基于类芬顿反应构建磁性纳米粒治疗卵巢癌:体外实验

目的 构建具有类芬顿反应性能的磁性靶向纳米粒,评价其体外光声成像效果及联合催化反应下抑制卵巢癌细胞的作用。方法 以双乳化法制备包裹四氧化三铁（Fe₃O₄）及葡萄糖氧化酶（GOx）的磁性聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）纳米粒Fe₃O₄@PLGA-GOx,观察其基本特性、体外稳定性及释药效果;采用酶标仪监测其联合催化活性,以共聚焦显微镜观察细胞摄取纳米粒能力;以荧光显微镜和流式细胞术观察纳米粒在联合催化作用下产生细胞毒性活性氧的能力;用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测磁性Fe₃O₄@PLGA-GOx体外杀伤人卵巢癌SKOV3细胞的能力,并评价其体外光声成像效果。结果 成功制备出磁性纳米粒Fe₃O₄@PLGA-GOx,平均粒径（290.81±108.52）nm,表面电位（－18.41±5.90）mV;Fe₃O₄及GOx的包封率分别为（91.34±2.35）%和（26.53±6.72）%。外部磁场作用下,细胞对纳米粒摄取增加;随纳米粒浓度增加,光声信号增强。Fe₃O₄@PLGA-GOx可介导类芬顿反应,产生活性氧并发挥细胞毒性作用杀伤肿瘤细胞。结论 成功制备的具有类芬顿反应性能磁性纳米粒在光声成像引导下具有体外催化治疗肿瘤细胞作用。     

G6PD缺乏症单细胞SNaPshot基因诊断方法的建立

目的建立有效可行的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症单细胞基因诊断技术。方法获取正常人及G6PD基因突变杂合子的单个淋巴细胞,采用多重巢式PCR结合多重SNaPshot技术对G6PD基因突变高发的四个外显子上的12个突变位点进行基因诊断。结果共检测了58个正常和108个杂合子单淋巴细胞,扩增效率为90.97%,等位基因脱扣率为8.08%。结论所建立的多重巢式PCR结合SNaPshot技术可在单细胞水平上快速、准确地检测12个G6PD基因突变位点,可望在临床上实现G6PD缺乏症的植入前遗传学诊断。     

不孕患者自身因素和胚胎形态学评价指标与囊胚形成关系的分析

目的探讨不孕患者自身因素以及体外培养Day3胚胎形态学指标与囊胚形成之间的相关性。方法将1894个体外受精-胚胎移植治疗周期的Day3移植后剩余的16191个胚胎进行囊胚培养至Da如,分析女方年龄、不孕因素、体外受精方式、DAY3胚胎卵裂球数目以及碎片程度与囊胚形成的关系。结果女方年龄≤30岁组、31-35岁组和≥36岁组之间的囊胚形成率分别为31．38％（2315／7376）、29．42％（1773／6025）和22．15％（618／2790）,并且组与组之间有统计学差异,P〈0．05;不明原因不孕组的囊胚形成率26．41％（904／3423）低于排卵障碍组29．84％（588／1970）、盆腔输卵管组29．28％（2124／7255）、子宫内膜异位组30．26％（361／1193）和男方因素组3l-02％（729／2350）,且P〈0．05;常规体外受精组的囊胚形成率29．25％（3234／11055）与卵胞浆单精子注射组27．69％（1472／5136）无统计学差异;DAY3卵裂球数目≥7个组、5—6个组和≤4个组的囊胚形成率分别为47．78％（1035／2166）、31．53％（2079／6594）和21．42％（1592／7431）,并且组与组之间有统计学差异,P〈0．05;DAY3碎片程度≤10％组、11—30％组和≥31％组的囊胚形成率分别为33．54％（2719／8106）、25．99％（1951／7507）和6．23％（36／578）,并且组与组之间有统计学差异,P〈0．05。结论女方年龄、不明原因不孕以及Day3胚胎形态学指标卵裂球数目和碎片程度都是影响囊胚形成的重要因素。在保证囊胚体外培养条件的基础上,综合评价患者自身条件以及胚胎发育情况,可以为临床合理运用囊胚培养方案提供依据。     

54例无痛人流术与药物流产的临床效果对比观察

目的观察54例无痛人流术与药物流产的临床效果对比。方法将我院54例要求终止妊娠的妇女随机分为对照组与观察组,每组27例。对照组采用药物流产方案,观察组采用无痛人流术方案,对比两种流产方法效果以及流产中腹痛持续时间和术后持续阴道流血时间、出血量。结果观察组的流产效果明显优于对照组,观察组流产中的腹痛持续时间明显少于对照组,术后持续阴道流血时间也较短,出血量少,均有明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。结论观察组的无痛人流术结束妊娠在流产效果、流产中的腹痛持续时间、术后持续阴道流血时间、出血量明显优于对照组的药物流产,也比较安全,容易被广大女性接受,值得临床推广应用。     

大鼠胰岛B细胞长寿基因SIRT1与转录调节因子FOXO1表达及其相关性研究

目的探讨大鼠胰岛B细胞在衰老进程中长寿基因SIRT1与转录调节因子FOXO1表达的相关性。方法2005年10月至2006年10月,在汕头大学医学院第二附属医院将11只18月龄健康雄性SD大鼠随机分为热量限制(CR)组6只和正常喂养对照组5只,饲养6个月后取胰尾组织,应用免疫组化染色分别检测胰岛中SIRT1、FOXO1和胰岛素表达及分布,衰老相关β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色以反映胰岛B细胞衰老情况。结果SIRT1与FOXO1均可表达于胰岛细胞胞浆、胞核中;β-Gal和胰岛素表达于细胞浆中;与对照组大鼠相比,CR组大鼠胰岛SIRT1表达量较多(P<0.05),衰老相关β-Gal染色强度较弱(P<0.01),胰岛素表达量较低(P<0.05),但FOXO1表达量差异无显著性意义(P>0.05),伴随着SIRT1表达增加,FOXO1胞核阳性率明显降低(P<0.01)。结论热量限制诱导了大鼠胰岛B细胞SIRT1蛋白高表达;SIRT1可能通过抑制FOXO1活性而调控胰岛B细胞的衰老,有利于2型糖尿病的防治。     

D-二聚体、纤维蛋白原在类风湿性关节炎患者外周血中的含量测定

目的通过检测D-二聚体、纤维蛋白原在类风湿性关节炎（RA）中含量的变化,同时测定超敏C反应蛋白、红细胞沉降率及类风湿因子等指标,判断D-二聚体、纤维蛋白原与病情活动度的关系,以指导临床治疗。方法RA组50例、健康对照组30例、骨关节炎组30例,分别测定3组上述指标的变化,采用X2检验、各组之间进行LSD-t检验、直线相关统计学分析。结果RA组中D-二聚体、纤维蛋白原、超敏C反应蛋白、红细胞沉降率及类风湿因子水平均明显升高,RA治疗前后相比D-二聚体、纤维蛋白原、超敏C反应蛋白变化明显,而红细胞沉降率及类风湿因子水平变化不明显,提示D-二聚体、纤维蛋白原、超敏C反应蛋白对RA病情活动度的判断上更为敏感,且D-二聚体、纤维蛋白原均与超敏C反应蛋白、红细胞沉降率呈正相关,与类风湿性因子无相关性。结论RA患者中D-二聚体、纤维蛋白原水平升高,可与超敏C反应蛋白、红细胞沉降率等指标一起判断疾病活动度,上述指标联合检测有助于与其他类型关节炎相鉴别,同时为RA患者进行改善微循环治疗提供有力依据。     

视网膜震荡电位在临床中的应用

视网膜震荡电位起源于视网膜内层,能够反应视网膜内层的血液循环状态,目前已应用于许多眼科疾病的诊断、病情评估及预后判断.现将视网膜震荡电位在临床中的应用价值及前景作一简要介绍,促进这一技术的广泛普及.     

我院门诊苯二氮类药的用药分析

目的讨论我院门诊苯二氮艹卓类(BDZ)药物的使用情况。方法调查我院门诊2005年7月1日至9月30日计算机管理系统数据库中门诊处方记录,进行数据分析、计算、排序、统计。结果36~50岁年龄段病人使用最多,DDDs排序前三位的依次是阿普唑仑、氯硝西泮、劳拉西泮。结论基于我院作为精神疾病专科医院,BDZ类药品使用情况基本合理。BDZ类辅助精神药物治疗精神病使用率高.     

茶多酚对新生大鼠卵巢发育的影响

目的:探讨茶多酚对新生大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响及相关调控机制。方法:受孕11.5dSD大鼠灌胃茶多酚(100mg/kg,qd)直至分娩,分别用多聚甲醛固定出生后1d、2d、4d、8d龄雌仔鼠卵巢(A组),同时将正常出生后1d的雌幼SD大鼠腹腔注射茶多酚(50mg/kg×1-8d),分别固定出生后2d、4d、8d龄卵巢(B组);所有卵巢经HE染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)荧光染色检测卵巢内卵母细胞凋亡变化,免疫组化方法观察叉头转录因子(FOXO3a)、促凋亡因子(Bim)和抗凋亡因子(MnSOD2)在卵巢组织中的表达水平,并以母、幼均未处理的正常同龄大鼠卵巢为对照(C组)。结果:在茶多酚干预组(包括A组和B组)卵巢内,1d、2d龄未装配卵泡比例及4d、8d龄原始卵泡比例均高于C组;A组、B组中卵母细胞TUNEL阳性率显著低于C组;FOXO3a、MnSOD2在A组的1d、2d、4d龄卵巢中的表达高于C组,但二组间的Bim表达水平相一致。结论:茶多酚能延缓新生大鼠卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动,减少卵泡的消耗,可能有益于延长卵巢的生殖寿命;茶多酚可能通过上调FOXO3a的活性从而抑制原始卵泡的发育启动,同时通过激活其下游靶分子MnSOD2抑制卵母细胞的凋亡,促进卵母细胞的存活。