Taqman-探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌方法的建立

目的 建立一种Taqman荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法。方法 以副溶血弧菌标准株(ATCC-VPJS421)和其它常见致病菌标准株为研究对象,通过Gene Bank获取toxR基因的序列,采用生物信息学软件设计特异性PCR引物及Taqman探针,在SLAN 96P荧光定量PCR仪进行扩增检测,评价该检测方法的特异度和灵敏度。结果 ①设计的引物能够扩增出特异性条带; ②扩增体系中0.5 μl探针的扩增效果优于1.0 μl探针; ③Taqman-探针荧光定量PCR检测方法对副溶血弧菌toxR基因的检测灵敏度为10^-1 mg/L; ④在检测粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、霍氏肠杆菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、溶藻弧菌、创伤弧菌、梅氏弧菌和弗尼斯弧菌等10种常见致病菌时未出现阳性扩增,特异度为100%。结论 成功建立Taqman探针荧光定量PCR鉴定副溶血弧菌的方法,该方法特异度、灵敏度均较好,适用于副溶血弧菌的快速检测,具有良好的应用价值。     

铜绿假单胞菌313株的临床分布与药敏分析

目的:通过对2006-2010年临床分离的313株铜绿假单胞菌进行临床分布及药敏分析,为临床感染的诊断与治疗提供依据.方法:2006-2010年沈阳市第四人民医院患者送检的各类标本中通过分离培养获得铜绿假单胞菌313株,采用纸片琼脂扩散法对上述菌株进行药物敏感试验及结果分析.结果:(1)临床送检的各类标本中铜绿假单胞菌的检出率依次为:痰液(83.3％),眼分泌物(7.7％),尿液(4.2％),脓汁(2.6％)和胆汁(1.3％).(2)各科室检出率:干诊病房最多(55.6％),其次为内科病房(21.1％)、外科病房(18.2％)和眼科病房(5.1％).(3)药敏分析结果显示上述菌株对亚胺培南和美洛培南的敏感率分别达到83.1％和79.6％,而对氨曲南耐药率达到了83.5％.结论:在各类送检标本中,铜绿假单胞茵的检出率以痰液标本最高,其临床分布主要集中于干诊病房.2006-2010年期间,临床治疗铜绿假单胞菌感染首选药物为亚胺培南和美洛培南,均属于碳青霉烯类.     

10例原发性气管肿瘤的外科诊断及手术治疗

目的总结外科手术治疗原发性气管肿瘤的临床经验。方法回顾分析本院1993年10月～2010年1月收治的10例气管肿瘤的诊断和治疗经验。结果本组鳞癌3例,腺癌3例,腺鳞癌1例,良性肿瘤3例;临床治愈9例,术后3d死亡1例。本组3例鳞癌患者分别于手术后3年和8个月复发死亡;3例腺癌,1例术后1年出现肺转移,另2例存活10个月。结论手术切除是治疗气管肿瘤最有效的方法：（1）纤维支气管镜检查与多排CT增强三维成像对确定气管肿瘤范围有互补作用;（2）充分的术前呼吸道准备,是术中安全、术后顺利康复的保障;（3）手术者和麻醉医师密切配合,选择视野较宽的纤维支气管镜引导气管插管是麻醉安全的重要保障。     

轻度认知障碍患者血小板中α、β-分泌酶基因表达水平及其临床意义

目的探讨轻度认知障碍患者血小板中α、β-分泌酶基因表达水平及其临床意义。方法选入28例轻度认知障碍(MCI)患者,以28例老年性痴呆(AD)及21例正常老人为对照,分别用实时荧光定量PCR检测各组血小板中的ADAM10、BACE1基因表达水平,用ELISA法检测各组血浆中Aβ42含量。结果 3组中β-分泌酶(BACE1)基因表达水平有明显差异(P<0.05),AD组、MCI组的表达水平是正常老人的4.51倍、2.22倍。α分泌酶基因表达水平及Aβ42含量无明显差异(P>0.05),相关分析显示Aβ42含量与α、β-分泌酶基因表达水平无关(r=-0.1442,r=0.1611,P均>0.05)。结论 MCI患者血小板中的BACE1的基因表达上调可能与MCI的转向(向AD转化)有关。MCI患者应尽早接受相关的酶学检测并实施干预。     

冠状动脉CT和MR血管成像诊断粥样硬化斑块和狭窄的对比研究

目的 探讨不同成分的斑块对管腔狭窄的影响以及CT和MR血管成像（CTA、MRA）诊断不同成分斑块所致狭窄的准确性。方法 30例冠心病患者在2周内行冠状动脉CTA、MRA和冠状动脉造影（CAG）检查。CTA采用16层螺旋CT，MRA采用屏气三维快速稳态平衡进动（FIESTA）技术。CTA上将斑块分为非钙化和钙化斑块，由2名有经验的放射科医师双盲评价这2种斑块在CTA和MRA上引起的显著性狭窄（≥50％）。以CAG为标准，评价CTA和MRA诊断显著性狭窄的准确性和一致性。结果 30例冠心病患者CTA共发现53个斑块，其中有28个非钙化斑块和25个钙化斑块。28个非钙化斑块中，CAG显示非显著性狭窄（〈50％）7个，显著性狭窄（≥50％）21个。CTA和MRA诊断非钙化斑块显著性狭窄的敏感性和特异性分别为85．7％、85．7％和47．6％、71．4％。CTA与CAG一致性好（Kappa值为0．65）。25个钙化斑块中，CAG显示非显著性狭窄19个，显著性狭窄6个。CTA和MRA诊断钙化斑块显著性狭窄的敏感性和特异性分别为83．3％、31．6％和83．3％、73．7％，MRA与CAG一致性较好（Kappa值为0．46）。非钙化和钙化斑块在CAG上发生显著性狭窄的概率有统计学意义（X^2=11．78，P〈0．01）。结论 非钙化斑块和以非钙化成分为主的混合斑块是导致显著性狭窄的主要原因。完全钙化的斑块不引起或仅引起〈50％的狭窄。CTA诊断非钙化斑块引起的显著性狭窄有很好的准确性，而MRA评价严重钙化斑块引起的管腔变化有明显优势。     

平衡稳态自由进动序列非增强MR血管成像在糖尿病患者足部动脉成像中的应用研究

目的 评价基于血流敏感散相为准备脉冲的平衡稳态自由进动序列非增强MR血管成像(FSD-bSSFP NC-MRA,简称FSD-bSSFP),在糖尿病周围血管病变患者足部动脉成像中的临床应用价值.方法 对43例有足部症状的糖尿病患者采用FSD-bSSFP序列和三维对比增强序列(CEMRA)进行足部动脉成像.然后由2名有经验的放射科医师共同对2种成像技术的足部动脉图像质量、静脉污染和足部动脉分支的显示情况进行评分.采用Wilcoxon秩和检验对FSD-bSSFP和CEMRA图像质量、静脉污染情况、足背动脉及分支显示情况进行统计学分析;对2组图像足背动脉的信号强度(SI)、信噪比(SNR)和对比噪声比(CNR)采用配对t检验进行比较.结果 FSD-bSSFP的图像质量评分为(2.7±1.1)分,CE-MRA为(2.6±0.8)分,两种扫描序列的图像质量差异无统计学意义(Z=0.134,P＞0.05).FSD-bSSFP对足背动脉分支显示情况良好,为(3.2±0.9)分,CE-MRA为(2.5±0.9)分,两者间差异有统计学意义(Z=5.246,P＜0.05).FSD-bSSFP静脉污染为(1.8±0.4)分,CE-MRA为(2.1±0.8)分,两者间差异有统计学意义(Z=2.541,P＜0.05).FSD-bSSFP图像的SNR为148.6±26.7,CNR为88.3±19.0.3D CE-MRA图像的SNR为148.5±45.6,CNR为121.0±41.0.两者间SNR差异无统计学意义(t=0.013,P＞0.01),CE-MRA CNR高于FSD-bSSFP,差异有统计学意义(t=5.113,P＜0.05).结论 FSD-bSSFP非增强MRA可获得较好的足部动脉图像,可显示足背动脉及三级分支,为肾功能不全或其他原因不能使用对比剂的患者提供一个安全有效的补充方法.     

前S2抗原与乙型肝炎病毒复制关系的探讨

乙肝病毒(HBV)血清标志物检测是用于判断乙肝病人免疫反应状态的重要方法。乙肝病毒定量检测是衡量HBV感染复制水平有价值的标准。两者共同反映了病毒的复制的特征。近年来对HBV外膜的研究日趋深入,HBV外膜蛋白即HBsAg,分为S基因、前S1区段和前S2区段。经研究发现前S蛋白(PreS)     

两种麻醉方法在儿童体外循环心内直视术中的比较

[摘要] 目的 比较先天性心脏病患儿体外循环心内直视术时异丙酚复合异氟烷麻醉与异丙酚静脉麻醉的效果。方法 40例ASA I~II级先天性心脏病患儿随机分为异丙酚复合异氟烷麻醉组（Iso组）和异丙酚静脉麻醉组（C组）,每组各20例。两组患儿均采用静脉注射异丙酚1 mg / kg,芬太尼5 μg/ kg,维库溴胺0.15 mg/kg进行麻醉诱导。麻醉维持：C组用微量泵持续静脉输注异丙酚（150 μg/ kg.min）加芬太尼（0.05μg/ kg.min）;Iso组在C组基础上,在诱导后至体外循环开始前以及体外循环结束致手术结束时吸入1.0 MAC异氟烷;在劈胸骨前和转流前两组都追加异丙酚1 mg/kg,芬太尼5 μg/kg;肝素化(500IU/㎏)后常规建立CPB。两组患儿麻醉和手术实施过程均标准化。记录两组患儿CPB时间、主动脉阻断时间、心脏自动复跳率、术后拔管时间、重症监护室（ICU）停留时间;监测采集开放静脉通路时（To）、麻醉诱导后10 min（T1）、主动脉阻断后10~20 min（T2）和主动脉开放后10~20 min（T3）4个时点平均动脉压（MAP)、心率（HR）和中心静脉压（CVP);检测开放静脉通路时（To）、主动脉开放后2 h（T4）、术后24 h（T5）血浆肌钙蛋白I（cTnI）含量的变化;观察术后多巴酚丁胺使用情况。结果 Iso组和C组患儿CPB时间（44.5±8.2 min vs 45.8±9.7 min）、主动脉阻断时间（18.4±7.3 min vs 18.1±6.6 min）、心脏自动复跳率（98% vs 96%）、术后气管导管留置时间（14.4±3.8 h vs 15.5±3.4 h）和ICU滞留时间（30.2±6.5 h vs 32.1±6.9 h）无明显差异（P>0.05）;两组患儿术中血流动力学稳定,同时点的MAP、CVP和HR比较无明显差别（P>0.05）;两组患儿在T4和T5时点血浆CTnI含量较T0时点明显增高（P<0.01）,但Iso组患儿血浆CTnI含量在T4和T5时点明显低于C组患儿（6.26±2.10 ng/ml vs 8.40±2.28 ng/ml,3.80±1.72 ng/ml vs 6.11±1.65 ng/ml,P<0.05）;术后Iso组患儿需要使用多巴酚丁胺的比例和使用多巴酚丁胺的时间与C组患儿无显著差异（30% vs 40%,16.4±14.7 h vs 19.8±18.2 h,P>0.05）,但Iso组患儿多巴酚丁胺使用总量显著低于C组患儿（84.6±96.1 mg vs 96.9±100.5 mg, P<0.05）。结论 两种麻醉方法均能满足先天性心脏病患儿体外循环心内直视术麻醉需要,但异丙酚复合异氟烷麻醉较异丙酚静脉麻醉具有更好的心肌保护作用,而且可以减少术后多巴酚丁胺的用量。     

变异型吉兰-巴雷征12例临床分析

经典型吉兰-巴雷综合征(GBS)又称急性感染性多发性神经根神经病,是由体液和细胞免疫共同介导的单相性自身免疫性疾病,临床表现为急性、弛缓性肢体瘫痪,腱反射消失,面瘫和周围性感觉障碍;脑脊液蛋白-细胞分离,周围神经以脱髓鞘电生理改变为特征,诊断并不困难.