安神补脑液对睡眠剥夺大鼠脑内诱导型一氧化氮合酶及褪黑素的影响

目的研究安神补脑液对睡眠剥夺大鼠脑内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及褪黑素的影响。方法SD大鼠随机分成正常对照组,模型组,安神补脑液高、低剂量组。灌胃给予安神补脑液2周后,用多站台水环境法复制睡眠剥夺模型,取前脑组织测定iNOS的活性,并用高效液相色谱法测定脑内褪黑素的含量。结果与正常对照组比较,睡眠剥夺大鼠脑组织iNOS活力显著增高,褪黑素有减少的趋势。大剂量安神补脑液可使模型大鼠iNOS活力明显降低(P<0.05),褪黑素含量显著提高(P<0.05)。结论安神补脑液可拮抗睡眠剥夺大鼠脑内iNOS活力提高,并能增高松果体褪黑素的含量,提示安神补脑液可以改善睡眠障碍导致的脑功能改变。     

参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠血糖和学习记忆功能的影响

目的:探讨糖尿病性脑病病变机制,观察参乌胶囊对糖尿病复合脑缺血模型大鼠学习记忆功能的影响。方法:采用在大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(60mg/kg)引起糖尿病的基础上,再行双侧颈动脉缺血再灌手术建立糖尿病脑病动物模型。经参乌胶囊小剂量犤0.45g/(kg·d)犦、中剂量犤0.9g/(kg·d)犦和大剂量犤1.8g/(kg·d)犦灌胃治疗30d后,用Morris水迷宫实验对动物行为学进行评价。结果:糖尿病复合脑缺血模型大鼠到达站台游动时间比正常对照组增长63.4%;而参乌胶囊小剂量组较模型组动物缩短61.3%,参乌胶囊中剂量组较模型组动物缩短75.3%,差异均有显著性意义(F=3.71,P<0.01);参乌胶囊小剂量和中剂量组在明显改善认知功能和降低体内血糖水平的同时,也使其体质量明显降低,血糖分别降低为19.2%和15.1%,差异均有显著性意义(t=2.13,2.14,P<0.05)。结论:糖尿病复合脑缺血模型大鼠存在认知功能障碍;糖尿病脑病发生机制与体内血糖水平有关;参乌胶囊有改善糖尿病复合脑缺血模型大鼠的学习记忆功能和降低体内血糖水平的功能。     

嗅觉脑功能磁共振成像中提高磁敏感性脑区信噪比的参数优化研究

目的探讨人脑嗅觉fMRI实验中改变和优化层厚及回波时间(TE)参数对降低磁敏感性伪影和提高信噪比(SNR)的价值。方法10例健康志愿者,使用GESigna1.5TMR成像仪,标准正交头线圈。采用GRE-EPI序列分别对不同层厚(2、3、4、5、6mm)和固定层厚为6mm与2mm,同时改变不同回波时间(20、25、30、35、40、45、50、55、60ms)而进行脑功能成像扫描,以观察扫描参数的变化对图像信噪比(SNR)的影响。数据处理应用MATLAB5.3与AFNI软件。在额叶底部、右侧海马区及左枕叶划定感兴趣区(后者为对照),SNR值=兴趣区信号强度(SI)/颅外空间噪声标准差(SD)。结果①改变扫描层厚时,磁敏感性脑区额叶底部及海马区SNR值随层厚的增加呈明显下降趋势(r1=-0.994,P<0.01,r2=-0.999,P<0.01),而非磁敏感性脑区左枕叶区SNR值呈轻度上升趋势(无统计学意义)。②改变回波时间时,绝大多数被试磁敏感区(额叶底部与海马区)的SNR值在层厚为6mm时较层厚为2mm时明显下降;同时,当层厚为2mm时,SNR值随TE时间的延长呈轻度升高或无明显变化;当层厚为6mm时,SNR值随TE时间的延长而下降。结论在嗅觉fMRI实验中,可通过优化改变层厚与TE来降低磁敏感性伪影和提高SNR;层厚及TE对SNR的影响是相互影响、相互制约的,选择2mm层厚和TE30~40ms可获得理想的功能图像质量。     

胸腰椎脊索瘤的组织学研究和综合治疗

目的对胸腰椎脊索瘤的临床特点进行总结,初步探讨脊索瘤的病理特点和综合治疗手段.方法对胸腰椎肿瘤,根据WBB分期,进行椎体或全椎节切除.术后病理均提示脊索瘤.其中5例患者细胞基质中出现软骨样细胞.结果术后病理出现软骨样基质的患者未出现复发和远处转移;胸腰椎脊索瘤总体预后好于骶骨脊索瘤.结论胸腰椎脊索瘤术前不一定行血管栓塞.术中仔细处理节段性血管,手术中出血控制较满意.扩大切除脊索瘤后,短期效果较好.预后和病理分型有一定的关系.     

神经细胞黏附分子L1-Ig（1-4）的原核表达及其功能

目的：利用基因克隆、表达、纯化等分子生物学手段获取具有生物活性的神经细胞黏附分子L1（L1）的Ig（1-4）结构域融合蛋白。 方法：实验于2001-10／2004-12在解放军第二军医大学神经生物教研室完成。①从新生4d的SD大鼠的海马组织中提取总RNA，采用反转录-聚合酶链反应法获取L1-Ig（1-4）基因，进行序列分析后构建表达载体pET28a（＋）-LI-Ig（1-4）。②转染大肠杆菌BL21，用IPTG诱导L1-Ig（1-4）的表达。③利用Ni2＋-NTA柱纯化和复性。④用L1-Ig（1-4）融合蛋白观察培养脊髓原代神经元轴突生长情况及其活性，未加入融合蛋白的细胞做对照。 结果：①克隆出编码正确的大鼠L1-Ig（1-4）基因。②并在大肠杆菌中获得高效表达，表达产物占全菌总蛋白的28-3％。③Ni^2＋-NTA柱纯化后的纯度达90％以上。④加入融合蛋白后脊髓神经元突触的生长能力较未加入融合蛋白的细胞增强[（56&;#177;3．8），（43&;#177;2．7）μm，P〈0．01]。 结论：通过原核表达可大量获得L1-Ig（1-4）融合蛋白，该融合蛋白同样具有促神经生长的生物学活性。     

后路钉棒内固定系统在不稳定性枢椎骨折治疗中进钉点与固定方式的选择

背景:上颈椎后路钉棒内固定过程中,放置寰椎侧块螺钉技术是关键。目的:总结后路钉棒内固定系统在不稳定性枢椎骨折治疗中的进钉点位置。方法:2007-01/2010-12采用Vertex颈椎后路钉棒内固定系统治疗不稳定性枢椎骨折19例,男12例,女7例,年龄21~75岁,平均49.5岁。采用寰椎侧块螺钉及枢椎椎弓根螺钉内固定6例,寰椎侧块、单侧枢椎椎弓根及颈3侧块螺钉内固定3例,寰椎侧块、双侧枢椎椎弓根及颈3侧块螺钉内固定1例,枢椎椎弓根及颈3侧块螺钉内固定9例,内固定过程中均行后侧椎板间植骨融合。结果与结论:19例患者全部获得随访,随访时间7~43个月。患者骨折复位满意,骨折端均获得愈合,植骨部位融合率达到100%,未出现断钉、断棒等现象,未发生颈髓及椎动脉等医源性损伤。该方法治疗不稳定性枢椎骨折创伤小,固定可靠,作者根据临床经验,对螺钉进钉点的位置总结如下:①对于寰椎侧块进钉点选择在侧块中点稍偏外、椎弓的下方1/3处,进针方向为向内、上分别稍倾斜约10°,5°。②枢椎椎弓根进钉点选择在枢椎上下关节面间、下关节正中垂线的中点,进针方向为向内、上分别倾斜15°~20°,25°。③第三颈椎侧块进钉点选择在侧块中心点内侧2mm,进针方向为向外、上倾斜20°~25°。     

PPAR-γ激活对糖基化终末产物引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGF mRNA表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增殖体激活受体-γ(PPAR-γ)激活对糖基化终末产物(AGEs)引起的大鼠肾系膜细胞TGF-β及CTGF mRNA表达的影响.方法 体外培养正常大鼠肾系膜细胞,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测不同浓度AGEs(0～400 μg/ml-1)及不同浓度PPAP-γ)激活剂(罗格列酮)和PPAR-γ阻断剂(GW9662)对AGEs(100 μg/ml-1)引起的TGF-β及CTGF mRNA表达的影响.结果 给予PPAR-γ激活剂可明显减轻AGEs引起的大鼠系膜细胞TGF-β、CTGF mRNA的表达.结论 PPAR-γ激活剂可以明显减轻AGEs对系膜细胞TGF-β、CTGF mRNA的表达影响,从而改善肾小球细胞外基质积聚,在糖尿病时起到肾脏保护作用.     

胸椎骨肿瘤的手术治疗(附81例报告)

目的:探讨不同节段胸椎肿瘤前方手术入路、肿瘤切除术式、前路重建技术策略及预后。方法:总结我院1997年1月至2002年5月收治的81例胸椎骨肿瘤患者的临床资料。所有患者根据肿瘤的病理类型、部位及范围行全椎体切除、次全椎体切除、全脊椎切除、次全脊椎切除,前路植骨、内固定术,术后对恶性或恶性倾向的肿瘤行化疗或放疗。结果:术后随访2～6年,4例神经症状无改善,12例患者分别于术后6～24个月局部复发,其中4例患者分别于术后16～48个月因全身多处转移,全身衰竭死亡。其余患者术后疗效均较满意,术后神经功能改善。结论:肿瘤的性质、切除方式和术后的综合治疗对预后具有重要影响,应根据肿瘤的部位、范围选择相应的手术途径及肿瘤切除方式,前路植骨内固定有利于胸椎的重建和稳定。     

跨突触病毒示踪法研究大鼠C7神经根中枢神经系统支配回路组成

目的 研究假狂犬病病毒减毒株C7神经根注射后标记神经元在脑和脊髓的分布,为健侧C7神经根移位术后的脑功能重塑研究提供实验方法.方法 取SD大鼠20只,根据脊髓和脑组织取材时间随机分为4组:6 h、12 h、24 h和36 h,每组5只动物.在右侧C7神经根注射假狂犬病病毒液2 μl.动物存活6～36 h后,使用抗病毒的多克隆抗体,通过免疫组织化学方法检测相应脊髓节段(C1～C7)和脑中感染的阳性神经元.结果 病毒注射后6～36 h,脊髓和脑中的一些结构及区域可见阳性标记细胞,主要分布在C1～C7节段脊髓灰质、外侧类巨细胞网状核、A5细胞、红核,第一、二运动皮质,第一、二感觉皮质等.随着动物存活时间的延长,脊髓和脑中被标记神经元的数目也明显增多.结论 本跨突触病毒示踪研究发现上述标记的脊髓和脑组织结构与C7神经根存在直接或(和)间接突触联系,可能直接或间接参与对C7神经根的神经支配和调节.     

甲氨蝶呤与重组人肿瘤坏死因子对软骨肉瘤的作用机制

目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)、重组人肿瘤坏死因子(rhTNF)对软骨肉瘤的抑制作用及机制.方法 采用裸鼠软骨肉瘤细胞株皮下接种模型,将实验动物随机分为四组:rhTNF组(n=8),rhTNF+MTX组(n=8),MTX组(n=8),空白对照组(n=6),分别注射rhTNF和(或)MTX.观察肿瘤的形成,记录肿瘤体积、瘤重,计算抑瘤率,通过HE染色观察肿瘤的组织学变化,应用免疫组织化学法检测瘤组织中bcl-2、bax、血管内皮生长因子(VEGF)等的表达及细胞凋亡情况.结果 rhTNF、rhTNF+MTX组肿瘤重量和体积小于MTX组、空白对照组(P＜0.05),MTX组肿瘤重量与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);rhTNF、rhTNF+MTX、MTX三组肿瘤中bcl-2表达低于空白对照组、bax表达高于空白对照组(P＜0.05);rhTNF、rhTNF+MTX组中VEGF的表达低于MTX、空白对照组(P＜0.05),上述指标在rhTNF、rhTNF+MTX组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 rhTNF能显著抑制荷瘤小鼠体内软骨肉瘤的生长,MTX对体内软骨肉瘤的抑制作用不明显,联合应用可增强rhTNF的抑瘤效应,其机制可能与下调bcl-2及VEGF、上调bax的表达水半有关.