⅱ级或Ⅲ级,随机分为2组（n=15）：对照组和抑肽酶组,抑肽酶组于CPB转机前,预充液中加入抑肽酶300万KIU,对照组则给予等容量生理盐水,分别于CPB前和CPB停止时取右心房心肌组织标本,采用免疫组织化学SP法染色,检测心肌细胞和心肌血管内皮细胞上ICAM-1、VCAM-1的表达,采用病理图像分析系统对ICAM-1、VCAM-1表达的灰度值作定量分析,采用TUNEL法检测凋亡心肌细胞。结果抑肽酶组CPB停止时ICAM-1、VCAM-1的表达低于对照组（P〈0.01）;2组CPB停止时心肌细胞凋亡指数较CPB前增高（P〈0.05）,抑肽酶组CPB停止时心肌细胞凋亡指数低于对照组（P〈0.05）。结论预充液中加入抑肽酶300万KIU可抑制二尖瓣置换术患者CPB期间心肌细胞和心肌血管内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的表达及心肌细胞的凋亡。     

对支气管哮喘患者进行系统教育和管理的效果评估

对哮喘患者进行教育和管理渐渐受到人们的重视并成为影响哮喘整体防治效果的重要因素。我院自从1999年起即以多种形式持之以恒进行着这方面的研究工作,由此而来的效果已经引起大家的关注。本研究旨在调查目前仍在我院接受哮喘教育和管理的成年患者对于哮喘的认知水平、用药情况和病情控制水平,并评价我们几年来进行哮喘患者系统教育和管理的效果,以指导今后工作,进一步提高哮喘管理水平。     

疔毒丸对小鼠巨噬细胞活性抑制作用的观察

观察了疗毒丸对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明,疔毒丸及其主要成分巴豆霜对小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性有明显的抑制作用。从而提示临床上使用疔毒丸时,不可忽视它可能抑制免疫功能的副作用。     

左氧氟沙星治疗细菌性感染70例

目的：观察左氧氟沙星治疗细菌感染的疗效和安全性。方法：以左氧氟沙星治疗细菌性感染７０例（男性３５例，女性３５例，年龄５４±ｓ１５ａ），其中下呼吸道感染４０例，尿路感染３０例，剂量一般为０．２ｇ，ｐｏ，ｂｉｄ，疗程７～１４ｄ；单纯性下尿路感染为０．２ｇ，ｐｏ，ｑｄ，疗程５～７ｄ。结果：总有效率９３％，细菌清除率８８％，不良反应轻微，呈一过性，发生率为６％。结论：左氧氟沙星治疗细菌性感染有效而安全。     

职业卫生与职业医学开放性实验教学效果评价研究

目的 在预防医学专业本科学生中开展开放性实验,探索实验教学改革方法,提升学生的专业素养和科研能力。方法 针对预防医学专业大四学生,以职业卫生与职业医学实验课程为抓手,进行开放实验教学,然后用问卷调查评估实验效果。2016级预防医学专业学生147人为对照组,开展常规验证性实验;2017级预防医学专业学生176人为试验组,开展开放性实验。从综合考评成绩、教师自评、学生满意度调查3个方面进行评价。采用SPSS 22.0软件进行独立样本t检验、卡方检验。结果 试验组和对照组学生的职业卫生与职业医学期末考试理论成绩是[（84.37±10.45）分 vs. （81.44±9.22）分]（t=2.68,P=0.008）,实验技能成绩是[（93.66±3.89）分 vs. （88.41±5.67）分]（t=9.51,P<0.001）,两组相比,试验组高于对照组,差异有统计学意义。问卷调查显示,试验组学生对于学时安排（χ²=8.31,P=0.004）、小组协作（χ²=21.10,P<0.001）、考核形式（χ²=7.92,P=0.005）、提升科研论文撰写能力（χ²=17.56,P<0.001）、提高实践技能（χ²=11.70,P=0.001）、逻辑思维和语言组织表达能力（χ²=10.33,P=0.001）的满意度更高。学生认为开放实验有助于培养学生创新思维和能力,但是对于就业优势的培养作用有限。学生认为开设专业课的开放性实验具有充分必要性。结论 在预防医学专业学生中开展开放性实验对于学生提升专业素养、增强实践和科研能力是有益的。