长链非编码RNA LINC01410对B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01410对B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用Cox回归模型筛选GEO数据集(GSE10846)中与B-NHL预后相关的LncRNA.将体外培养B-NHL细胞系Raji和Ramos,随机分为慢病毒对照组、LINC01410敲低组、多柔比星...     

发色底物法测定注射用降纤酶中类凝血酶的含量

目的建立发色底物法测定注射用降纤酶类凝血酶的方法。方法以Be-Phe-Val-Arg-PNA为发色底物,检测波长405nm。结果降纤酶在2～10单位/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.9993(n=5)。结论本法简便,准确,专属性强,适用于产品的质量控制。     

广西眼镜蛇毒细胞毒素的分离及对人鼻咽癌等细胞抑制作用的研究

目的探讨广西眼镜蛇毒细胞毒素对人鼻咽癌细胞(CNE)等多种癌细胞株的抑制作用.方法经Sephadex G-50,CM-Sepharose CL-6B层析法从广西眼镜蛇毒中分离纯化获得细胞毒素(CTX),采用MTT检测CTX 对癌细胞株体外培养抑制作用,探索量效时效关系.结果从广西眼镜蛇毒中分离到一种细胞毒素单一组分(CTX CM-5)对体外培养的人鼻咽癌细胞株(CNE)、淋巴瘤细胞株(YAC)、人宫颈癌细胞株(HELA)和卵巢癌细胞株(Ho8990)的抑制有明显的剂量依赖关系,作用48 h的IC50分别为1.84,0.75,1.84和2.59 mg·L-1;随作用时间的延长,CTX CM-5对CNE细胞株作用最为明显,作用3h和24 h的IC50分别为4.78和1.04 mg·L-1.结论 CTX CM-5对体外培养的癌细胞株有较强的抑制作用.     

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤维蛋白溶解酶对动物凝血功能的影响

目的：探讨尖吻蝮蛇毒无出血活性纤维蛋白溶解酶(Non—hemonrrhagic fibrinolytic enzyme，NHFLE)对动物凝血功能的影响。方法：用动物体内外实验方法观察NHFLE对富血小板血浆中经ADP诱导的血小板聚集的影响及NHFLE对凝血功能的影响。结果：NHFLE能明显延长全血凝固时间、活化的部分凝血酶原时间、凝血酶时间和凝血酶原时间，产生抗凝作用。动物体内注射NHFLE后血浆纤维蛋白原含量降低，优球蛋白的溶解时间缩短。结论：尖吻蝮蛇毒NHFLE对动物的凝血功能有影响，具有明显的抗凝作用。     

细胞实验检测蓖麻蚕蛹生物反应器表达的重组人表皮生长因子的生物学活性

目的探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性。方法采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性。结果 Tricine-SDS-PAGE、Western blot结果显示,蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF具有正确的分子量和免疫原性;MTT法显示,纯化的rhEGF具有酶促活性,且酶促活性优于rhEGF标准蛋白(P<0.05),其最高活性浓度为1.0μg/L,在0.0625～1.0μg/L浓度范围内具有剂量依赖性;rhEGF能够促进Balb/c3T3细胞的分裂增殖,效果优于rhEGF标准蛋白(P<0.05)。结论 AnpehEGF感染的蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF,具有类似天然hEGF的生物学活性,且效果优于rhEGF标准蛋白;rhEGF的细胞实验为进一步的动物实验提供了基础。     

牡蛎酶解液的抗氧化活性研究

目的探讨牡蛎酶解液的抗氧化活性。方法用普鲁士蓝反应法测定牡蛎酶解液还原能力,在DPPH体系、Fenton体系和邻苯三酚自氧化体系中分别检测牡蛎酶解液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH.)、羟基自由基(.OH)和超氧阴离子(O2-.)的能力,并考察牡蛎酶解液在Fe2 诱发卵黄脂蛋白过不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系中的抗氧化作用。结果牡蛎酶解液清除DPPH.和.OH的EC50分别为7.313和1.330 mg/ml;牡蛎酶解液(17.800 mg/ml)对超氧自由基和卵黄脂蛋白脂质过氧化的抑制率分别为19.86%和82.97%。结论牡蛎酶解液具有显著的清除DPPH.和.OH作用,且活性与剂量呈正相关,并对卵黄脂蛋白脂质过氧化也显示出了较强的抑制作用。     

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤溶酶对大鼠的长期毒性试验

目的:研究无出血活性纤溶酶(Non-hemorrhagic fibrinolytic enzyme,NHFLE)对大鼠的长期毒性,评价其安全性.方法:健康Wistar大鼠随机分为低、中、高剂量(2.25,4.5,9.0 mg·kg-1·d-1)组及生理氯化钠注射液对照组,每组24只.尾静脉注射给药,每周给药7 d,连续给药4周,给药容积为10 mL·kg-1.停药后24 h每组处死12只动物,余下动物继续观察2周后活杀检查.观察动物一般性状、体重、饮食等,检测血液学、凝血、血液生化、脏器系数及组织病理学改变.结果:NHFLE高剂量组大鼠在4周给药期出现多动、烦躁不安、轻微腹泻以及体重增长缓慢,以上改变在停药后恢复正常,其余动物各项检查未见异常.结论:NHFLE毒性较低.     

尖吻蝮蛇毒纤溶酶的柱层析分离

应用Sephadex G100、DEAE-Sepharose CL6B、Sephadex G75柱层析分离方法,对尖吻蝮蛇毒进行分离。实验表明,采用上述3种柱层析分离得到的纤溶酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫电泳上为一条区带的单一蛋白。     

广西尖吻蝮蛇毒K组分抗血管生成活性研究

目的探讨广西尖吻蝮蛇毒小分子多肽组分（K组分）对血管生成的抑制作用。方法采用噻唑蓝法检测K组分对培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304的生长抑制情况,结晶紫法测定K组分对ECV304细胞的黏附抑制作用,鸡胚尿囊实验观察K组分对血管生成的影响。结果K组分对人脐静脉内皮细胞株ECV304的增殖有抑制作用并呈明显的时 效及量 效关系,能够抑制ECV304细胞与纤维连接蛋白的黏附和鸡胚尿囊血管生成。结论广西尖吻蝮蛇毒K组分对血管生成有抑制作用。