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91.
苦参素改变端粒酶活性对人肝癌细胞株HepG2、QGY体外增殖影响的研究 总被引:11,自引:0,他引:11
[目的]观察苦参素对人肝癌细胞株HepG2、QGY体外增殖和端粒酶活性的影响.[方法]应用MTT法检测HepG2与QGY增殖抑制的程度;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡;PCR-ELISA法检测端粒酶活性的变化.[结果]苦参素对HepG2和QGY细胞增殖的抑制随着时间的延长而增加,具有时间依赖性,各浓度时间之间均有显著性差异(P<0.001);从细胞周期分析,苦参素能阻滞HepG2和QGY细胞周期进程,同时诱导细胞凋亡,各细胞之间均有显著性差异(P<0.001);苦参素对细胞端粒酶均有时间和剂量依赖性,各组间均有显著性差异(P<0.001).[结论]对端粒酶活性的抑制可能是苦参素发挥抗肿瘤作用的机制之一. 相似文献
92.
阿魏酸钠对培养大鼠大脑微血管内皮细胞缺氧损伤的保护作用 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究缺氧对脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)的损伤及阿魏酸钠(Sodium ferulate)对它的保护作用.方法:取体外培养的大鼠脑皮质微血管内皮细胞,置于95%N2和5%CO2的缺氧盒中12h造成内皮细胞缺氧.用透射电镜观察BMEC的超微结构变化.用内皮细胞线粒体活性和内皮细胞死亡率来评价内皮细胞活力,并用乳酸脱氢酶(LDH)漏出量作为评价损伤的指标.结果:体外培养大鼠脑皮质BMEC缺氧12h后,细胞超微结构损伤,细胞存活率及线粒体活性明显降低,LDH释放量显著增加.阿魏酸钠可显著对抗缺氧对BMEC的损伤.结论:阿魏酸钠对大鼠脑皮质BMEC缺氧损伤具有保护作用. 相似文献
93.
小鼠肝癌细胞H22源exosomes的制备及其免疫相关蛋白的初步研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 分离提取和电镜观察小鼠肝癌细胞H22分泌的exosomes,并检测其含有的蛋白成分,为exosomes作为肿瘤疫苗提供理论依据。方法 超速分级离心和蔗糖密度梯度离心纯化得到exosomes,并经透射电镜观察鉴定,运用肽质量指纹谱质谱分析和Western blot检测exosomes含有的蛋白成分。结果 从小鼠肝癌细胞H22中提取出exosomes,直径约为20-90 nm的膜性囊泡,呈圆形或椭圆形。该exosomes含有热休克蛋白(HSP)70、ICAM-1、延伸因子G2、动力蛋白轻链A、C-myc和Vav-2蛋白。结论 超速分级离心和蔗糖密度梯度离心提取纯化exosomes的方法具有可行性,小鼠肝癌细胞H22源exosomes表达有与抗原呈递相关蛋白(HSP70、ICAM-1),迁移相关蛋白(动力蛋白轻链A),粘附相关蛋白(ICAM-1),细胞骨架相关蛋白(延伸因子G2),肿瘤相关蛋白(C-myC蛋白、Vav-2蛋白),具有免疫原性。 相似文献
94.
目的:探讨解聚复肾宁(黄芪、地黄、黄连、丹参、姜黄、葛根等)(JJFSN)治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:高糖诱导系膜细胞(MC)增殖以及细胞外基质(ECM)分泌,制备不同浓度JJFSN含药血清作用于体外培养的MC,用MTT法检测细胞增殖,放射免疫技术(RIA)检测细胞培养上清中Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层黏连蛋白(Ln)的含量。结果:JJFSN含药血清可抑制高糖诱导的MC过度增殖(P0.05),并且这种作用具有药物剂量和时间依赖关系。同时,JJFSN可逆转高糖对ColⅣ和Ln分泌的影响,降低MC培养上清中ColⅣ和Ln的含量(P0.05),并且这种作用随着JJFSN剂量的增加而增强。结论:JJFSN抑制高糖诱导的MC过度增殖并减少ECM的过量分泌,可能是其防治DN早期的作用机制。 相似文献
95.
奥沙利铂抗人结肠癌细胞株HT29增殖及其机制的研究 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制.方法 采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡的情况;免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白及凋亡相关基因蛋白的表达.结果 奥沙利铂对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性.奥沙利铂作用72 h后,电镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测发现细胞阻滞于G2/M期,G0/G1、S期细胞减少及出现凋亡峰;免疫细胞化学显示Bax和Fas表达增强,CyclinB1、Bcl-2、PCNA表达减弱.结论 奥沙利铂对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡有关. 相似文献
96.
目的 利用特异性PI3K抑制剂wortmannin抑制P13K信号通路,研究其对人甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1迁移和侵袭能力的影响,并初步探索其作用机制.方法 培养CGTHW-1细胞,用MTT法筛选wortmannin最佳作用浓度及时间.将细胞分为实验组和对照组(分别在血清饥饿和含血清两种条件下培养).对照组细胞未给予任何处理,实验组细胞用wortmannin进行处理.通过划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别观察wortmannin对细胞迁移及侵袭能力的影响.利用FITC标记的鬼笔环肽进行微丝免疫荧光染色,观察在wortmannin作用下细胞的形态学变化.免疫细胞化学SP法及半定量RT-PCR法检测wortmannin对细胞Racl蛋白、mRNA表达的影响.结果 在含血清培养液培养条件下,经wortmannin处理后,划痕伤口愈合速度减慢,CGTHW-1细胞侵袭至小室下层细胞数(13.8±3.03个)明显低于对照组(41.6±6.95个,P<0.01);wortmannin显著降低Racl蛋白及mRNA的表达(P<0.05).而在血清饥饿条件下,两组细胞迁移均受抑制,侵袭细胞数组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 wortmannin能有效抑制人甲状腺癌细胞迁移侵袭,其作用机制可能是通过抑制PI3K下游分子Racl,从而引起细胞骨架重构.PI3K及Racl可能成为抑制甲状腺癌转移的关键性分子. 相似文献
97.
目的:探讨埃兹蛋白(Ezrin)对人高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系细胞增殖和侵袭能力的影响.方法:采用乳腺癌细胞系MDA-MB-435s,利用细胞穿透人工基底膜能力的差异筛选出具有高、低转移潜能的乳腺癌细胞系,采用免疫组织化学法、 RT-PCR、Western印迹法和放射免疫显像(radioimmunoimaging, RII)方法检测Ezrin蛋白在高、低转移潜能乳腺癌细胞中的表达情况.采用MTT法检测细胞增殖能力及黏附率.结果:经人工基底膜成功分离出具有高、低转移潜能的MDA-MB-435s细胞.高转移潜能MDA-MB-435s细胞中Ezrin在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移潜能的MDA-MB-435s细胞,差异有统计学意义(P值均< 0.001);高转移潜能MDA-MB-435s细胞的增殖能力和黏附率均高于低转移潜能的MDA-MB-435s细胞,差异有统计学意义(P值均<0.001);131I标记的抗Ezrin抗体在接种高转移潜能MDA-MB-435s细胞的裸鼠肿瘤部位的放射性浓聚要强于接种低转移潜能MDA-MB-435s细胞的裸鼠肿瘤部位,差异有统计学意义(P<0.001).结论:Ezrin在高转移潜能乳腺癌细胞中的表达水平明显高于低转移潜能细胞,2者的增殖、黏附和侵袭力都有明显差异,上述结果为Ezrin用于乳腺癌的诊断和治疗提供了理论依据. 相似文献
98.
目的 :为研究羟基喜树碱 (Hydroxycamptothecine ,HCPT)对体外培养的兔晶体上皮细胞 (rabbitlensep ithelialcells ,RLECs)生长的影响 ,探索预防后发性白内障的药物。方法 :2~ 3月龄健康家兔 2 0只 ;DMEM/F1 2 培养基 ;胎牛血清 ;MTT ;细胞培养瓶 ;96孔酶标板 ;全自动酶标光度仪 ;倒置显微镜 ;透射电子显微镜 ;离心机。 ( 1 )取 2~ 3代的对数生长期RLECs于 96孔板中 ,置入CO2 孵箱中培养 2 4h后 ,将不同浓度的HCPT分别作用 2 4及 72h ,用MTT测定法观察其… 相似文献
99.
目的 :体外观察 5-氟脲嘧啶 ( 5-fluorouracil,5-Fu)及丝裂霉素 (mitomycinC ,MMC)合用对人胃癌细胞株 (SGc - 790 1及BGc - 82 3)的相互作用。方法 :采用MTT法利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两种药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应 (抑制率fa)也增加 ;5-Fu用在细胞株SGc - 790 1时其中效浓度Dm( μmol/L)为 1 96 32 ,而MMc的Dm为 0 776,两药合用时的Dm为 1 0 3 36;而 5-Fu用在细胞株BGc - 82 3时其中效浓度Dm为 1 64 48,MMc的Dm为 0 886,两药合用时的… 相似文献
100.
金雀异黄素与5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞的抑制作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究金雀异黄素(genistein,Gen)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对人胃癌细胞SGC-7901的抑制作用。方法采用MTT法检测Gen和5-FU对SGC-7901细胞的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期分布,并在透射电镜下观察细胞超微结构改变。结果Gen和5-Fu单用或联合应用对胃癌SGC-7901细胞的生长均有显著的增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性。两药联合应用时,当药物效应在0.2~0.8时,具有协同或相加作用(CI≤1);18.8btmol/L的Gen作用后,62.97%的SGC-7901细胞阻滞在G2/M期;8.84μmol/L的5-FU作用后,63.76%的SGC-7901细胞阻滞在s期;3.06μmol/L的Gen与7.96μmol/L的5-Fu联合应用后,67.46%的SGC-7901细胞阻滞在G0/G1期。Gen和5-FU均可诱导SGC-7901细胞凋亡。结论Gen与5-FU通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制胃癌细胞的生长,对胃癌细胞的增殖抑制具有协同作用。 相似文献