EF延缓HPAT轴衰老的基因表达谱研究

目的：淫羊藿总黄酮(EF)延缓下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴衰老的分子机制。方法：利用基因芯片技术，分别检测淫羊藿总黄酮组、右归饮组、桃红四物汤组、老年大鼠对照组及青年大鼠对照组下丘脑、垂体、肾上腺、脾脏淋巴细胞的基因表达谱。结果：老年大鼠和青年大鼠相比，HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达下调；EF组HPAT轴多种神经递质、激素、细胞因子或其受体表达上调；右归饮组及桃红四物汤组未见广泛的调节作用。结论：老年大鼠HPAT轴与生长、发育、衰老相关的基因表达以衰退的表现为主；EF能上调神经递质受体的表达并通过NEI网络的下行通路激活神经内分泌和免疫系统；通过下调促凋亡、抗增殖基因，上调抗凋亡、促增殖基因的表达，重塑淋巴细胞基因表达的平衡，延缓免疫衰老。     

Murex丙型肝炎病毒血清分型试验的初步应用与评价

目的　探讨Murex丙型肝炎病毒 (HCV)血清分型试验的可靠性与实用性。方法　采用MurexHCV 1～ 6血清分型试剂 ,ELISA技术检测针对HCV非结构区 (NS4区 )的特异性抗体 ,对4 4例抗 HCV阳性的HCV感染者血清标本进行HCV血清分型 ,并比较与基因分型结果的符合程度。结果　 4 4例中有 35例 (79 5 % )获得血清学分型结果 ,其中 1型 2 7例 (77 1 % ) ,2型 7例 (2 0 0 % ) ,1 2型 1例 (2 9% )。血清型与基因型符合率为 96 8%。结论　MurexHCV血清学分型试验结果可靠 ,简便易行 ,具有一定的临床应用价值     

住院患者HBV血清标志物筛查70 582例结果回顾性分析

目的分析近6年来HBV血清标志物检出率变化情况.方法收集3家大型医院2003-2008年6年间排除肝炎及相关病区共70 582例住院患者.采用AxSYM微粒子酶免疫分析技术检测HBV血清标志物5项,包括HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs结果及相关资料,并将每例5项标志物结果作为一种模式,对各项标志物及模式检出率逐年变化情况进行回顾性分析.结果 HBV血清标志物5项检出率由高到低依次为抗-HBc(55.17%)、抗-HBs(49.57%)、抗-HBe(28.42%)、HBsAg(8.92%)、HBeAg(2.12%),且6年来均呈逐渐下降趋势.HBsAg由2003年的9.30%降至2008年8.70%,1992年以后出生人群HBsAg检出率(2.28%)明显低于总人群检出率(8.92%),且逐年下降趋势明显,从2003年的3.57%降至2008年1.85%.每项标志物检出率男性(HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs检出率依次为12.38%、2.72%、56.57%、41.50%、65.48%)均高于女性(HBsAg、HBeAg、抗-HBc、抗-HBe和抗-HBs检出率依次为7.25%、1.58%、53.43%、28.35%、50.00%),差异有统计学意义(x2值分别为509.74、105.78、69.66、1 321.61、1 726.91,P均＜0.01).在70 582例患者中,5项HBV血清标志物结果可归纳为26种模式,检出率≥1%的模式有8种,"全阴性"模式占第一位,6年间无明显变化.近6年来,人群不同年龄段不同检测模式检测结果不同,≤20岁人群以"全阴性"和"抗-HBs单独阳性"模式为主,＞20岁人群以"抗-HBc和(或)抗-HBe、抗-HBs阳性"等模式为主."HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性"和"HBsAg、抗-HBc、抗-HBe阳性"等模式检出率呈两端低、中间高分布,20～70岁人群检出率高.结论近6年HBV血清标志物检出率呈缓慢下降趋势,低龄人群HBsAg检出率明显下降.总人群HBV感染率依然较高,不断改进HBV血清筛查技术对于降低HBV感染率十分重要.     

DNA芯片快速检测结核分枝杆菌利福平耐药rpoB基因突变

目的建立快速检测结核分枝杆菌利福平（RFP）耐药rpoB基因突变的DNA芯片。方法从34株临床痰样本中提取结核分枝杆菌的基因组DNA，采用聚合酶链反应（PCR）扩增含有rpoB基因突变位点的特异DNA片段，荧光标记后与芯片上含有特异突变位点的寡核苷酸探针进行杂交，同时与DNA测序法比较。结果用DNA芯片检测出19株耐药株和15株敏感株，且结果与DNA测序相同，准确率可达88．2％，敏感性为78．9％，特异性为100．0％。结论DNA芯片快速检测结核分枝杆菌对RFP的耐药rpoB基因突变是一种操作简便、准确性、敏感性和特异性较高，且易于开展的方法。     

化学发光免疫分析法与梅毒螺旋体明胶凝集试验检测梅毒螺旋体特异性抗体的比较

梅毒实验室诊断目前主要依靠血清学试验,国内大部分实验室开展的梅毒螺旋体特异性试验主要以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)为主.而近20年快速发展的化学发光免疫分析法(CLIA)已广泛应用于各领域,但在梅毒的实验室诊断中的临床应用较少.为此,我们与本市3家实验室,对CLIA法检测梅毒螺旋体抗体结果进行了比对分析,现报告如下.     

白细胞VCS参数在血液细菌感染中的应用研究

目的 研究白细胞VCS参数在血液细菌感染中的临床应用.方法 采用Coulter LH 750血细胞分析仪检测120例血液细菌感染患者、69例非感染性发热患者、67名健康对照者的中性粒细胞和淋巴细胞的VCS参数,包括中性粒细胞平均体积(MNV)、中性粒细胞体积分布宽度(NDW)、中性粒细胞平均传导率(MNC)、中性粒细胞平均散射值(MNS);淋巴细胞平均体积(MLV)、淋巴细胞体积分布宽度(LDW)、淋巴细胞平均传导率(MLC)、淋巴细胞平均散射值(MLS).将血液细菌感染组根据白细胞总数分为WBC≤10×109/L组和＞10×109/L组;根据中性粒细胞比例分为≥85%组和＜85%组;根据细菌染色分为革兰阳性细菌感染组和革兰阴性细菌感染组.结果 血液细菌感染组的MNV、NDW、MNS、MLV、LDW、MLC、MLS分别为156 ±15、23.31±3.72、137±7、87±12、17.50±3.38、110±5、69±12;非感染性发热组分别为151±8、21.33 ±2.62、132±10、91±4、15.78±1.96、117±4、62±6;健康对照组分别为145±5、18.43±0.93、143±4、84±2、13.30 ±0.76、108±1、62±2;上述各指标在3组间差异均有统计学意义(F值分别为19.295、26.272、32.767、6.226、31.016、23.739、12.662,P＜0.05或＜0.01).WBC≤10×109/L组MNV和NDW分别为152±16、22.19±3.45,WBC＞10×109/L组分别为159±12、25.29±3.43,与健康对照组比较,3组间差异有统计学意义(F值分别为21.575、40.856,P＜0.01).中性粒细胞百分率≥85%组的MNV、NDW分别为159±12、24.88 ±3.74,中性粒细胞百分率＜85%组分别为151±16、21.68±2.29,与健康对照组比较,3组间差异有统计学意义(F值分别为23.76、43.22,P＜0.01).革兰阴性细菌感染组的MNV和NDW分别为157±15、24.25±3.39,革兰阳性细菌感染组分别为153 ±14、21.51±3.78,与健康对照组3组间比较,差异有统计学意义(F值分别为18.74、37.47,P＜0.01).在血液细菌感染诊断中,当NDW的临界值(cut-off值)取20.50时,敏感度为76.7%,特异度为98.3%.结论 VCS参数能反映血液细菌感染时白细胞的形态学变化,其中NDW参数能更加灵敏、特异地反映血液细菌感染.     

596例呼吸道异物患儿围术期健康教育

通过对596例呼吸道异物患儿围术期进行健康教育,根据围术期分期护理要求和患者教育需求多样性、阶段性的特点,建立全程分期教育模式。主要包括入院阶段健康教育,术前健康教育中的护理评估,心理护理,病情观察指导,禁令指导和用药指导;术后健康教育中的体位指导,饮食指导,拍背方法指导,术后3d持续治疗的重要性指导,以及出院健康教育指导。认为针对不同年龄段孩子特点及家长的文化层次有针对性地进行健康教育,对治疗及预防呼吸道异物具有重要意义。     

杭州市2013~2014年流感暴发流行期甲型流感病毒H3N2亚型基因特性分析

目的分析杭州2013~2014年冬春季流感暴发期间流行的甲型流感病毒H3N2亚型的分子特性。方法选取H3N2阳性标本提取病毒RNA,PCR扩增全基因组并测序,构建血凝素(HA)及神经氨酸酶(NA)分子进化树,对H3N2亚型的病毒进化进行分析。结果 6个代表株中H3N2未发生片段间的重配。以WHO推荐流感疫苗株A/TEXAS/50/2012为参考,HA1蛋白主要抗原决定区发生N145S氨基酸替换,并有其他多个位点的突变。病毒基质蛋白(M2)的金刚烷胺耐药位点全为S31N,神经氨酸酶抑制剂耐药位点未发生突变。结论 H3N2亚型甲型流感病毒HA1蛋白的氨基酸变异与2013~2014年杭州地区暴发流行有关。另外,病毒已出现对金刚烷胺的耐药突变,而对神经氨酸酶未发生耐药突变。     

标本保存温度、时间和不同采血管对核酸检测结果的影响

目的验证不同真空采血管、保存温度、时间等对核酸检测(NAT)结果的影响,为NAT检测的采血管选取、过程控制、检测策略等提供数据支持。方法进行3个试验:1)标本保存温度、离心前保存时间及采血管对NAT联检试验结果的影响:将含HIV-1(150 IU/ml)或HCV(60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存温度分为30℃组、4℃组,之后依据标本离心前的保存时间不同分为4 h,6 h,8 h,10 h,12 h,24 h组,再依据采血管生产厂家不同分为A、B、C组,对所有标本进行NAT联检试验,利用卡方统计分析各因素对NAT联检试验结果的影响;2)标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响:将含HIV-1(150 IU/ml)或HCV(60 IU/ml)或HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本按照保存时间不同分为0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d组,再依据采血管不同分为采血管A、B、C组,对所有标本进行NAT鉴别试验,利用卡方统计分析标本保存时间、采血管对NAT鉴别试验结果的影响;3)保存时间对HCV阳性标本NAT定量结果的影响:选取9份浓度范围在1.04×102IU/ml～4.86×103IU/ml之间的弱阳性标本,依据标本在4℃保存时间的长短不同,分为0 d、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d组,进行定量HCVRNA检测,分析4℃保存条件下保存时间对血浆中HCV RNA浓度的影响。结果试验1:对于全血标本,4℃或30℃的保存温度,4～24 h的离心前保存时间以及采用不同的采血管对弱阳性标本NAT检出率的影响差异均无统计学意义(P>0.05)。试验2:在4℃保存条件下,采用A采血管保存含HIV-1(150 IU/ml)的弱阳性标本0～7 d,保存后d 3,d 4、d 5、d 6、d 7弱阳性标本的NAT检出率与0 d相比,差异具有统计学意义(P<0.01);采用B采血管保存含HBV(50 IU/ml)的弱阳性标本0～7 d,保存后d 3和d 7此标本的NAT检出率与保存前相比差异有统计学意义(P<0.01);其余各组标本的NAT检出率与保存前相比差异没有统计学意义;试验3:9份HCV弱阳性标本的浓度7 d内没有出现明显变化。变化范围均在0.56log之内,且有相同的变化趋势,即在4℃保存2 d后,其浓度开始下降。结论采用Procleix Ultrio Assay和Procleix Ultrio Discriminatory Assay分析系统,在不超过30℃的采血环境中,NAT标本采集后可以在24 h内离心处理;为提高鉴别阳性率,建议4℃保存的献血者标本在NAT联检阳性后2d内完成NAT鉴别检测。