个体化营养治疗对消化系统手术围手术期患者营养状况的影响

目的 探讨个体化营养治疗对存在营养风险的消化系统手术围手术期患者营养状况的影响。方法 本研究为前瞻性、随机对照临床试验。对择期行消化系统手术的患者进行营养风险筛查，将存在营养风险、筛选合格且签署知情同意书的231例患者随机分为研究组（n=115）和对照组（n=116），分别给予个体化营养治疗和非个体化营养治疗15 d（术前5 d至术后9 d）。采集基线数据，分别于入组时及营养治疗第5天、第9天、第15天采集患者空腹静脉血，测量患者BMI、血清总蛋白、血清白蛋白、血清前白蛋白、血糖、总胆固醇、三酰甘油、淋巴细胞计数及白细胞计数等指标。结果 最终纳入患者217例（研究组112例、对照组105例），中途退出14例（6.1%）。（1）组内比较：研究组患者在入组时及营养治疗第5天、第9天、第15天时血清总蛋白、血清白蛋白、血清前白蛋白均呈先上升后下降再上升趋势（P均<0.05），淋巴细胞计数、白细胞计数均呈先下降后上升趋势（P均<0.05），但均在正常范围内；对照组患者在入组时及营养治疗第5天、第9天、第15天时血清白蛋白呈先下降后上升趋势（P<0.05），血清前白蛋白、淋巴细胞计数呈先上升后下降再上升趋势（P均<0.05），但均在正常范围内；其余指标组内比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。（2）组间比较：研究组患者血清总蛋白和血清白蛋白水平均高于对照组（P均<0.05）；术前1 d（营养治疗第5天）研究组白细胞计数低于对照组，但术后第9天（营养治疗第15天）研究组白细胞计数高于对照组（P<0.05）；其余指标组间比较差异均无统计学意义（P均>0.05）。（3）分组与时间交互效应：组间比较的结果表明时间因素不影响营养和免疫相关指标（P>0.05）。结论 个体化营养治疗有利于改善存在营养风险的消化系统手术围手术期患者的营养状况。     

玻璃体切割联合白内障手术治疗增生性糖尿病视网膜病变临床疗效评价

目的评价晶体切除术和超声乳化吸除术联合玻璃体切除术治疗自内障合并糖尿病视网膜病变（PDR）患者的临床疗效。方法83例（90眼）PDR患者随机分为两组,其中A组42例（44眼）采用玻璃体切除联合晶状体切除术治疗,B组4l例（46眼）采用玻璃体切除联合超声乳化吸除术治疗,观察两组的手术疗效。结果术前术后A组和B组视力总体平均值均得到显著性改善（P〈0．05）,且B组患者术后视力改善眼数和视力总体平均值明显大于A组患者（P〈O．05）。A组的虹膜新生血管（INV）发生率（20．45％vs2．17％）和囊膜混浊发生率（31．82％vs6．52％）明显高于B组（P〈0．05）。两组患者其他并发症经对症治疗后均得以恢复。结论玻璃体切除联合超声乳化吸除术治疗白内障合并PDR患者术后视力改善效果优于玻璃体切除联合晶状体切除术,术后并发症和INV发生率更低,值得在临床上广泛应用。     

表面肌电联合等速测试评定肌痉挛的临床研究

目的 研究表面肌电联合等速测试评定肌痉挛的作用.方法 16例脑卒中患者(观察组)和16例正常人(对照组)参加本项研究,采用表面肌电测试训练系统联合等速测试训练仪,进行踝关节等速被动运动时腓肠肌表面肌电的动态测试.惠者痉挛下肢改良Ashworth评分≧1+级,设定踝关节被动运动时测试角速度分别为10°/s、30°/s,每一角速度下重复关节屈伸动作5次,组间休息1 min.分别测定两组踝关节被动活动过程中腓肠肌表面肌电均方根值(RIMS)、峰阻矩(PT)和峰阻矩/体重比(PT/BW),并进行重复测试,二次测试间休息3min.结果 前后两次测试数据的差异无显著性(P>0.05).角速度为分别10°/s、30°/s时,比较观察组与对照组的RMS、PT,、PT/BW指标,除30°/s时的RMS值组间比较无显著性差异外(P>0.05),其余均差异有显著性(P<0.05).10°/s、30°/s两种角速度下观察组间及对照组间比较,除对照组组间PT.、PT/BW比较差异无显著性外(P>0.05),其余数据各组问比较均有显著差异(P<0.05).结论 表面肌电、等速测试评定肌痉挛有良好的信度,稳定性较好,可联合应用作为评定肌痉挛的量化指标.     

GSK3β促进TGF-β1诱导的肾小管上皮HK-2细胞纤维化

目的阐明GSK3β对于肾脏小管间质纤维化的作用。方法以TGF-β1诱导的体外肾小管间质纤维化模型为研究对象,以GSK3β特异抑制剂LiCl处理细胞和不同GSK3β表达质粒(野生型GSK3β表达质粒GSK3β-WT;第9位点上丝氨酸突变为丙氨酸,由此不能再被磷酸化失活而具有固有活性的GSK3β突变质粒GSK3β-S9A;第85、86位点上赖氨酸突变为丙氨酸、失去激酶活性的GSK3β突变质粒GSK3β-KD)转染细胞,观察肾脏纤维化的标志性分子纤维连接素蛋白(fibronectin,FN)表达水平的改变,以及对TGF-β/Smad信号通路的作用。结果 LiCl增加HK-2细胞GSK3β的磷酸化,抑制GSK3β的活性,同时降低了细胞基础水平和TGF-β1诱导的FN表达。过表达的GSK3β-WT增强TGF-β1诱导的FN表达,而这种效应在GSK3β-S9A转染细胞更为显著。过表达GSK3β-KD抑制TGF-β1诱导的FN表达。分析对TGF-β/Smad信号通路的作用,LiCl可以抑制TGF-β1诱导的Smad3磷酸化,而对Smad2磷酸化水平无影响。同时,LiCl也不改变Smad3的总蛋白表达。结论 GSK3β通过TGF-β1/Smad3信号通路促HK-2细胞纤维化,抑制GSK3β可以抗纤维化。     

特异性miR-221抑制剂对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响。方法应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Caco2中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为正常对照;设计并合成miR-221、anti-miR-221(微小RNA抑制剂)寡核苷酸,以脂质体转染Caco2细胞系,以Real-time Q-PCR再次检测转染后细胞中miR-221表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态。结果与正常细胞相比,4种人结肠癌细胞系中miR-221表达均显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01);癌细胞转染anti-miR-221后,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期细胞比例显著下降,并可见细胞凋亡的发生(P<0.01)。结论 miR-221特异性抑制剂可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制结直肠癌细胞生长,提示miR-221作为结直肠癌生物治疗有效靶点有进一步研究价值。     

大孔树脂在三七叶皂苷脱色中的应用研究

目的:解决三七叶总皂苷提取中的脱色工艺技术。方法:组合大孔树脂法。结果:应用组合大孔吸附树脂,在碱性条件下多级脱色,较好地解决了三七叶总皂苷脱色困难,并实施了大规模产业化。     

43例腹壁切口延迟愈合的临床分析

腹壁切口延迟愈合是腹部外科常见并发症,严重者可造成切口裂开等严重并发症。回顾分析我院2002年1月～2005年1月腹壁切口延迟愈合病例共43例,分析其发生原因及处理方法,提出预防措施,报告如下。     

多重PCR靶向富集结合高通量测序筛查结直肠癌中MMR基因的突变

 目的  探讨多重PCR靶向富集结合高通量测序技术在结直肠癌 (colorectal cancer,CRC)中检测错配修复 (mismatch repair,MMR)基因种系突变的应用。方法  收集17例CRC患者和14例正常人的血液并提取基因组DNA;设计和优化寡聚核苷酸探针,使其能对5个基因MLHl、MSH2、PMS1、PMS2和MSH6的73个外显子序列进行有效的PCR扩增和富集;应用多重PCR技术靶向富集样本MMR基因的外显子序列;扩增产物进行文库构建和高通量测序,检测MLHl、MSH2、PMS1、PMS2和MSH6基因的突变情况。结果  31个样本共得到2.7Gb的数据,平均reads数为287 048,测序数据中平均82.18%可与参考序列进行比对,外显子序列平均覆盖度为99.9%,平均测序深度为2 282。在MMR基因的外显子区域共发现13种非同义单核苷酸变异 (single nucleotide variation,SNV)、2种同义 SNV,其中MSH6的c.G3205C:p.G1069R为未见报道SNV。检测结果经Sanger法测序验证,结果一致。结论  多重PCR靶向富集结合高通量测序技术是一套通量高、速度快、费用低、准确性高的MMR基因突变筛查方法。     

子痫前期孕妇外周血辅助性T细胞和自然杀伤细胞的表达水平分析

目的:分析子痫前期(PE)孕妇外周血辅助性T细胞和自然杀伤(NK)细胞表达水平。方法:选择近期住院确诊的PE妇女42例,入选对象均接受辅助性T细胞和自然杀伤(NK)细胞(CD3+、CD4+、CD+8、CD4+/CD8+、CD56+)检测,并与同期住院正常怀孕产妇(对照组,20例)的检测结果比较。结果:PE组血清CD4+、CD4+/CD8+、CD56+表达水平明显高于对照组,而CD8+表达水平则显著低于后者(P均<0.05~0.01)。结论:子痫前期孕妇外周血辅助性T细胞和自然杀伤(NK)细胞的水平异常表达。     

罕见抗-JK3引起新生儿溶血病及家系Kidd血型基因研究

目的 研究Kidd系统稀有血型Jk(a-b-)产生抗-JK3引起的新生儿溶血病,Jk(a-b-)表型的分子机理及其家系Kidd血型的基因遗传.方法 对患儿血样做新生儿溶血病三项检测:直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体和红细胞放散试验;患儿母血样做抗体鉴定及Kidd血型鉴定;患儿父血样做Kidd血型鉴定;采用PCR-SSP方法对患儿及其父母做Kidd血型的基因检测,并对Jk4-11外显子及其侧翼区域扩增后测序,分析其序列信息.结果 患儿为B型RhD阳性、Kidd表型为Jk(a-b+)、基因型为JKB/JKB (IVS5-1);患儿母为O型RhD阳性,Kidd表型为Jk(a-b-)、基因型为Jkb(IVS5-1)/JKb(IVS5-1);患儿父为B型RhD阳性,Kidd表型为Jk(a-b+)、基因型为Jkb3kb;患儿母血浆中存在抗-Jk3,患儿为抗-Jk3引起的新生儿溶血病.结论 患儿母在Jkb等位基因第5内含子3'端保守区剪切结合位点处发生了G到A的突变,导致mRNA转录本中从第6外显子开始缺失,致其Kidd表型为Jk(a-b-),其因妊娠免疫产生了抗-JK3并导致患儿发生新生儿溶血病.