小鼠螺旋神经节神经元髓鞘的发育

目的研究小鼠螺旋神经节神经元髓鞘的发育,探讨螺旋神经节神经元的发育成熟过程。方法应用透射电镜观察３２只１～６０天龄小鼠螺旋神经节神经元髓鞘的发育。结果新生小鼠螺旋神经节神经元为形态相同的幼稚细胞,由卫星细胞及其伸出的单层突起包绕,无致密髓鞘形成;出生后７天,Ｉ型神经元出现,Ｉ型神经元局部致密髓鞘开始形成;出生后１０～１４天,Ｉ型神经元多层致密髓鞘出现;出生后３０天,可见一种细胞形态和Ｉ型神经元相似而有明显致密髓鞘的神经元;出生后６０天,螺旋神经节神经元髓鞘基本发育成熟。螺旋神经节神经元的发育成熟由底回向顶回逐步发展。结论出生后７～１４天是螺旋神经节神经元发育和成熟的重要阶段。     

小鼠前庭器官的形态发生

目的了解小鼠前庭器官发育的形态学特征及演变规律.方法利用光镜、扫描电镜、透射电镜观察C57BL/6小鼠从胚胎第8天到刚出生期间前庭器官发育过程中的形态变化.结果 C57BL/6小鼠的前庭器官在胚胎第10.5天开始发育,胚胎第11.5天形成上、后半规管始基,到胚胎第12天水平半规管始基才逐渐形成,椭圆囊已出现许多原始的感觉纤毛,而到胚胎第13天,球囊才开始发育;到胚胎第15天,椭圆囊、球囊、壶腹嵴初具成熟形态,毛细胞和支持细胞也初具雏形,到出生时,前庭器官已基本发育成熟.结论 C57BL/6小鼠前庭感觉细胞在胚胎第12天开始分化,感觉上皮的形态从胚胎第12天至第18天变化最明显.椭圆囊、壶腹嵴的发生较早,随后才形成球囊,到出生时前庭感觉器官已基本发育成熟.     

新生大鼠耳蜗增殖细胞的培养鉴定及超微结构观察

目的 研究新生大鼠耳蜗内是否存在增殖细胞,以及该增殖细胞能分化为何种细胞.方法 分离新生SD大鼠耳蜗细胞并进行培养,加入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(5-bromo-2-demoxyuridine,BrdU)检测细胞的增殖状态,通过免疫荧光鉴定细胞球及分化细胞的性质.分离48个耳蜗Corti器,采用数字表格法随机分成4组进行细胞培养:对照组、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)组、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)组和EGF+bFGF组,每组12个,定量计数单个耳蜗培养细胞球的数量,结果进行方差分析.采用透射和扫描电镜观察细胞球的超微结构.结果 耳蜗Corti器细胞培养可见细胞球形成,90.1%球内细胞BrdU表达阳性,且大部分细胞巢蛋白表达阳性.分化细胞表达毛细胞标志物肌球蛋白7A、espin及鬼笔环肽阳性,神经元标志物神经丝蛋白(neurofilament M,NF-M)表达阳性,并且可见肌球蛋白7A和BrdU,espin和BrdU,以及NF-M和BedU双标阳性的分化细胞.对照组平均((-x)±s,以下同)每个耳蜗Corti器的增殖细胞数量为(45.3±23.0)个,EGF组(86.2±34.1)个,bFGF组(96.5±33.6)个,EGF+bFGF组(131.2±47.0)个.除EGF组和bFGF组之间P＞0.05外,其余各组之间P值均＜0.05,差异具有统计学意义.扫描和透射电镜下细胞球内细胞呈圆球形,大小均匀一致,表面具有众多微绒毛.胞质内有丰富的内质网、微管、微丝和线粒体等细胞骨架结构和细胞器,相邻细胞之间可见紧密连接、桥粒与缝隙连接.结论 大鼠耳蜗内存在增殖细胞,可分化为具有纤毛样结构的毛细胞及神经元.EGF和bFGF均可诱导增殖细胞分裂增殖.该增殖细胞的超微结构显示其具有早期幼稚细胞发育的特征.     

庆大霉素损伤后豚鼠前庭感觉上皮细胞凋亡和再生

目的 研究豚鼠前庭毛细胞庆大霉素损伤后前庭感觉上皮细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法 成年豚鼠肌肉注射庆大霉素１００ｍｇ／ｋｇ／ｄ连续１４ｄ,停用庆大在霉素后１ｄ和１０ｄ。腹腔注射Ｂｒｄｕ ３００ｍｇ／ｋｇ ６ｈ后处死实验动物,免疫组化显色壶腹嵴可见Ｂｒｄｕ标记细胞,同时应用ＴＵＮＥＬ技术原位显示凋亡细胞,观察应用庆大霉素后１ｄ和１０ｄ壶腹嵴毛细胞损伤区域细胞凋亡和细胞增殖状况,结果 损伤后１ｄ,     

鸡内耳毛细胞标志物的比较研究

目的：为研究内耳毛细胞发育和再生提供有价值的标志物。方法：新生鸡内耳冷冻切片,间接免疫荧光细胞化学技术染色毛细胞抗原（HCA）、Espin和肌浆球蛋白7a基因,观察上述基因在毛细胞中的表达部位和强度。结果：HCA、Espin和肌浆球蛋白7a在听毛细胞和前庭毛细胞均表达;HCA染色毛细胞顶部和纤毛,Espin染色毛细胞纤毛和皮板,肌浆球蛋白7a为典型的细胞质染色。结论：HCA、Espin和肌浆球蛋白7a基因是研究毛细胞发育和再生的理想标志物,结合肌动蛋白-F染色毛细胞纤毛可以更好地定性和定量研究内耳毛细胞发育和再生。     

出生后大鼠螺旋神经节神经元损伤的病理变化

目的 证实出生后第2周大鼠螺旋神经节神经元对耳毒性药物敏感。方法 选用出生后7d SD大鼠36只，连续14d肌注新霉素，每天150mg／kg，分别于停药后1、7、14、28d、3月和6月各处死6只。取平行蜗轴的超薄切片，透射电镜下观察底回、中回螺旋神经节神经元。结果 大鼠螺旋神经节神经元变性继发于毛细胞和支持结构的损伤；停药1d组存在细胞凋亡现象；损伤早期神经元发育延迟，损伤晚期神经元由成熟向未分化型改变。结论 出生后第2周是大鼠螺旋神经节神经元发育的重要阶段，此阶段对药物的敏感性高。     

新霉素损伤后大鼠耳蜗新发现细胞的超微结构特征

继在新霉素损伤后幼年大鼠耳蜗中发现一种新发现细胞，暂命名为“小胶质样细胞”后，最近的研究证实了该发现的可重复性，并发现该细胞可以演变为毛细胞样细胞。通过进一步的透射电镜细胞超微结构的研究，发现了一些新发现细胞的特征，并根据目前获得的结果，对其来源做出进一步探讨。     

甘油开放血迷路屏障的研究

血-迷路屏障是维持内耳内环境平衡的一个重要结构,可以调节从血液传递到内耳液体的各种物质的浓度,在血液成分发生改变时,可使迷路液体的成分保持稳定,因此,屏障的调节功能对於保持内耳的正常功能和对於内耳疾病的预防和治疗有重要意义。实验证明甘油具有开放血-迷路屏障的作用。本实验包括两个方面的内容:1.用铁蛋白作为示综剂,观察甘油     

内淋巴积水动物模型的制备

目的为梅尼埃病的实验研究提供可靠的动物模型.方法以豚鼠为实验对象,介绍应用枕后硬脑膜外径路阻塞内淋巴囊制备内淋巴积水动物模型的方法.结果术后4周可见耳蜗各回前庭膜不同程度向前庭阶膨出.结论枕后硬脑膜外径路阻塞内淋巴囊是一种能造成内淋巴积水的造模方法.