转铁蛋白受体介导的肝癌靶向性HSV-tk/GCV系统的构建及体外效应研究

目的：构建肝癌靶向性HSV—tk／GCV基因转移系统，并研究其在体外对肝癌细胞的杀伤效应。方法：体外培养通过基因重组技术构建和表达抗转铁蛋白受体(TfR)人—鼠嵌合抗体的转染瘤细胞D2C5．6，诱导裸鼠(Balb／c，nu／nu)产生腹水并纯化；以蛋白质连接因子—水溶性碳二亚胺(EDC)介导TfR的抗体与多聚左旋赖氨酸的连接(Ab—PLL)，与pEBAF／tk按比例混匀，得到Ab—PLL—pETAF／tk基因转移系统；分别转染不同的细胞株进行体外效应研究：人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721，人肺癌细胞株549，观察给予不同浓度的更昔洛韦(GCV)随时间延长的细胞改变情况，用MTT法检测GCV对不同细胞的杀伤作用。结果：分析型酸性尿素凝胶电泳证实抗TfR的抗体与PLL成功连接；体外杀伤实验显示：经Ab—PLL—pETAF／tk基因转移系统处理的3种细胞对GCV表现出不同的敏感性。HepG2细胞(CD71 ，AFP )对GCV很敏感，低浓度的GCV(1mg／L)处理3d，即可使细胞生长抑制率达到74．8％，SMMC7721细胞(CD71 ，AFP )对GCV低度敏感，A549(CD71-，AFP-)对GCV不敏感。结论：TfR介导的肝癌靶向性HSV—tk／GCV基因转移系统构建成功；有可能用以肝癌细胞为靶细胞的基因治疗的研究。     

精神分裂症患者社会功能康复干扰因素的定性研究

目的探究影响精神分裂症患者社会功能康复的干扰因素。方法运用扎根理论资料分析方法,对20例康复期精神分裂症患者及6名医护人员进行访谈,通过开放式登录、关联式登录及选择式登录三级编码方法,对质性资料进行比较和归纳。结果提炼出5个主范畴:患者心理压力过大、自我效能感低下、存在消极定势、政府政策支撑不足、医务工作者的专业素质有待提高。结论精神分裂症患者的心理状态是影响其社会功能康复的内在原因,政府支撑保障对精神分裂症患者社会功能康复的力度稍显不足。     

制大黄-川芎药对对CIN大鼠肾组织Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的:在前期发现制大黄-川芎药对能抑制对比剂肾病(contrast-induced nephropathy,CIN)大鼠肾小管上皮细胞凋亡的基础上,进一步从核因子E2相关因子/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)通路探讨该药对的作用机制。方法:将32只雄性SD大鼠分为正常组(A组)、模型组(B组)、药对组(C组)、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(D组)。C组于造模前7 d每日灌胃制大黄-川芎水煎液,D组造模前3 d每日腹腔注射NAC(150μg/g)。B、C、D三组按照文献方法制备CIN模型。造模后24 h处死动物,并腹主动脉采取血测定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);代谢笼收集24 h尿液,并测定尿液中急性肾损伤(AKI)标志物N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)、γ-谷氨酰转肽酶(U-γ-GT);分别提取肾组织中核蛋白和总蛋白,采用Western blotting方法检测肾组织中Nrf2和HO-1蛋白表达。结果:与A组比较,B组大鼠Scr、BUN、尿NAG、U-γ-GT均明显升高(P0.01),肾组织中Nrf2、HO-1蛋白表达明显上调(P0.01);与B组比较,C、D组Scr、BUN明显降低(P0.05),尿NAG、U-γ-GT显著降低(P0.01),Nrf2、HO-1蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:Nrf2/HO-1通路活化参与了CIN大鼠急性肾损伤过程,且制大黄-川芎药对可通过抑制该通路活化保护CIN大鼠肾功能。     

零磁场对小鼠行为影响的初步研究

目的 研究零磁场对小鼠行为的影响;方法 C级磁屏蔽室模拟零磁空间,7只Balb/c小鼠分别在零磁空间和正常地磁环境下进行实验。在白天和夜间两个时段,利用UGO-7431行为分析仪定量检测小鼠的行为学指标,并进行统计学分析;结果与正常地磁环境比较,零磁空间下小鼠水平方向的活跃程度没有显著性差异,而垂直方向活跃程度明显增强;白天和夜间两个时段的实验结果 的差异并没有统计学意义;结论 小鼠在零磁空间环境下的部分行为学指标变化显著,表现为亢奋、烦躁,证实地磁环境与动物的日常行为息息相关。     

实时虹膜识别技术在准分子激光原位角膜磨镶术矫正中高度近视性散光中的应用

目的 评价实时虹膜识别技术在准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)矫正中高度近视性散光中的价值.方法 采用随机对照研究,接受实时虹膜识别引导LASIK手术的近视性散光49例(90眼)作为试验组,接受常规LASIK手术的近视性散光49例(91眼)作为对照组.对两组术后1个月、3个月、6个月的裸眼视力、最佳矫正视力、散光度、散光轴向等进行比较.结果 静态虹膜识别检测出眼球旋转偏移角度为2.83°±2.65°,动态虹膜识别检测眼球旋转变化范围为0°～6°.术后6个月时,试验组裸眼视力≥术前最佳矫正视力86眼(95.6％)多于对照组75眼(82.4％)(P＜0.01);试验组的平均散光(-0.29 ±0.23)D低于对照组(-0.45 ±0.31)D(P ＜0.05).术后6个月,试验组无散光眼40眼(44.4％)多于对照组26眼(28.6％)(P＜0.05);对照组斜轴散光明显增加.结论 实时虹膜识别技术能够有效校正LASIK术前和术中的眼球旋转偏差,使散光度数和轴向的治疗更加精确.     

LASIK后再近视的治疗

Camellin1999年首创准分子激光卜皮下角膜磨镶术(LASEK)，由于术后疼痛轻微，较轻的haze和较稳定的视力，受到了广泛关注。我院自1998年开展LASIK以来，出现了部分术后再近视的患者，对其巾角膜瓣下剩余基质厚度超过280μm的患者采取重新掀瓣后再次LASIK，效果良好，低于280μm的患者予以了以观察随访，并于2002年3月至2003年6月行LASEK治疗，随访6～12个月，取得了较满意的效果，现将结果报告如下：     

miR-181a靶向沉默信息调节因子相关酶1在过氧化氢诱导的人小梁网细胞氧化应激中的调节作用

目的　探讨miR-181a对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人小梁网细胞（HTMCs)氧化应激的调节作用及其机制。方法　HTMCs随机分为空白组（0 μmol·L^-1 H₂O₂）、200 μmol·L^-1 H₂O₂组、400 μmol·L^-1 H₂O₂组、600 μmol·L^-1 H₂O₂组,分别使用相应浓度H₂O₂处理HTMCs,24 h后MTT法检测各组细胞存活率,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测各组细胞miR-181a mRNA表达,Western blot检测各组细胞中沉默信息调节因子相关酶1（SIRT1）蛋白表达。根据转染物的不同分为miR-181a inhibitor组、miR-181a NC组、miR-181a mimics组、miR-181a inhibitor+si-SIRT1组和miR-181a inhibitor+si-NC组,使用二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针检测各组细胞内活性氧（ROS）含量,使用超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）ELISA试剂盒检测各组细胞SOD和MDA活性,使用Annexin V FITC/PI联合流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot检测各组细胞中SIRT1蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验对靶点进行验证。结果　与空白组比较,200 μmol·L^-1 H₂O₂组、400 μmol·L^-1 H₂O₂组、600 μmol·L^-1 H₂O₂组细胞存活率均降低（均为P<0.05）。细胞miR-181a mRNA的表达随着H₂O₂浓度的增加而增加,SIRT1蛋白的表达随着H₂O₂浓度的增加而降低（均为P<0.05）。与miR-181a NC组比较,miR-181a mimics组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均升高,细胞SOD活性、SIRT1蛋白表达均降低,miR-181a inhibitor组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均降低,细胞SOD活性、SIRT1蛋白表达均升高（均为P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-181a靶向抑制SIRT1蛋白的表达。与miR-181a inhibitor+si-NC组比较,miR-181a inhibitor+si-SIRT1组细胞凋亡率、MDA活性和ROS含量均升高,SOD活性降低（均为P<0.05）。结论　miR-181a可能通过靶向SIRT1调节H₂O₂诱导的HTMCs氧化应激作用。     

军人表演型人格倾向筛查问卷的初步编制

目的 编制符合部队需要的表演型人格倾向筛查工具.方法 根据临床经验和文献研究的结果,从现有量表中提取条目,经专家评议后形成试测问卷.使用试测问卷、PDQ-4+的表演型人格分量表对400名部队官兵施测;筛选出PDQ-4+表演型人格分量表为阳性的官兵后,用SCID-Ⅱ对这部分官兵实施访谈.通过探索性因素分析初步构建问卷结构,分析条目的区分度,问卷的信度、效度、灵敏度和特异度,最终确定量表的划界分.结果 经专家评议的试测问卷有37个条目有效,30个条目存在部分争议,25个条目专家认为无效;修订后进行试测,理解力测评显示除条目32、41、51外,其余条目均有90％以上的官兵认为可以理解.探索性因素分析后量表划分为易变性、关系认知、肤浅性、自我中心、挫折反应和挑逗行为六个因子,共可解释41.08％的变异,各因子可解释的变异在3.43％ ～ 18.40％之间.6个条目区分度不佳,18个区分度尚可的条目应作调整.量表的内部一致性信度Cronbach's α系数为0.776,分半信度系数为0.625,效标效度为0.357 (P ＜0.05).ROC曲线分析中AUC=0.910(P＜0.05),31.5分的灵敏度为0.848,特异度为0.875;32.5分的灵敏度为0.881,特异度为0.750,选取32分为量表划界分.结论 初步编制的表演型人格倾向筛查问卷可用于部队筛查表演型人格倾向.     

血清TSGF与AFP联合检测对良恶性肝病的诊断价值

恶 性肿瘤特异性生长因子 (ＴＳＧＦ)是一种和恶性肿瘤增殖有关的血清学肿瘤标记物 ,它具有检测瘤谱广、灵敏度高等优点 ,成为目前使用较广的一种肿瘤筛选指标[1 ] 。但不同肿瘤的ＴＳＧＦ含量与阳性率差别较大[2 ] 。ＡＦＰ曾被认为是最好的肝癌诊断指标 ,但其阳性率仅有 60 %～ 70 % ,即我国有 30 %～ 40 %属ＡＦＰ阴性肝癌患者[3] 。本文对良恶性肝病患者血清ＴＳＧＦ及ＡＦＰ的含量进行测定 ,意在探讨二者联合检测诊断原发性肝癌的价值。1　材料和方法1 .1　对象1 .1 .1　对照组 :50例健康体检者 ,其中男 32例 ,女 1 8例 ,年龄 2 0岁～ …