枸杞果柄对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响

目的 探讨枸杞果柄水煎剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响.方法 制备四氧嘧啶糖尿病小鼠模型,将其分为降糖灵治疗组、低剂量枸杞果柄治疗组、高剂量枸杞果柄治疗组、模型对照组,另设正常对照组(非糖尿病小鼠).前3组小鼠分别以25 mg·kg-1·d-1降糖灵水溶液、5.0 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎剂、7.5 g·kg-1·d-1枸杞果柄水煎剂灌胃,后2组小鼠均灌服等量的生理盐水.14 d后测定小鼠空腹血糖.结果 给药14 d后降糖灵治疗组、低剂量枸杞果柄治疗组小鼠血糖较治疗前有极显著下降(P<0.01),高剂量枸杞果柄治疗组小鼠血糖较治疗前有显著下降(P<0.05);降糖灵治疗组、不同剂量枸杞果柄治疗组血糖降低平均值与模型对照组、正常对照组血糖变化平均值之间均存在极显著差异(P<0.01).结论 一定剂量的枸杞果柄水煎剂对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖有降低作用.     

肝硬化门静脉高压症外科治疗程序

肝硬化门静脉高压症的传统外科治疗主要是针对其最严重的并发症--食管胃底静脉曲张破裂出血。目前达成的共识是急性大出血以非手术治疗为主,如药物、内镜和三腔二囊管等;出血无法控制如果肝功能Child-Pugh分级A/B级者则可急诊手术,只要病人存在门静脉向肝血流,术式以断流术为主,如果Child-Pugh分级C级者可行经颈内静脉肝内门体分流术（TIPS）治疗。病人首次出血控制后预防再出血大多需要外科治疗。术前需明确病因,评估肝脏储备功能、门静脉高压症程度、肝脏和门静脉系统血流动力学状况等。传统外科手术方式主要为断流术、分流术和联合手术等。我们强调术式选择须依据门静脉系统血流动力学状况,各种术式均有明确的血流动力学状况的适应证。门静脉高压症出血病人中只有肝功能Child-Pugh分级C级经内科治疗无法改善者（终末期肝病）适合行肝移植。     

手助腹腔镜根治性膀胱切除术(附31例报告)

目的 探讨手助腹腔镜根治性膀胱切除术的临床应用价值.方法 采用手助腹腔镜行根治性膀胱切除术31例,其中利用手助操作通道的切口行回肠膀胱术24例,原位回肠新膀胱术7例;并观察围手术期的恢复情况及近期疗效.结果 31例手助腹腔镜下根治性膀胱切除均获成功,手术时间245～530 min,平均365.7 min;出血量100～500 ml,平均250.9 ml.其中3例需输血,输血率为9.7%.术后进食时间为2～15 d,平均4.3 d.住院时间平均19.7 d(9～83 d).术后6例发生围手术期并发症,占19.4%.31例患者均获随访,平均18个月(1～38个月),2例回肠膀胱切口疝,1例输尿管新膀胱吻合口狭窄.肺部转移及局部复发并全身转移各1例,带瘤生存.肿瘤转移死亡1例,猝死1例.其余27例无瘤存活.结论 手助腹腔镜根治性膀胱切除术是安全、可行的,尤其在复杂的根治性膀胱切除术中可以减少手术出血,降低手术难度,有效防止并发症的发生.     

三氧化二砷诱导肝癌Bel-7402细胞凋亡与线粒体跨膜电位关系的研究

目的研究三氧化二砷（As2O3）诱导人肝癌细胞系Bel-7402细胞凋亡及与线粒体跨膜电位的关系。方法应用不同浓度的As2O3作用于肝癌细胞后，观察As2O3对肝癌细胞生长状态的影响；通过噻唑蓝（MTT）比色法观察其对Bel-7402细胞增殖的影响；利用共聚焦显微镜及流式细胞术观察经Annexin V-FITC／PI双染后的细胞早期凋亡；通过共聚焦显微镜及流式细胞仪检测线粒体跨膜电位（MMP）的改变情况；并通过底物染色法反映Caspase-3的活性。结果不同浓度的As2O3作用于肝癌细胞后有明显的时间和剂量依赖性；经Annexin V-FITC／PI双染后，可观察到Bel-7402细胞的早期凋亡现象，2μmol／L As2O3作用24h细胞凋亡率为9．89％，作用48h细胞凋亡率为48．53％，而4μmol／L As2O3作用24h细胞凋亡率为18．27％，作用48h细胞凋亡率为67．52％；经As2O3药物作用后，细胞线粒体膜电位水平下降，且与药物作用时间和药物浓度有关（P〈0．05）；同时Caspase-3活性被激活。结论As2O3可明显抑制肝癌细胞Bel-7402的生长，并使细胞线粒体膜电位下降，诱导肝癌细胞凋亡。     

腺病毒介导的LacZ基因靶向性导入脊髓及示踪周围神经的动态过程

目的由损伤的周围神经靶向性导入腺病毒介导的LacZ基因(AdLacZ)至脊髓，动态观察病毒裁体逆行输送到脊髓前角运动神经元、脊髓后根神经节(dorsal root ganglia，DRGs)感觉神经元及基因产物顺行标记周围神经的全过程和特点。方法分别将AdLacZ转染大鼠正中神经和胫神经近断端，然后以10-0无创线吻合神经。在转染后9周内的24个不同时间点取出正中神经组的C5～T1脊髓节段、DRGs连同臂丛，胫神经组的L2～L6脊髓节段、DRGs连同骶丛。将脊髓和DRGs的50μm横切片行X—gal染色和免疫组织化学染色，臂丛和骶丛的整个标本分别行X—gal染色。计数阳性脊髓前角运动神经元、DRGs神经元及周围神经轴突数，研究转基因表达在脊髓前角运动神经元、DRGs神经元及正中神经、胫神经的最早时间、高峰时间和持续时间。结果LacZ基因能特异性、高效表达在损伤周围神经的感觉和运动神经元。转基因在脊髓和周围神经的表达严格限于感染神经的同侧。正中神经组标本各部位的转基因表达均早于胫神经组。胫神经组被标记的运动神经元和感觉神经元数均高于正中神经组。表达持续的时间在运动神经元最短，然后是感觉神经元，在周围神经持续时间最长。在同一组内，转基因表达在DRGs神经元最早．然后是运动神经元，最后是周围神经干，而且被标记的感觉神经元数多于运动神经元数。结论由损伤的周围神经导入的AdLacZ不但在靶神经元高效特异性表达，而且能高效顺行标记神经元突起、周围神经直至吻合口远端的再生轴突。这对周围神经损伤的基因治疗和神经示踪研究有实用价值。     

组织转谷氨酰胺酶特异性抑制剂预防肝纤维化的实验研究

Objective To observe the effects of cystamine, a tissue transglutaminase (tTG) inhibitor, on the development of rat liver fibrosis induced by carbon tetrachloride. Methods One hundred male SD rats were randomly divided into control group (n=20), hepatic fibrosis group (n=40) and cystamine group (n=40) . Liver fibrosis model was induced by intraperitoneal injection of carbon tetrachloride. Cystamine (112 mg·kg-1·d-1) was administered by intraperitoneal injection 2 days before injection of carbon tetrachloride. The rats were sacrificed at weeks 4 and 8, and the liver tissues and serum specimens were obtained. The mRNA expression of tTG, smooth muscle-alpha (α-SMA), collagen-Ⅰ and tissue inhibitors of metalloproteinase-1 (TIMP-1) were detected by real time PCR. The protein expression of tTG and α-SMA, liver function and content of hydroxyproline in liver tissues were determined by Western blot. Histological changes of the liver was observed under microscope. The fibrosis conditions of rat liver in each group were evaluated according to the semi-quantita-tive scoring system. All the data were analyzed by one-way ANOVA. Results Eight weeks after the injection of carbon tetrachloride, obvious injury of the liver in liver fibrosis group was observed. The levels of alanine trans-aminase (ALT), total bile acid, total bilirubin, hydroxyproline, tTG, α-SMA, collagen-Ⅰ and TIMP-1 were (1313±157)U/L, (99.9±18.5)μmol/L, (10.9±1.6)μmoL/L, (55±12)μg/g, 145.6±51.2, 130.3±44.6, 211.3±75.1 and 162.4±53.5. After administration of cystamine, the levels of ALT, total bile acid, total bilirubin, hydroxyproline, tTG, α-SMA, collagen-Ⅰ and TIMP-1 were (378±87) U/L, (61.0±12.7) μmol/L, (9.8±1.7) μmol/L, (70±14 ) μg/g, 48.6±12.3, 40.7±12.3, 63.9±16.0, 59.2μ23.4. Conclusion Cystamine can alleviate the carbon tetrachloride-induced rat liver fibrosis by inhibiting the tTG pathway.     

胰腺癌血清肿瘤标记物联合检测的临床研究

目的：观察胰腺癌患者血清肿瘤标记物的表达,寻找对胰腺癌诊断与随访的有价值血清肿瘤标记物。方法：采用免疫分析法和放射免疫法检测92例胰腺癌患者的血清AFP、CEA、CA50、CA15－3、CA19－9、CA72－4、CA125和CA242共8种肿瘤标记物的表达,并与其它恶性肿瘤患者70例和良性疾病患者73例作对照,分析其临床诊断价值。结果：8种肿瘤标记物中CA19－9、CA242、CA50和CA125对胰腺癌诊断的相对价值较高,尤以CA19－9的诊断价值最高,灵敏度和特异度分别为82．6％和81．3％,平行法联合检测提高灵敏度至90．2％,系列法联合检测提高特异度93．5％,25例获手术切除者术后上述四项指标呈下降趋势。结论：血清CA19－9、CA242、CA50和CA125的检测对胰腺癌的诊断和随访是价值的,联合检测可以增加检测效率。     

视黄醇类核内受体α基因慢病毒表达载体构建

目的 通过构建大鼠视黄醇类核内受体-α(RXR-α)基因慢病毒表达载体,获得可供转染的滴度.方法 大鼠RXR-α基因序列进行聚合酶链反应(PCR)扩增,与经AgeI酶切后的pCC-FU-3FLAG载体连接产生慢病毒载体表达质粒pGC-fu-3flag-Rxra,转化DH5α,PCR筛选阳性克隆,片段长为411bp.测序并转入293T细胞Western blot鉴定,90 KDr处有特征条带.将pGC-fu-3flag-Rxra、pHelper 1.0、pHelper 2.0三质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒,测病毒滴度,1.00E-04μl组和Control组的Ct值存在差异(2.775).结果 DNA测序及Western blot鉴定证实构建的大鼠RXR-α基因慢病毒表达载体pGC-fu-3flag-Rxra正确,浓缩慢病毒悬液滴度为2×108TU/ml.结论 成功构建携带大鼠RXR-α基因的重组慢病毒表达载体.     

部分脾动脉栓塞术治疗肝硬化门静脉高压症的临床疗效分析

目的探讨部分脾动脉栓塞术（PSE）治疗肝硬化门静脉高压症的临床疗效。方法选取我院62例肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血和脾功能亢进患者。全组均行PSE,观察手术前后外周血象变化,门静脉、脾静脉管径变化及术后并发症发生情况。结果PSE术后白细胞、血小板计数高于术前（P〈0．05）;门静脉、脾静脉管径较术前缩小（P〈0．05）,全组病例无严重并发症发生。结论PSE治疗肝硬化并脾功能亢进操作简便、创伤较小、疗效稳固,可以抢救和预防再出血,尤适用于高危病重、老年不适于手术治疗者,是值得临床推广和应用的手术方法。