基于长链非编码RNA的表达谱特征构建乳腺癌患者预后的风险模型

目的构建长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)表达特征的乳腺癌患者预后的预测模型。方法分析癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库1081例乳腺癌患者的转录组测序数据中LncRNA表达图谱及临床特征,对TCGA数据库中112对配对的乳腺癌及正常乳腺组织的转录组测序数据进行差异表达分析和单因素分析筛选得到差异表达且与乳腺癌患者预后显著相关的LncRNA(DELncRNA),利用DEseq2包进行差异表达分析(为减弱批次效应,测序数据已用DESeq函数标准化)。1081例乳腺癌患者被分成两组:训练集(541例)和验证集(540例)。将DELncRNA纳入Cox比例风险回归模型,在训练集中筛选和建立多LncRNA预后模型并对模型进行比例风险假定检验(proportional hazards assumption,PH假定检验),计算多基因风险评分,并基于此将患者分为高风险组和低风险组,采用Kaplan-Meier方法进行生存分析,并用验证集540例患者的数据进行验证。评价该模型在TCGA数据库肺鳞癌和肝细胞肝癌等患者中的预后评估价值。基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)分析LncRNA影响患者生存的具体机制。结果转录组测序分析筛选得到2815个差异表达基因,其中与乳腺癌患者预后显著相关的LncRNA共91个(P<0.05)。利用541例训练集乳腺癌患者的91个DELncRNA表达数据进行Cox回归分析,构建了基于5个LncRNA的Cox比例风险回归模型(训练集AUC=0.746,验证集AUC=0.650):AC004551.1、MTOR-AS1、KCNAB1-AS2、FAM230G和LINC01283,并进行PH假定检验(P=0.388)。K-M生存分析发现,训练集中高风险组的生存明显差于低风险组(中位生存时间:7.049年与12.21年,HR 0.367,95%CI 0.228~0.597,P<0.001),在验证集中高风险组患者生存时间也明显短于低风险组(中位生存时间:7.57年与10.85年,HR 0.412,95%CI 0.214~0.793,P<0.001)。在TCGA其他癌种中也得到相似的预测结果:肺鳞癌(HR 0.604,95%CI 0.383~0.951,P=0.007)及肝细胞肝癌(HR 0.551,95%CI 0.307~0.987,P=0.011)。GSEA结果提示,上述5个LncRNA的表达模式与肿瘤细胞的细胞周期调控有关。结论基于AC004551.1、MTOR-AS1、KCNAB1-AS2、FAM230G和LINC01283表达谱构建的预后模型可用于预测乳腺癌患者的预后,有利于进一步指导临床治疗。     

肝硬化门静脉高压患者血清胃蛋白酶原Ⅰ与胃蛋白酶原Ⅱ水平的变化及其临床意义

目的探讨血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)在肝硬化门静脉高压中的临床意义。方法选取肝硬化门静脉高压症患者93例(观察组),同时选取选取健康体检者90例作为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测两组血清PGⅠ和PGⅡ水平。结果观察组血清PGⅠ和PGⅡ分别为(160.31±21.06)μg/L和(17.32±1.63)μg/L,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Child-Paugh C级患者PGⅠ和PGⅡ分别为(201.16±32.11)μg/L和(30.21±2.32)μg/L,明显高于A级和B级患者(P<0.05);门静脉主干内径>13 mm患者PGⅠ和PGⅡ分别为(184.22±27.06)μg/L和(21.06±1.42)μg/L,明显高于≤13 mm患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肝硬化门脉高压症患者血清PGⅠ和PGⅡ水平升高,与肝功能分级以及肝脏门静脉主干内径有一定的相关性。     

不同红色荧光蛋白在酵母细胞中的表达效果分析

目的 比较不同红色荧光蛋白基因在酵母细胞中的表达效果。 方法 利用分子生物学方法,构建了4种红色荧光蛋白(DsRed)基因酵母报告载体,分别是pGPD-DsRed、pGPD-DsRed-express-2、pGPD-yDsRed和pGPD-yDsRed-express-2,后两者含有酵母细胞偏好性的密码子,将4种DsRed酵母报告载体转入W303-1A酵母细胞,利用倒置荧光显微镜观察DsRed的表达,并用多功能酶标仪测酵母细胞的发光强度。结果 各红色荧光发光强度明显不同,其中DsRed-express-2发光最强,其次是yDsRed-express-2,yDsRed发光强度最弱。 结论 在酵母细胞中红色荧光蛋白的强度与密码子偏好性无关;定量红色荧光蛋白表达强度最好选用DsRed-express-2报告基因。     

Stanford A型主动脉夹层的腔内修复术后并发症分析

目的总结Stanford A型主动脉夹层(TAAD)腔内修复术后常见并发症的诊治经验。方法对2001年1月至2012年5月接受腔内治疗的58例TAAD患者资料进行回顾性分析。平均年龄54.3(41～79)岁。35例单纯接受腔内治疗,23例接受杂交手术:升主动脉-左颈总动脉-左锁骨下动脉旁路3例,左颈总动脉-左锁骨下动脉旁路3例,右颈总动脉-左颈总动脉旁路15例,左锁骨下动脉-左颈总动脉-右颈总动脉旁路2例。结果总技术成功率为98.3%(57/58)。并发症包括内漏14例,脑卒中5例,支架源性新破口1例,血管旁路术后吻合口假性动脉瘤2例。术后30天内死亡7例。随访(35.5±5.4)个月,随访期间死亡2例,其余患者均健康生存。结论 TAAD腔内治疗后并发症较累及降主动脉疾病的腔内修复术更为常见,脑卒中是重要的致死性并发症,应引起足够重视。     

间接喉镜在困难气管插管中的辅助应用

目的观察间接喉镜在困难气管插管中辅助直接喉镜气管插管的优势。方法将40例术前评估气管插管困难的全麻病人分成两组,Ⅰ组用普通直接喉镜插管;Ⅱ组用间接喉镜辅助直接喉镜插管;如果两组病人经过在三次插管失败后或10分钟内未能完成插管者,均由纤支镜完成。结果Ⅰ组采用直接喉镜暴露声门时声门显露均为3级;而Ⅱ组用直接喉镜暴露声门时,声门显露均为3级或4级;辅助间接喉镜时都能通过间接喉镜镜面看到声门;其中Ⅰ组与Ⅱ组中一次性完成插管的例数有明显的差别p<0.05。结论在困难气管插管中,辅助间接喉镜插管比单纯用直接喉镜插管更有优势。     

白内障小切口囊外摘除人工晶体植入术临床体会

探讨白内障小切口囊外摘除人工晶体植入术的方法和临床效果。方法对2011年5月至2013年12月146例165只眼施行小切口白内障囊外摘除联合人工晶体植入术,分析手术的适宜性及治疗效果。结果术后视力均明显提高,术后1个月裸眼视力〈0.1者4眼（2.42%）,0.1~0.3者41眼（24.85%）,0.4~0.8者114眼（69.09%）,0.8以上者6眼（3.64%）。术后早期角膜雾状水肿6眼,3~5 d后水肿消失者5眼,2周后消失者1眼;后囊破裂、玻璃体脱出6眼,经处理后人工晶体植入睫状沟者4眼,缝线固定人工晶体者2眼。结论白内障小切口囊外摘除人工晶体植入手术是治疗白内障的有效方法,丰富的手术经验和良好的技巧对术后视力提高、减少并发症有重要作用。     

2型糖尿病家系中患者与一级亲属血脂异常紊乱的研究

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）家系人群中患者与一级亲属血脂紊乱异常类型、聚集程度的差异及血脂紊乱的影响因素。方法 对351例T2DM患者和300例非糖尿病一级亲属按血脂指标异常的项目数分为5组，并将血脂紊乱分为8种类型。比较家系两组人群异常血脂指标聚集性和血脂紊乱类型。在糖尿病患者中以血脂正常者为对照组，用Logistic回归分析年龄、体脂等和血脂的关系。结果 家系两组人群中的血脂紊乱类型的差异无统计学意义（x^2=4．294，P=0．7451），但患者组血脂紊乱的比例高于未患糖尿病亲属组（72．6％vs．57．7％，x^2=16．123，P=0．0000）。多因素分析发现年龄与TG的升高和HDL的降低有关，腰臀比的增大与TG有关[Exp（B）=1．799，P=0．012]。结论 糖尿病患者中存在异常血脂指标的聚集，但患者与其亲属的血脂紊乱类型相似。糖尿病患者腹部体脂的增加与总胆固醇水平有关。     

胃癌组织中LVD的表达变化及意义

目的探讨胃癌组织中淋巴管密度（LVD）的变化及其与胃癌临床病理指标的关系。方法应用免疫组化SP法对50例胃癌组织和30例正常组织标本进行D-240染色,并于光镜下观察计算淋巴管密度（LVD）。结果D2-40的阳性表达在淋巴管内皮细胞中,呈棕黄色。胃癌组织中LVD为（8.01&#177;4.47）条/HP,显著高于正常胃组织为（1.32&#177;1.41）条/HP,P〈0.05;癌周LVD为（11.49&#177;3.53）条/HP,明显高于癌内组织为（4.53&#177;1.75）条/HP,P〈0.05。低未分化[（9.06&#177;1.64）条/HP]、Ⅲ～Ⅳ期[（9.06&#177;1.39）条/HP]、有淋巴结转移[（9.10&#177;1.36）条/HP]和远处转移的[（10.55&#177;1.21）条/HP]胃癌LVD分别较高中分化[（6.15&#177;2.95）条/HP]、Ⅰ～Ⅱ期[（4.28&#177;2.43）条/HP]、无淋巴结转移[（7.38&#177;2.46）条/HP]和远处转移者[（7.38&#177;2.46）条/HP]增高,P均〈0.05。结论胃癌组织中的LVD上升。检测LVD可以预测胃癌的淋巴结微转移。     

人附睾分泌蛋白4在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的:研究人附睾分泌蛋白4(HE4)在卵巢良性、交界性和恶性上皮性肿瘤的表达,探讨HE4在卵巢癌发生发展及诊断中的作用。方法:应用免疫组化EnVision法检测20例卵巢良性上皮性肿瘤、15例交界性肿瘤和55例恶性上皮性肿瘤中HE4表达。结果:HE4在卵巢良性、交界性和恶性上皮性肿瘤中的阳性表达率分别为15.5%、53.3%和83.6%,HE4在卵巢恶性上皮性肿瘤中的表达明显高于卵巢交界性和良性上皮性肿瘤,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。随着临床分期增高,HE4蛋白阳性表达率亦逐渐增高,但无统计学意义(P>0.05);HE4蛋白表达与卵巢癌淋巴结转移无相关性(P>0.05)。HE4主要在卵巢浆液性肿瘤和子宫内膜样癌中表达。结论:HE4在卵巢恶性上皮性肿瘤中高表达提示其可能作为诊断卵巢癌的一种标记物,且肿瘤组织学类型可能为浆液性肿瘤和子宫内膜样癌。