Transforming Growth Factor-β_2 Gene Cloning and Protein Expression in Human Trabecular Meshwork Cells

Primary open- angle glaucoma (POAG) is aleading cause of blindness,which involves optic neu-ropathy accompanied by characteristic visual field de-fects and is often associated with elevated intraocularpressure due to disturbance ofaqueoushumor outflowthrough the trabecularmeshwork (TM) .The patho-physiology of the TM in POAG has been character-ized by an increasein extracellularmatrix componentsand a decrease in the number of TM cells[1,2 ] .It hasbeen found that,compared with the non- P…     

白细胞对碱性成纤维细胞生长因子诱导角膜新生血管的作用

目的探讨白细胞浸润对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的角膜新生血管形成(CNV)的作用.方法将不同剂量的 bFGFHydron缓释小丸植入兔角膜基质层诱发CNV,并作组织病理学定量观察.结果空白对照组及bFGF500ng组的角膜组织 中仅少量白细胞浸润,二者无显著性差异(P＞0.05).bFGF1000ng组存在明显的白细胞浸润,与前二者有极显著性差异(P＜ 0.001).结论白细胞对bFGF诱导CNV可能起间接刺激作用.     

Apoptosis of Human Trabecular Meshwork Cells Induced by Transforming Growth Factor-β2 in vitro

Agraduallossofcellsoccurswithinthehumantrabecularmeshwork (TM )duringnormalagingandappearstobeincreasedinthepatientswithprimaryopenangleglaucoma (POAG) ,whichhasbeensug gestedtobeassociatedwith pathogenesisofPOAG[1,2 ].Ithasbeenfoundthat,comparedwiththeno…     

Tranilast抑制TGF-β2对人眼小梁细胞胶原合成的促进作用

目的 :观察tranilast对转化生长因子 -β2 (Transforminggwowthfactor -β2 ,TGF -β2 )促进体外培养人眼小梁细胞胶原合成作用的影响。方法 :采用3 H -脯氨酸掺入及液体闪烁测量技术观察 0 μg·ml-1(对照组 )、 12 5 μg·ml-1、 2 5 μg·ml-1和 5 0 μg·ml-1tranilast对3 2ng·ml-1TGF -β2 促进体外培养人眼小梁细胞胶原合成作用的影响。结果 :12 5 μg·ml-1(q′ =4 2 6,P <0 0 5 )tranilast处理组3 H -脯氨酸掺入量为 62 0 3 3± 80 46,与对照组的 817 3 7± 12 4 2 1比较有显著差异 ;2 5 μg·ml-1(q′ =4 81,P <0 0 1)和 5 0 μg·ml-1(q′ =8 62 ,P <0 0 1)tranilast处理组3 H -脯氨酸掺入量为5 94 5 8± 88 13、 418 64± 67 90 ,与对照组比较有极显著差异 ;同时 ,3 H -脯氨酸掺入量随tranilast浓度增加而减少 ,呈现明显的量效关系。结论 :Tranilast明显抑制TGF -β2 对体外培养人眼小梁细胞胶原合成的促进作用。利用tranilast防治原发开角型青光眼的可能性值得作进一步研究。     

Tranilast对TGF-β2抑制人眼小梁细胞生长作用的影响

目的 :观察tranilast对转化生长因子 β2 (transform inggrowthfactor β2 ,TGF β2 )抑制体外培养人眼小梁细胞生长作用的影响。方法 :采用MTT法观察 0 μg/ml、12 .5 μg/ml、2 5μg/ml和 5 0 μg/mltranilast对 3.2ng/mlTGF β2 抑制体外培养人眼小梁细胞生长作用的影响。结果 :2 5 μg/ml和 5 0 μg/ml收稿日期 :2 0 0 2 -0 3 -2 7;修回日期 :2 0 0 2 -0 4-15基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (3 8970 75 8)。作者简介 :曹阳 (1972 -) ,男 ,湖北武汉人 ,医学博士 ,主治医师 ,研究方向 :青光眼。通信作者 :曹阳 (E -mail:ytsao @sohu .com)。tranilast处理组人眼小梁细胞的光密度A值分别为 (1.136±0 .135 )和 (1.2 4 6± 0 .15 2 ) ,与对照组的 (0 .896± 0 .190 )比较 ,差异分别有显著性 (q =3.2 3,P <0 .0 5 )和非常显著性 (q =4 .70 ,P <0 .0 1)。结论 :Tranilast可明显拮抗TGF β2 对体外培养人眼小梁细胞抑制生长的作用。利用Tranilast在发病学环节防治原发性开角型青光眼的可能性 ,值得进一步研究     

庆大霉素对牛眼睫状体色素上皮细胞的毒性研究

为了探索庆大霉素对睫状体色素上皮细胞（Pigmented ciliary epithelial,PCE)的毒性作用，在体外培养了牛眼睫状体色素上皮细胞，并加入125、250、500、1000、2000μg/ml的庆大霉素，观察加药后第3、6、12、24、48h的细胞生长、形态结构、计算第48h细胞死亡率。结果发现低于250μg/ml的庆大霉素对PCE细胞无任何影响。500μg/ml的庆大霉素作用24h后开始出现细胞间隙增宽、细胞皱缩等中毒反应，48h后有7．6％的细胞中毒死亡。提示：庆大霉素对牛眼PCE细胞的安全浓度是250μg/ml的庆大霉素可使细胞皱缩、变圆、死亡。     

晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT-PCR反应条件的研究

目的探讨晶状体上皮细胞mRNA定量分析中内部参照标准β-肌动蛋白RT—PC反应条件。方法从培养的人晶状体上皮细胞中提取mRNA,应用设计的引物RT—PCR检测β-肌动蛋白,电泳分析53．2℃、53.9℃、55℃、56．2℃、57．4℃、58．6℃、59．8℃、60℃、62℃、62．7℃不同的退火温度的扩增产物。结果各退火温度条件下,β—actin扩增产物均形成长度为302bp片段,且未见非特异性扩增产物条带。退火温度为58．6℃时,β—actin扩增产物的条带最清晰。结论采用本实验中所设计的引物联合58．6℃退火温度等实验条件所扩增的长度为302bp片段,清晰稳定,是晶状体上皮细胞mRNA定量分析中良好的内部参照标准。     

体外培养人眼小梁细胞表达转化生长因子-β_2

目的 :了解体外培养人眼小梁细胞是否会表达转化生长因子 β2 (Transforminggrowthfactor β2 ,TGF β2 ) ,以确定TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关。方法 :一步法提取体外培养人眼的小梁细胞RNA ,利用RT PCR检测TGF β2 的mRNA ,用双链测序鉴定PCR产物 ,并用免疫组化SUPERVISION法检测TGF β2 蛋白的表达。结果 :RT PCR扩增得到的单一产物 ,其序列与己知序列完全一致。TGF β2 免疫组化染色呈阳性。结论 :小梁细胞自身产生的TGF β2 ,是小梁网局部微环境和房水中TGF β2 的来源之一 ;TGF β2 不仅通过旁分泌方式 ,也可通过自分泌方式作用于小梁细胞。小梁细胞产生TGF β2 的异常变化是否与原发性开角型青光眼发病有关 ,值得进一步研究。     

抑制黏附分子作用对防止眼增生性病变发生的意义

干扰黏附分子介导的细胞与细胞外基质的联系,可能阻止增生性病变的发展。已有报道利用含去整合素的蛇毒,可在兔眼中防止牵引性视网膜脱离的发生。人工合成的精氨酸－甘氨酸－天冬氨酸（RGD）类药物,可与细胞外基质中含不溶性RGD的蛋白质竞争结合结膜下成纤维细胞的整合素,可降低成纤维细胞与细胞外基质的黏附,减弱兔滤过术后伤口愈合反应,延长滤过泡存在的时间。     

蛇毒制剂对兔眼滤过术的影响

目的评价蛇毒制剂在兔眼滤过术后抗瘢痕形成的效果和眼毒性.方法对10只兔双眼行巩膜全层咬切术,术后实验组球结膜下注射5×10-2U/ml的蛇毒制剂0.5ml,对照组注射等量生理盐水,裂隙灯观察眼前段.术后第21天,用鼠尾胶原作为房水外流示踪剂行前房恒压灌注及原位固定,对手术区组织行功能及组织形态学检查.结果术后14,21天,实验组有5眼、3眼可见滤过泡,对照组无1眼有滤过泡.滤过泡消失眼的滤过口被瘢痕组织封闭,手术区结膜下纤维组织明显增生.有滤过泡眼的滤过口仍显开放,房水示踪剂经此开口流入滤过泡.结论蛇毒制剂能抑制兔眼滤过术后结膜下过分瘢痕化,延长滤过泡的存在时间和功能,其眼毒性不明显.