miR-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制

目的研究微小核糖核酸(micoroRNA,miR)-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡影响及作用机制。方法选取30只健康Wistar大鼠,经腹腔注射维生素D3和高脂饲料喂养方法建立动脉粥样硬化模型,分为模型组、竞争性短核糖核苷酸阴性对照序列(scramble-NC)组和miR-499-5p上调组各10只,另选10只健康Wistar大鼠为正常组。构建miR-499-5p表达载体,检测血清氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)、髓过氧化物酶(MPO)]、炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10]水平。HE染色观察心肌细胞凋亡,Western blot法检测心肌细胞凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达。结果模型组、scramble-NC组、miR-499-5p上调组较正常组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达降低(P均<0.05);miR-499-5p上调组较模型组及scramble-NC组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达升高(P均<0.05)。结论miR-499-5p上调可逆转动脉粥样硬化所致氧化应激、血管炎症反应,抑制大鼠动脉粥样硬化发展,可能通过调控Bax、Bcl-xl蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡。     

某校生药学课程教学改革初探

生药学是一门具有很强理论性、实践性和直观性的学科.对生药学目前教学现状予以分析,根据特定教学对象优化精简理论教学内容;实验教学改革中在内容上减少验证性实验、增加综合性、设计性实验以提高学生综合操作技能,方式上突出学生的自主性、探索性并建立开放实验室以培养其创新意识;大胆改革课程考核评价体系,注重平时教学过程的形成性评价与实验考核评价相结合.经过一系列初步的探索和试点,收到了良好的教学效果.     

阈值和阈值前期早产儿视网膜病变儿童视网膜电图观察

目的用全视野闪光视网膜电图（F-ERG）评价既往患阈值或阈值前期早产儿视网膜病变（ROP）JL童的视网膜功能。方法用F-ERG检查34例（68眼）既往有早产儿童,患阈值或阈值前期ROP者24例（48眼）,出生年龄体重匹配的未患ROP者10例（20眼）。统计分析两组儿童暗视和明视各反应a波、b波潜伏期和振幅的差异。结果ROP组较对照组暗视视杆反应和最大混合反应a波、b波潜伏期延长,振幅降低,差异有统计学意义,P〈O．05。ROP组与对照组明视视锥反应a波、b波振幅和潜伏期无明显差别,P〉0．05。结论阈值或阈值前期ROP视网膜功能受到影响,以视杆细胞的功能降低为主。F-ERG是评价早产儿视网膜功能有效检测手段。     

临床研究中的“治疗误解”

治疗误解是指在临床研究中,患者对于研究的本质、目的和可能带来的获益存在误解,其未能认识到参与临床研究不涉及个体化的治疗,而是为了获得可概括的科学知识。探讨了“治疗误解”的定义、原因以及对临床研究的影响,提出应对“治疗误解”的策略。通过深入了解“治疗误解”,可以提高研究参与者的知情同意质量,保护其权益并提升研究的质量。     

荆门地区CD14-159C/T多态性和幽门螺杆菌在胃癌中交联作用研究

目的探讨荆门地区人群CD14-159C/T多态性与胃癌关联性及其与幽门螺杆菌交互作用。 方法采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法,分析127例胃癌患者和127名健康者的CD14-159C/T基因型。非条件Logistic分析各基因型与发病中易感性关系以及与幽门螺杆菌的交互作用。 结果携带C（CC/CT）基因个体患病风险较非C基因携带者（TT）风险明显增加（OR=1.35,95% CI=1.22~2.56,P=0.000;校正OR=1.61,95% CI=1.21~3.01,P=0.000）。条件Logistic分析表明,携带CC/CT基因型幽门螺杆菌个体胃癌罹患风险是携带TT基因非幽门螺杆菌个体的3.39倍（OR=3.39,95% CI=2.66~5.36,P=0.000）（RERI=1.94,95% CI=1.41~2.77;API=0.59,95% CI=0.33~0.84;S=1.46,95% CI=1.37~2.66）。 结论CD14-159C/T多态性增加荆门地区个体胃癌的罹患风险,且与幽门螺杆菌在胃癌发病中存在协同效应。     

蓬莪术HPLC指纹图谱研究

目的:建立蓬莪术药材的指纹图谱。方法:采用HPLC法,色谱柱:Kromasil ODS-1(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(梯度洗脱);流速:1.0 ml/min;柱温:25℃;检测波长:210 nm。结果:建立了蓬莪术HPLC指纹图谱共有模式,并对不同产地的莪术药材进行了相似度比较。结论:蓬莪术药材中各成分均得到了较好的分离,可作为蓬莪术药材专属性的指纹图谱。     

人PPARγ_1LBD融合蛋白表达质粒的构建和诱导条件优化

目的制备高纯度的人PPARγ1LBD融合蛋白,为筛选其配体奠定基础。方法以人脂肪组织总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出人PPARγ1LBD基因的cDNA片段,将其插入表达载体pMAL-p2X的麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein,MBP)编码基因malE的下游,转化宿主菌E.coli.TB1。并对重组质粒在大肠杆菌TB1中的表达条件进行了优化。结果经BamHⅠ和HindⅢ双酶切,获得分子量为909bpDNA条带;当诱导剂IPTG浓度为0.4mmol.L-1,30℃振荡诱导培养6h时,重组菌TB1高效表达MBP-PPARγ1LBD融合蛋白,表达量可达胞质总蛋白的38.54%。结论成功构建了能在TB1中高效表达人PPARγ1LBD融合蛋白的重组质粒,获得了具有高生物活性的融合蛋白。     

小檗碱对脂质代谢相关基因PPARα和CPTIA表达的影响

目的研究小檗碱(Berberine,Ber)对HepG2细胞的PPARα基因及其调控基因CPTⅠA表达的影响。方法以PPARα激动剂非诺贝特作阳性对照药,采用RT-PCR法研究Ber对HepG2细胞PPARα基因及其调节基因CPTⅠAmR-NA表达影响的时—效和量—效关系。结果非诺贝特明显促进CPTⅠAmRNA表达;Ber也呈浓度和时间依赖性促进CPTⅠAmRNA的表达,而对PPARαmRNA表达无影响;PPARα特异拮抗剂MK-886能阻断非诺贝特和Ber上述作用。结论Ber可能通过激动PPARα促进与脂质代谢相关的靶基因CPTⅠAmRNA的表达。     

老年大鼠黑质中铁蓄积诱导的氧化应激效应

背景脑内一些区域内胶质细胞中铁的过多沉积和由铁介导的氧化应激反应可能与帕金森病等一些神经退行性疾病的发病有关,但目前对老年F344大鼠中脑黑质内铁沉积的亚细胞结构研究客观评价标准并不多见.目的观察老年F344大鼠黑质部位铁的沉积,为进一步了解PD的发病机制提供理论依据.设计随机对照实验研究.单位首都医科大学北京神经科学研究所和Department of Anatomy＆Neurobiology,University of Kentucky,College of Medicine,Lexinton U.S.A.材料选择24个月(6只),3个月(4只)Fischer(F344)雄性大鼠.干预将灌注固定后的脑组织取出中脑部分置于振动切片机上,将其切成40 μm脑薄片.分别采用免疫组织化学方法激光共聚焦显微镜;透射电子显微镜及电子探针元素能量微分析等技术,对中脑黑质部位铁的沉积做一系统组织化学及形态学观察.主要观察指标在光镜、激光共聚焦显微镜、透射电子显微镜下观察及电子探针元素能量微分析中脑黑质部位铁的沉积.结果在光镜下,作为铁的主要储存形式-铁结合蛋白在黑质的网状部有明显增加并伴随着小胶质的增加,激光共聚焦显微镜下观察到它们很少存在于多巴胺神经元及星形质细胞内,而主要存在于小胶质中,利用电子探针检测结果显示的游离铁元素,主要位于星形胶质细胞的胞浆内,同时也在小胶质,少突胶质细胞及部分神经元的胞浆内发现有铁元素的沉积.结论随年龄的增长黑质中小胶质细胞的增加可能是铁在黑质中沉积的原因之一,而后者引起的自由基增加所导致的老年神经系统的氧化损伤,可能是造成帕金森病在老年人群中发病率升高的重要原因之一.