优质护理对人工髋关节置换术患者术后下肢深静脉血栓形成及康复效果的影响观察

目的:探讨优质护理对人工髋关节置换术患者术后下肢深静脉血栓形成及康复效果的影响。方法:选择我科收治的72例行人工髋关节置换术患者,随机分为两组,即予以优质护理者归为观察组,予以常规护理者归为对照组,每组均36例,观察两组患者术后情况以及髋关节功能恢复。结果:与对照组比较,观察组患者的血栓形成率、住院时间均明显缩短,Harris评分明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.001)。结论:优质护理可较好地降低人工髋关节置换术患者术后下肢深静脉血栓形成率,促进髋关节功能恢复。     

光敏生物素标记质粒DNA检测双链DNA抗体ELISA的建立及初步应用

建立一种既可定性也可定量检测血清抗双链ＤＮＡ抗体的ＥＬＩＳＡ，进一步提高对系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）诊断和监测的水平。以链霉亲合素处理微孔板，包被光敏生物素标记的质粒ＤＮＡ，用ＨＲＰ－羊抗人ＩｇＧ测定血不表双链ＤＮＡ抗体。分别以自制ＥＬＩＳＡ和Ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ公司ＥＬＩＳＡ抗ｄｓＤＮＡ定量试剂盒和胶体金斑点免疫渗滤法定性检测了３２例活动期ＳＬＥ，６例类风湿关节炎（ＲＡ），３０例健康人血清，阳     

白屈菜红碱对肝纤维化小鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:探讨白屈菜红碱对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化损伤小鼠的保护作用及对转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路的影响。方法:50只C57BL/6N小鼠随机分成正常对照组、模型组及白屈菜红碱低剂量(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中剂量(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))3个剂量组,每组10只。采用腹腔注射CCl_4和橄榄油混合液8周诱导小鼠肝纤维化模型,白屈菜红碱组于第5周开始灌胃给药。第14周后处死小鼠,观察白屈菜红碱各剂量组干预后小鼠的肝指数,苏木精-伊红染色和苦味酸-酸性品红染色法观察小鼠肝组织的病理改变及肝纤维化的程度;采用分光光度计和酶标仪测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、透明质酸(HA)和肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量;RT-q PCR检测TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA表达;Western blot检测TGF-β1、Smad4和Smad7的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组肝纤维化的病理改变明显,肝指数、AST、ALT、HA和Hyp均显著升高(P0.05);TGF-β1、Smad3和Smad4的mRNA表达显著上调,Smad7的mRNA表达显著下调(P0.05);TGF-β1和Smad4的蛋白表达显著上调,Smad7的蛋白表达显著下调(P0.05);与模型组比较,白屈菜红碱不同剂量给药组均抑制上述指标的改变(P0.05)。结论:白屈菜红碱能够抑制CCl_4诱导的小鼠肝纤维化,其机制可能与TGF-β/Smads信号通路有关。     

正交试验法优化车前子中槲皮素提取工艺

目的 研究从车前子中提取槲皮素的最佳条件。方法 以车前子作为提取槲皮素的原料,用高效液相色谱法（HPLC）进行提取条件的单因素试验,研究的因素包括超声功率、提取时间、甲醇比例、料液比例,以此为依据进行L9（3⁴）正交试验,寻求最佳提取条件。结果 研究表明各因素对槲皮素提取效果的影响大小依次为料液比 > 超声功率 > 甲醇比例 > 提取时间,从车前子提取槲皮素的最佳条件是选择40%甲醇水溶液为提取剂,以1：40 （g/ml）的料液比,在200 W的超声功率下超声40 min进行提取。结论 在优化后的提取条件下,槲皮素提取率达到0.79%,能简便、稳定且高效地从车前子中提取槲皮素。     

对叶百部抗肺炎支原体活性部位的血清药物化学研究

目的：应用血清药物化学理论分析检测对叶百部抗肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae,MP）活性部位的体内成分。方法：利用D101大孔树脂进行梯度洗脱,不同洗脱部位进行抗MP实验,测定其最小抑菌浓度值。采用超高效液相色谱与飞行时间质谱联用（UPLC-Q-TOF-MS/MS）及MetaboLynx数据处理技术分析鉴定抗MP活性部位的血中移行成分。分析采用Acquity UPLC BEH C₁₈色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈（B）,梯度洗脱,流速为0.40 mL·min^-1,柱温为45℃。结果：比较大孔树脂富集各洗脱部位最小抑菌浓度,水洗脱部位为29.41 mg·mL^-1,20%乙醇洗脱部位为15.62 mg·mL^-1,50%乙醇洗脱部位为10.42 mg·mL^-1,90%乙醇洗脱部位为7.81 mg·mL^-1。检测并鉴定了90%乙醇洗脱部位灌胃大鼠血中移行成分54个,包括14个原型成分和40个代谢产物。结论：对叶百部经大孔树脂富集90%乙醇洗脱部位抗MP活性最强,为抗MP活性部位。金刚大碱、百部新碱、对叶百部碱、新对叶百部碱、异对叶百部碱、N-氧-对叶百部碱、对叶百部碱J以及对叶百部碱H等成分可能为对叶百部抗MP的部分物质基础。     

突变敏感性分子开关检测线粒体DNA A1555G位点的条件优化

目的对高保真酶介导的突变敏感性分子开关技术检测线粒体DNA(mt DNA)A1555G位点条件进行优化。方法利用3'硫代磷酸化修饰的突变型引物和野生型引物作为下游引物,在其上游设计一条公共引物分别构成突变引物对和野生引物对,以构建好的包含mt DNA A1555G位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,对PCR体系中的退火温度、引物浓度、模板浓度等条件优化,通过凝胶成像系统对其PCR结果进行分析确定最佳反应条件。结果分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳PCR条件:退火温度为61.0℃,引物浓度为0.6μmol/L,检测模板浓度为103~106copies/μL。结论确定了分子开关技术检测mt DNA A1555G位点的最佳反应条件,为该技术在线粒体DNA的突变筛查中的应用提供依据。     

急性冠脉综合征患者白介素-18及基质金属蛋白酶-9检测的意义

目的探讨白介素-18（IL—18）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）预测急性冠脉综合征（ACS）的意义。方法心内科住院患者79例，根据临床表现及冠脉造影结果分为对照组24例、不稳定性心绞痛（UAP）组预测3l例和急性心肌梗死（AMI）组24例，用酶联免疫吸附法（ELISA）测量其股动脉血清IL—18及MMP-9水平。结果IL—18水平，对照组较UAP组显著降低（P〈0．01），UAP组较AMI组显著降低（P〈0．01）；MMP-9水平，对照组较UAP组显著降低（P〈0．01），UAP组较AMI组显著降低（P〈0．01）。结论IL—18及MMP-9在正常人中表达，在ACS患者中显著升高，可作为ACS重要预测指标，并可能成为ACS的治疗靶点。     

子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台的构建及初步应用

目的 构建子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为临床分析PTEN基因968delA突变与子宫内膜癌的相关性提供技术支持。方法 设计PTEN基因968delA位点的特异性硫化修饰引物,以本实验室前期构建的包含PTEN基因968delA位点的突变型质粒和野生型质粒为模板,进行高保真聚合酶介导的双向引物延伸反应,采用正交设计进行PCR条件优化,再将其优化后采用突变敏感性分子开关技术检测从南华大学附属第一医院收集的62例临床患者子宫内膜组织样本PTEN基因968delA位点突变。结果 突变敏感性分子开关技术检测PTEN基因968delA位点最佳PCR反应条件为：30个循环、模板DNA(10 ng/μL)0.3μL、引物(10μmol/L)0.5μL、退火温度61℃,灵敏度达10^-3 ng/μL。62例子宫内膜癌组织与21例正常子宫内膜组织标本均未发现PTEN基因968delA突变。结论 成功构建了子宫内膜癌PTEN基因968delA突变检测技术平台,为该技术在PTEN基因968delA的突变筛查中的应用提供了依据。     

晚期胆囊癌介入栓塞化疗的临床疗效观察

原发性胆囊癌因早期诊断困难,大多数患者就诊时已属中晚期,手术切除率低,预后差.近年来随着影像诊断技术的发展和手术技术的提高,积极开展了胆囊癌根治术和扩大根治术,其预后已有所改善.尽管有报道认为行胆囊癌扩大根治术后,这些患者的5年生存率有所提高,甚至有日本学者报道达36％[1],但多数学者认为5年生存率仍在10％左右[2].我院自2002年11月～ 2006年11月间收治46例晚期胆囊癌患者,其中26例行手术治疗,20例行介入栓塞化疗,对两组患者治疗后客观疗效及1～3年生存率进行比较.     

Ⅱ型糖尿病合并脂肪肝患者血清淀粉样蛋白A水平的临床研究

目的探讨血清淀粉样蛋白A（SSA）在新诊断的Ⅱ型糖尿病（T2DM）合并非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者中的临床意义。方法将79例新诊断T2DM的分为NAFLD组患者39例,非NAFLD组患者40例,分别测定体质量指数（BMI）、腰臀比（W/H）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素（FINS）、血清淀粉样蛋白A（SSA）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感指数（ISI）。结果 NAFLD组患者的血清SSA以及BMI、W/H、ALT、AST、FINS、TG及HOMA-IR较非NAFLD组患者显著增高（P〈0.01）,NAFLD组的年龄I、SI、HDL显著降低（P〈0.01）。新诊断的T2DM是否合并NAFLD与年龄、BMI、FINS及SSA有相关性（P〈0.05）。SSA与BMI,FINS,W/H呈正相关（P〈0.05）。结论 BMI、空腹胰岛素及SSA水平是新诊断的T2DM合并NAFLD的危险因素,并且BMI、腰臀比、空腹胰岛素水平与SSA水平具有相关性。