采用简并引物克隆葎草花粉过敏原全长同源cDNA

目的：建立一套稳定可靠的方法，对过敏原性物种中的过敏原同源基因进行快速克隆。方法：在分析生物信息数据库中积累的大量过敏原序列同源性的基础上，设计简并引物，基于高质量Lǘ草花粉RNA，逆转录合成cDNA。采用Touchdown方式在cDNA池中进行选择性PCR扩增。同时借助梯度PCR程序，对引物扩增的简并性作进一步强化，并结合RACE技术获取全长cDNA．进而对Lǘ草花粉中的过敏原同源基因进行克隆。结果：成功地获得3个全长cDNA克隆。序列分析显示．这些基因与已知过敏原的基因序列相似性高达79％-85％，初步认定其为泛过敏原肌球蛋白抑制蛋白(profilin)的同源基因。对比RACE技术获得的相应基因的全长序列发现，这些序列在引物结合处与简并引物序列之间存在4个碱基的差异，提示采用Touchdown方式的梯度PCR程序．可使引物的简并性得到进一步扩展。结论：简并引物与Touchdown梯度PCR相结合的方法．能够对以Lǘ草为代表的基因组未曾深入研究的物种中的过敏原同源基因进行有效克隆.     

腺苷和抗IgE抗体对哮喘患者BALF中肥大细胞分泌组胺的影响

目的 :研究支气管哮喘 (哮喘 )患者支气管肺泡灌洗液 (BALF)中肥大细胞的功能特性。方法 :2 9例轻度哮喘患者BALF中的细胞经冲洗后 ,加入含抗IgE抗体、腺苷、缓冲液或腺苷 +抗IgE抗体的LP4试管中进行激发试验。检测BALF肥大细胞中的组胺释放量。结果 :腺苷浓度达 10 0 μmol/L时 ,仍无明显刺激组胺释放的作用 ,仅在浓度高达 10 0 0 μmol/L时 ,方可诱导哮喘患者BALF中肥大细胞释放约 17%的组胺。抗IgE抗体的浓度大于 1× 10 -4g/L时对哮喘患者BALF中肥大细胞的释放组胺有明显的促进作用 ;仅 3× 10 -5g/L的抗IgE抗体与腺苷联合应用的实测值 ,明显高于对应的单独作用组的相加值。结论 :哮喘患者BALF中的肥大细胞对腺苷的刺激反应较差 ,但对抗IgE抗体刺激的反应性明显增强。仅低浓度的抗IgE抗体和腺苷具有协同作用。     

共聚焦激光扫描显微镜活体观察针刺家兔双侧风池穴对大脑皮质内微循环的影响

目的 :探讨针刺穴位对微循环的影响。方法 :用共聚焦激光扫描显微镜在开放颅窗的动物模型上活体观察了针刺家兔双侧风池穴 ,对大脑皮质内微循环的影响。测量不同口径血管的轴流、缘流的荧光辉度 ,并描绘出荧光辉度曲线。测量同一血管在生理状态下针刺双侧风池穴引起的血液缘流厚度变化、血管口径变化 ,用SAS软件包做统计学分析 ,并用四分位法描图以间接观察血管运动。结果 :电针刺激能引起动脉的舒缩运动 ,但缘流厚度却无明显的变化或有所增加 ,又一次证明了血液缘流保护性屏障假说的真实性 ;电针刺激可引起血管口径为 31.36± 4.89μm的动脉明显的血管舒缩运动 ,对血管口径为 17.31± 2 .5 3μm和血管口径为71.0 0± 5 .30 μm的动脉则未引起血管口径的明显血管舒缩运动 ,在电针刺激各期中 ,以A5后遗效应期最明显 ,说明针刺除在针刺当时有效果 ,而在针刺结束后的后遗效应则可能发挥更大作用。结论 :针刺能通过引起大脑皮质内微循环状态的改变来实现其抗休克及治疗脑血管疾病的作用。     

咖啡因对平阳霉素诱发人精子染色体畸变的影响

目的 探讨咖啡因对平阳霉素诱发人精子染色体畸变的影响。方法 人精子经平阳霉素（ｐｉｎｙａｎｇｍｙｃｉｎ,ＰＹＭ）处理与去透明带地鼠卵受精,受精１ｈ后加入咖啡因（ｃａｆｆｅｉｎｅ,ＣＡＦ）后处理,继而制备染色体进行结构畸变精子率依次为２７％、４０％、７６％;断裂均数依次为０．７２、１．９２、４．３６上述各组参数均高于空白对照组（８．０％、０．１４）,差异有非常显著意义（Ｐ〈０．０１）。与ＣＡＦ组和Ｐ     

沟通理论模式在神经外科失语病人中的运用研究

目的探讨沟通理论在神经外科失语病人中的运用价值。方法对我院神经外科收治的28例神志清楚的失语患者运用恰当语言交流、自制图片、自编手语暗号和提供写字板等形式与病人沟通。结果89％的病人表示能清楚地表达所需,对护理工作的满意达96％。结论良好的沟通不仅能减少病人紧张、烦躁的情绪,满足病人身心的需要,也有利于病情的康复。     

孕妇学校教育方法及课程内容需求的探讨

总结了孕妇学校对孕妇的健康教育,包括孕期教育、待产期指导、哺乳期传授教育和设立热线电话等全程健康教育方法.全程健康教育改变了孕产妇过去不健康的行为习惯,提高了生活质量,提高了母乳喂养的成功率,减少了围手术期并发症的发生.认为孕妇学校能根据孕妇的需求提供适宜的健康教育方式和内容,教育效果满意.     

新生儿高胆红素血症心肌酶谱与超敏C-反应蛋白的临床意义

目的探讨新生儿高胆红素血症患儿心肌酶谱及超敏C-反应蛋白改变的临床意义。方法选取2007年1月～2009年10月,我院收治的90例足月新生儿,高胆红素组60例,对照组(正常新生儿)30例,高胆红素组治疗前、后及对照组均行股静脉穿刺采血作肝功能、心肌酶谱(CK、CK-MB、LDH、AST)及hs-CRP检测。结果高胆红素组治疗前心肌酶谱及超敏C-反应蛋白浓度与对照组比较明显升高,差异有统计学意义(p<0·01);高胆红素组治疗后心肌酶谱及超敏C反应蛋白浓度趋于正常(p>0·05);治疗前后有非常显著性差异(p<0·01)。结论新生儿高胆红素血症可发生心肌损害,早期心肌酶谱与超敏C-反应蛋白测定有助发现其心肌损害,具有临床指导意义。     

儿童少年上尿路结石的体外冲击波碎石治疗

目的　总结儿童少年肾结石和输尿管结石体外冲击波碎石 (ESWL)治疗经验。方法　回顾分析1990～ 2 0 0 3年间ESWL治疗儿童少年上尿路结石 (48例肾结石和 2 2例输尿管结石 )的临床资料。　结果　 4 8例肾结石ESWL治疗 6 6次 ,结石完全排空 4 1例 (85 % ) ,1次ESWL治疗成功 34例 (70 % ) ,2次治疗 13例 (2 7% ) ,3次治疗2例 (4% )。 2 2例输尿管结石经过 2 8次ESWL治疗。 1次ESWL 16例 (73% ) ,2次ESWL 6例 (2 7% ) ,结石完全排空17例 (77% )。结石平均清除率为 83%。　结论　ESWL是治疗儿童少年肾结石和输尿管结石安全、有效的方法 ,可首选 ,但应严格掌握适应证。     

大学生心身健康水平及其相关因素的四年追踪观察

目的：追踪观察大学生自入学至毕业约四年内的心身健康水平及其相关因素的动态变化。方法：以群体分层抽样法,共抽取受试样本541人,实际有效样本442人。采用中国身心健康量表（CPSHS）、艾森克个性问卷（EPQ）、防御方式问卷（DSQ）、生活事件量表（LES）、社会支持评定量表（SSRS）,大学生在入学体检时、入学三个月和毕业前分别进行测试。结果：毕业前学生心身障碍的检出率（14％）明显高于入学时（9．0％）。男生EPQ－P,入学后随校龄增加而递增,并以毕业前分值最高。从入学三个月始,大学生对不成熟防御机制的动用频率逐步增高。毕业前大学生的生活事件明显多于其它时段,并以家庭问题为主,而入学时则以社交与其它问题为多。结论：大学生在校期间以毕业前心身障碍的检出率最高,大学生心身健康水平主要与其个性、家庭有关的生活事件数量、主观社会支持、性别、年龄有密切关系。其中,社会支持是大学生心身健康的保护因素。     

人呼吸道粘液分泌体外实验方法的建立

目的建立研究人类呼吸道粘液分泌的体外实验方法。方法直径小于3mm的小支气管组织(HSBT)剪碎后被均匀地放入24孔培养板中。分别记录基础粘蛋白分泌量(BM)和激发粘蛋白分泌量(SM)，SM用超过BM的百分率表示。在含50nmol／L视黄酸的BEGM与DMEM(1：1)混合液中进行支气管粘膜上皮的原位培养，在带半透膜的插入培养板中培养正常人支气管上皮细胞(NHBE)。MUC5AC粘蛋白ELISA以其多克隆抗体为一抗，绵羊抗兔IgG为二抗，邻苯二甲酰胺显色。酶连二花葙豆凝集素(DBA)试验(ELDBAA)以DBA铺盘以便与粘蛋白结合，用过氧化物酶标记的DBA识别被捕捉的粘蛋白。结果MUC5AC ELISA的敏感性为10ng／ml，而ELDBAA为30ng/ml。经过3h培养，HSBT的基础MUC5AC和DBA粘蛋白分泌量分别为11和19ng／mg组织。原位培养的支气管粘膜上皮细胞3h积聚的粘蛋白分泌量分别为MUC5AC粘蛋白793-1868ng／孔和DBA粘蛋白290-2675ng／孔。NHBE细胞在气液界面形成后的第6d，3h积聚的基础DBA粘蛋白分泌量为22ng／孔。结论:上述组织和细胞培养以及粘蛋白测量方法的建立为呼吸道粘液分泌的研究奠定了良好基础。