中性粒细胞外陷阱在肺部疾病中的研究进展

中性粒细胞作为固有免疫的主要组成部分, 拥有对抗各种病原体的强大能力, 是最先到达感染部位的炎症细胞。既往对中性粒细胞作用局限于趋化、吞噬、释放蛋白酶及脱颗粒等方式。随着研究深入, 一种新的防御机制——中性粒细胞外陷阱(NETs)被提出, 其是中性粒细胞在应对病原微生物刺激的情况下, 高度活化后释放出以DNA为骨架附着众多蛋白质的大面积网状结构。虽然NETs可以诱导病原体, 限制炎症扩散, 但是各种成分亦会对机体造成损伤, 加剧病理生理变化。现就NETs的成分、来源、刺激因素、形成机制以及在多种肺疾病中的作用进行综述, 旨在为肺疾病的预防和治疗提供更广泛的思路。     

α1-抗胰蛋白酶对急性呼吸窘迫综合征大鼠机械通气肺损伤的治疗作用

目的评估α1-抗胰蛋白酶(AAT)是否可减轻急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠接受机械通气后的呼吸机相关肺损伤(VILI)。方法大鼠随机分为假手术组(S组)、机械通气组(V组)和机械通气/AAT组(VA组)。S组大鼠仅接受麻醉,V组和VA组大鼠接受脂多糖模拟ARDS,然后机械通气4 h。在通气开始时,V组大鼠股静脉给予盐水,VA组大鼠接受股静脉给予AAT。测量氧合指数(PaO2/FiO2)、肺湿/干重比(W/D),检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度、弹性蛋白酶浓度、中性粒细胞和巨噬细胞计数,检测BALF中的炎症因子和血清中的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)浓度,测量肺内氧化应激反应,观察肺组织学损伤和细胞凋亡情况。结果与S组比较,V组和VA组大鼠PaO2/FiO2显著降低,BALF中的蛋白质浓度和肺W/D明显升高,BALF和外周血中炎症因子浓度显著升高,BALF中炎症细胞计数增高;丙二醛(MDA)浓度、髓过氧化物酶(MPO)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH)活性显著增加;V组和VA组损伤严重,凋亡细胞数明显增加。与V组比较,VA组PaO2/FiO2显著提高,肺W/D和BALF蛋白浓度降低,BALF中的巨噬细胞和中性粒细胞的数量以及弹性蛋白酶的浓度显著降低;BALF中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-6降低,白细胞介素-10升高;外周血中的ICAM-1和MIP-2降低;MDA浓度、MPO和NADPH活性显著降低,组织损伤明显减轻,细胞凋亡数量明显减少;Bax、凝溶胶蛋白和裂解的胱天蛋白酶-3表达降低,但Bcl-2的表达增强(P<0.05)。结论 AAT可减轻ARDS大鼠的VILI。AAT给予的保护作用可能与AAT的抗炎、抗氧化应激反应和抗细胞凋亡作用有关。     

中医从脾论治艾滋病相关腹泻研究进展

目的 探讨艾滋病相关腹泻的治疗方法,研究从脾论治在治疗中的作用.方法 为了了解中医从脾论治艾滋病相关腹泻研究进展,通过检索近年中国知网、万方数据等相关文献报导,就从脾论治艾滋病相关腹泻的病因病机,治法方药等进行综述和讨论.结果 通过对大量文献的整理,发现中医中药对艾滋病相关腹泻的治疗具有独特优势.很多临床医家善于从脾论...     

《中华人民共和国药典》2020年版收载何首乌和制何首乌质量标准【鉴别】项的商榷

目的 讨论完善《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2020年版何首乌及制何首乌的薄层色谱鉴别项。方法 考察超声及加热回流2种不同的样品制备方式,以及用二氯甲烷-甲醇-甲酸、乙酸乙酯-石油醚-甲酸展开系统代替原标准中三氯甲烷-甲醇展开系统的可行性,同时比较了不同显色条件。结果 2种制备方式制得的样品在相同的展开条件下展开结果并没有明显差异,超声提取操作更加简便;以二氯甲烷-甲醇-甲酸（5∶1∶0.3）和石油醚-乙酸乙酯-甲酸（5.0∶1.0∶0.3）代替三氯甲烷-甲醇展开系统后,喷10%硫酸乙醇显色剂并在紫外灯365 nm下检视,薄层色谱板上斑点明显增多且分离效果好,较《中国药典》2020年版何首乌和制何首乌薄层色谱鉴别条件更理想。结论 改进后的方法毒性低、简便易行、可行性良好,为进一步完善《中国药典》2020年版何首乌和制何首乌质量标准提供参考。     

CCL25/CCR9在胆道闭锁肝纤维化中的表达及临床意义北大核心CSCD

目的探讨CC趋化因子受体9(CC chemokine receptor 9,CCR9)及其趋化因子配体25(CC chemokine ligand 25,CCL25)在胆道闭锁(biliary atresia,BA)患儿肝纤维化中的表达并评价其临床价值。方法回顾性分析2019年10月至2022年8月在天津市儿童医院普外科进行肝脏手术治疗的35例患儿临床资料,将诊断为胆总管囊肿(choledochal cyst,CC)的8例患儿作为对照组,其余27例BA患儿为BA组。所有患儿手术均留取肝组织样本,同时收集患儿血清样本,采用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清CCL25水平,并绘制受试者操作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线,结合临床生化指标进一步分析血清CCL25对BA患儿的辅助诊断价值。采用免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测肝组织中CCR9的表达水平,并采用Spearman相关分析法分析其与BA患儿肝组织纤维化分级的相关性;分析CCR9对BA患儿肝脏纤维化程度的评估价值。计数资料组间比较用χ^(2)检验或Fisher精确检验;不符合正态分布的计量资料组间比较采用Mann-Whitney U检验和Wilcoxon检验。结果ELISA结果显示,BA组血清CCL25水平310.03(262.03,338.87)pg/ml明显高于CC组244.46(222.70,260.45)pg/ml,差异有统计学意义(P=0.004)。ROC曲线显示,血清CCL25水平诊断BA患儿的曲线下面积为0.829(95%CI:0.683~0.975),临界值为267.12 pg/ml。血清CCL25水平、GGT、TBA联合诊断BA的曲线下面积为0.958。免疫组织化学和qRT-PCR结果显示,BA患儿肝组织中CCR9蛋白表达量[40.29(29.40,65.12)比15.26(8.04,20.15),P<0.001]、CCR9 mRNA表达量[3.88(1.38,7.95)比0.83(0.07,0.95),P=0.0005]均明显高于CC组。与Ⅰ~Ⅱ级肝纤维化比较,Ⅲ~Ⅳ级肝纤维化的CCR9蛋白表达量[51.08(39.36,73.27)比25.93(19.23,38.00),P=0.0022]、CCR9 mRNA表达量[6.63(2.75,9.45)比1.21(1.04,3.57),P=0.0075]明显提高。BA组患儿的CCR9蛋白表达量、mRNA表达量与肝纤维化分级均呈正相关(rs=0.820、rs=0.804,P<0.001)。结论血清CCL25在辅助诊断BA患儿方面具有潜在的临床价值;CCR9在肝组织中的表达与BA患儿肝纤维化程度密切相关,且随着肝纤维化程度加重而增加。     

中药复方制剂治疗艾滋病的临床研究证据图分析

目的 系统检索并运用证据图梳理中药复方制剂治疗艾滋病的临床研究,了解该领域证据分布情况。方法 计算机检索CNKI、WanFang Data、VIP、CBM、PubMed和Cochrane Library数据库,搜集中药复方制剂治疗艾滋病的相关临床研究,检索时限均为建库至2022年8月。采用图表结合文字的方式分析并呈现证据分布特征。结果 最终纳入文献337篇,包括268篇干预性研究、66篇观察性研究、4篇系统评价/Meta分析。共获得92种中药复方制剂,不同药物文献量分层明显,以康爱保生制剂报道频次最高。近年来发文量呈下降趋势,大部分文献质量偏低,证据等级不高。对于干预时间,本领域均倾向于较长的干预观察时间,对于结局指标,存在部分指标评价标准不统一,中医特色优势体现不明确的问题。系统评价/Meta分析数量与质量均呈现不足状态,尚未形成中药复方制剂治疗艾滋病的规范性共识、指南。结论 中药复方制剂治疗艾滋病有效性和安全性方面的研究已初步形成一定规模的证据群。未来需进一步提高研究质量,发掘能够体现中医疗效优势的结局指标,规范制订相关临床指南。     

HPLC法测定不同产地生何首乌和不同炮制工艺制首乌中顺（反）式二苯乙烯苷含量

目的 比较不同产地何首乌及不同炮制工艺制何首乌中顺(反)二苯乙烯苷含量的变化,探究其炮制减毒增效的作用机制,为何首乌质量控制及饮片炮制标准研究提供数据参考,以期降低临床用药风险。方法 采用高效液相色谱法,测定何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷(2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)的含量。结果 不同批次何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷含量范围分别为27.23～358.19μg·g^-1和10.30～52.00 mg·g^-1。结论本方法操作简单,准确度高,重复性好,可以用于何首乌和制何首乌中顺(反)式二苯乙烯苷含量测定。     

肌营养不良症模型鼠神经元型一氧化氮合酶抑制蛋白的表达及定位

目的:观察肌营养不良症模型鼠(mdx)肌肉组织神经元型一氧化氮合酶抑制蛋白(proteininhibitorofnNOS,PIN)的表达及定位,以及与dys-trophin复合物及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的关系。方法:取mdx鼠(18只,实验组)和C57BL/10ScSn鼠(15只对照组)骨骼肌作常规染色,比较其组织学改变;同时对mdx鼠,C57BL鼠骨骼肌作Northernblot和固定化蛋白质印迹法(Westernblot)及免疫组化分析。结果:Northernblot分析发现,mdx鼠肌肉组织PINmRNA显著高于C57BL/10ScSn鼠,对照组骨骼肌有少量PINmRNA表达,其杂交斑点A值为1352.4±219.7,mdx组杂交斑点灰度A值为2724.2±394.6,两者差异有非常显著性意义(t=11.985,P<0.05);固定化蛋白质印迹法(Westernblot)显示,PIN蛋白的杂交信号在mdx组与对照组均出现在约8ku处,两者的吸光度平均值(A)几乎相等,mdx组的杂交斑点灰度A值为2378.2±486.7,对照组PIN蛋白的杂交斑点灰度A值为2438.5±494.9,两者差异无显著性意义(t=0.352,P>0.05);免疫组化及激光共聚焦扫描显微镜均揭示,在C57BL/10ScSn鼠肌纤维中,PIN蛋白在肌膜、周边核附近呈强阳性表达,肌质中弱表达,而mdx鼠的PIN蛋白在肌膜及中心核附近呈强阳性表达,细胞质中亦弱表达;PIN于mdx鼠肌纤维表达明显,而nNOS及dystrophin复合物表达明显减少     

VonKossa染色法和碱性磷酸酶的免疫组化染色法在牙齿矿化研究中的应用

牙齿的发育是一个长期复杂的连续过程。包括生长、矿化、萌出三个时期。其中矿化是指牙体硬组织形成的重要阶段。在这一生物矿化过程中，有文献报道钙盐的沉积与碱性磷酸酶活性有关。为证实这一论点，我们选择了钙质VonKossa及碱性磷酸酶的PAP免疫组化染色对小鼠牙胚进行不脱钙切片染色。现将本研究结果及实验过程中我们的一些经验体会与同道们进行交流。     

利塞膦酸钠治疗老年慢性肾脏病伴骨质疏松的疗效与安全性评价

目的评价利塞膦酸钠治疗老年慢性肾脏病(CKD)伴骨质疏松症的临床疗效及安全性。方法回顾性分析65例老年CKD2期或3期合并骨质疏松症患者的临床资料,分为应用利塞膦酸钠联合碳酸钙D3咀嚼片的治疗组32例及单独口服碳酸钙D3咀嚼片的对照组33例,疗程均为6个月。通过检测治疗前、后两组患者的骨密度、骨代谢指标如总1型胶原氨基端延长肽(t-P1NP)、N-端中段骨钙素(N-MID OC)、β-胶原降解产物(β-CTx)、25-羟基维生素D(25-OH-VD)等,对利塞膦酸钠的有效性进行评估,并评价其安全性。结果治疗6个月后两组患者T值及腰2~4、股骨颈的骨密度均显著升高(分别为P0.01和P0.05),且治疗组治疗后腰2~4、股骨颈的骨密度明显高于对照组治疗后(P0.05)。治疗组骨密度改善的总有效率(84.38%)显著高于对照组(60.61%)(P0.05)。治疗组治疗后t-P1NP、N-MID OC、β-CTx水平显著下降,25-OH-VD明显升高,与治疗前和对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗组治疗6个月后VAS评分显著下降(P0.01),且显著低于对照组(P0.05)。治疗组新骨折发生率显著低于对照组(P0.05)。治疗中未出现与药物相关的严重不良反应。结论利塞膦酸钠对于估算肾小球滤过率(e GFR)≥30 m L/(min·1.73m2)的老年CKD伴骨质疏松症的治疗有效,优于单用钙剂,且安全性较好。