高压氧对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经干细胞的影响

目的 探讨高压氧(HBO)对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后神经干细胞的影响.方法 将SD大鼠随机分为假手术组(SS组),缺血再灌注组(IR组),高压氧治疗组(HBO组).采用线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,持续缺血1.5 h后再灌注,分别在第4、11、31天用氯化三苯四氮唑(TTC)染色,观察梗死灶面积的变化.采用免疫组化染色显示5-溴脱氧尿核苷(Brdu)阳性细胞和巢蛋白(nestin)阳性细胞,光镜下观察并统计分析HBO对脑缺血再灌注损伤后神经干细胞的影响.结果 TTC染色显示,HBO组各时间点梗死灶较IR组均有所减小;IR各组与SS组相比,皮层和纹状体BrdU阳性细胞和nestin阳性细胞数目均显著增多(P<0.05);HBO组与IR组相比,在第11天和第31天BrdU阳性细胞和nestin阳性细胞数均显著增多(P<0.05).结论 HBO对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后神经干细胞的增殖有促进作用.     

模拟失重大鼠胸主动脉和腹主动脉溶酶体相关分子表达改变

目的 研究四周尾部悬吊模拟失重大鼠胸主动脉(thoracic aorta,TA)和腹主动脉(abdominal aorta,AA)溶酶体相关分子的基因和蛋白表达改变.方法 采用4周尾部悬吊大鼠模拟失重对心血管系统的影响,通过Western blot技术、免疫组织化学染色和实时定量聚合酶链反应(quantitative ...     

临床医学本科生《高压氧医学》教学实践与思考

高压氧医学属于应用性交叉学科,其教学内容包括基础医学、临床医学、物理学、心理学等的相关知识,治疗疾病范围涉及全身各个系统。本文根据多年实践,探讨如何在高压氧医学教学中采用综合立体的教学模式,应用启发式和体验式教学方法,注重理论讲授与临床实际相结合,加强实践操作过程。同时,用讨论式方法探究高压氧临床运用时所存在问题,通过查阅文献和动物实验了解高压氧医学研究前沿进展,以培养学员扎实的理论功底和基本分析和操作技能,提高其从事高压氧临床和科研工作的兴趣,为高压氧医学的发展积聚后备力量。     

急性一氧化碳中毒大鼠脑组织Fas和caspase-3蛋白表达及高压氧的干预作用

目的 观察急性一氧化碳(CO)中毒后大鼠脑组织Fas和caspase-3蛋白表达的改变,为急性CO中毒后迟发性脑病delayed neuropathological sequelae,DNS)的发病机制提供新的证据.方法 50只SD雄性大鼠按数字表法随机分为对照组,染毒后1、3、7 组和高压氧(HBO)治疗7 d组,每组10只.采用HE染色、免疫组织化学染色及Western blot方法,观察染毒后各时间点大鼠脑组织损伤及Fas、caspase-3蛋白表达情况.结果 对照组Fas和caspase-3均表达极低,染毒后1 d,Fas和caspase-3蛋白表达均迅速增加,染毒后3 d达到高峰,3 d与7 d组表达无明显差别,HBO治疗组Fas和caspase-3蛋白表达均较染毒后7 d组显著减少(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.05).Fas和caspase-3蛋白表达改变与脑组织损伤程度呈一致变化.结论 Fas蛋白表达和细胞凋亡是CO中毒后DNS的发生机制之一,HBO可能通过减少Fas蛋白表达和抑制细胞凋亡而减轻脑组织的损伤.

Abstract：

Objective To investigate changes in the expression of Fas and caspase-3 in the brain of rats with acute CO poisoning and also to provide new evidence for pathogenic mechanism of delayed neuropathological sequelae (DNS) after CO exposure.Methods Fifty SD male rats were randomly assigned to the control group, the 1, 3, and 7 d CO exposure groups and the 7 d HBO treatment group, each consisting of 10 rats. HE, immunohistochemical staining and Western blot were performed to study the expression of Fas and caspase-3 in the brain tissue, following intoxication at various time points.Results The expression of both Fas and caspase-3 were very low in the control group. One day after CO exposure, the expression of both Fas and caspase-3 increased quickly and reached peak 3 days after exposure. No significant differences in both Fas and caspase-3 expressions could be noted between the 3 d and the 7 d exposure groups. For the HBO treatment group, the expression of both Fas and caspase-3 decreased more significantly (P<0.01) as compared with that of the 7 d exposure group, but was still higher than that of the control group(P<0.05). Changes in the expression of Fas and caspase-3 were closely correlated with the severity of brain injury.Conclusions The expression of Fas and apoptosis might be involved in the mechanism of DNS following CO poisoning. HBO seemed to play an important role in the alleviation of brain damage via decreasing the expression of Fas and inhibiting the apoptosis of cells.     

急性一氧化碳中毒大鼠脑内MIP-1α和ICAM-1的表达及高压氧干预后的变化

目的 观察急性CO中毒后大鼠脑内巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1α)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,进一步探讨迟发性脑病(DNS)的免疫学机制.方法 将60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组和染毒后1、3、7、10 d组及染毒后HBO治疗7 d组,每组10只.通过HE和免疫组化染色,观察各组大鼠脑组织的病理学改变以及MIP-1α和ICAM-1的表达情况.结果 HE染色显示,正常对照组脑内细胞形态正常,染毒组脑皮质和海马有严重病理损伤,出现大量变性、坏死神经元,且随染毒时间的延长,损伤程度加重,经HBO治疗后,损伤减轻.免疫组化染色显示,正常对照组无MIP-1α和ICAM-1表达;染毒1 d组MIP-1α开始有表达,ICAM-1无表达;染毒3 d组MIP-1α表达增加,数量达高峰(P<0.05),ICAM-1开始有表达;染毒7 d组MIP-1α表达开始减少,ICAM-1表达数量达高峰(P<0.05),在血管内皮细胞和淋巴细胞上均有表达;染毒后HBO治疗7 d组MIP-1α和ICAM-1表达均显著减少,与染毒7 d组比较差异有统计学意义(P<0.05);染毒10 d组几乎无MIP-1α表达,偶见少数淋巴细胞上有ICAM-1阳性表达.结论 MIP-1α和ICAM-1可能参与DNS的发病过程,HBO可通过减少两者的表达来减轻脑组织的损伤.     

高压氧对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后脑神经细胞的保护作用

目的探究脑缺血模型大鼠经30d高压氧治疗对大脑神经细胞的影响。方法成年SD大鼠随机分为三组：正常对照组、缺血再灌注（IR）组、高压氧治疗（HBO）组。IR组和HBO组动物经大脑中动脉栓塞（MCAO）1.5h后再灌注。所有大鼠均于术后2h腹腔注射BrdU（50mg/kg体重）,连续2次,间隔24h。HBO组高压氧治疗（2.8个绝对大气压,60min）30d,每日一次。所有大鼠于31d麻醉处死,取脑,切片,进行Nestin和BrdU的免疫组织化学染色,光镜观察并于损伤区取图。结果 HBO组和IR组Nestin＋和BrdU＋细胞表达于损伤区,两者密度在HBO组中均显著高于IR组（P〈0.05）,而正常对照组均未见阳性结果。结论 30dHBO治疗可促进大鼠缺血脑组织神经细胞增殖或对其有保护作用。     

高压氧对成年大鼠脑缺血再灌注损伤后脑血管内皮生长因子表达的影响

目的 探讨脑缺血模型大鼠经30 d高压氧(HBO)治疗后大脑血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化.方法 24只成年SD大鼠随机分为3组:对照组(C组)8只、缺血再灌注组(IR组)8只、HBO治疗组(HBO组)8只.C组为正常大鼠,IR组和HBO组大鼠经大脑中动脉栓塞(MCAO)1.5 h后再灌注,HBO组行HBO治疗.HBO治疗(0.28 MPa,60 min)30 d,1次/d,于31 d麻醉处死,取脑组织切片,VEGF和CD34免疫组化染色,光镜观察并于损伤区取图,进行相关分析.结果 VECF广泛分布,缺血区表达强烈,3组间有明显差异(P＜0.05),HBO组(13497.14±397.44)低于IR组(22.097.7±616.89);C组未见CD34表达,其他2组集中表达于缺血区;HBO组(5571.16±603.63)表达少于IR组(5349.72±390.88),但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 长期HBO治疗抑制大鼠缺血脑组织VEGF的表达,可能对神经细胞具有保护作用,有利于促进脑组织自我修复.     

急性一氧化碳中毒大鼠脑组织脱髓鞘病变及高压氧干预后的变化

目的 通过建立急性一氧化碳(CO)中毒大鼠模型,观察CO中毒后大鼠脑组织髓鞘结构的改变及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的变化,为研究急性CO中毒迟发性脑病(DNS)的发病机制提供新的实验依据.方法 60只雄性健康SD大鼠按数字表法随机分为对照组,染毒后3、7、14、30 d组以及染毒后高压氧(HBO)治疗14 d组(HBO治疗14d组),每组10只.对照组不作任何处理;染毒各组用CO染毒制作急性CO中毒模型,然后呼吸空气至大鼠恢复意识;HBO治疗14 d组以同样方式制作急性CO中毒模型后行HBO治疗14 d.各组分别于各时间点取材,通过电镜和Luxol fast blue染色后观察髓鞘的病理形态学改变,采用免疫组织化学染色和Western blot方法观察MBP表达情况.结果 电镜和Luxol fast blue染色结果显示,染毒后3d组开始出现髓鞘异常;染毒后14 d组出现典型的脱髓鞘病变,此组神经纤维( nerve fiber,NF)积分光密度(IOD)较对照组降低(P＜0.05);HBO治疗14 d组脱髓鞘病变较染毒后14 d组减轻,IOD值增加(P＜0.05),但仍然有髓鞘异常.免疫组织化学染色显示,染毒后3d组MBP表达开始减少,染毒后14 d组减少至最低(8835.75±133.49),此组MBP的IOD值较对照组有统计学差异(P＜0.05);HBO治疗14 d组较染毒14d组减轻,IOD值(156474.74±154.61)增加(P＜0.05).Western blot结果显示,染毒后3d组MBP表达减少,染毒后14 d组减少至最低(P＜0.05),HBO治疗14d组较染毒后14 d组减轻(P＜0.05).结论 本实验条件下,HBO治疗可以减轻CO中毒大鼠脑组织脱髓鞘病变.     

模拟失重下兔股静脉应力-应变关系及其相关组织形态学变化

目的　观察模拟失重对兔股静脉应力 应变关系的影响及股静脉的组织形态学变化。　方法　建立头低位 (- 2 0°)倾斜的模拟失重家兔模型。 2 4只雄性健康新西兰兔 ,随机分为模拟失重 2 1d组、模拟失重 10d组和对照组 ,每组 8只。各组取股静脉各做成血管条及血管环并分别做轴向和环向拉伸实验 ;对照组和实验组的血管试样均行显微结构观察。　结果　随着载荷应力的增加 ,血管试样的轴向和环向形变均显著增加 (P <0 .0 1) ,卸载时 ,均显著减少 (P <0 .0 1) ,相同应力下 ,3组试样的轴、环向卸载形变均较加载时增大 (P <0 .0 5 ) ,存在明显滞后环。相同应力 (轴向 :0～ 2 g ;环向 0 .5～ 1g)下 ,HDT 2 1d及HDT 10d组的轴、环向加卸载形变均较对照组显著增加 ,且HDT 2 1d组较HDT 10d组仍有显著增加。组织形态学观察表明 ,模拟失重时股静脉的管壁材料组份及结构均发生变化 ,内皮细胞呈矮柱或立方状 ,并伴有部分内皮细胞脱落 ,平滑肌层变薄等萎缩性改变。　结论　模拟失重后股静脉顺应性明显增加 ,且 2 1d组较 10d组增加更显著 ,同时股静脉管壁的组织结构发生明显改变 ,这可能是其顺应性增加的重要原因之一。