中医整体观念与皮肤病关系探析

1皮肤结构与生理的整体性 中医认为肤腠、玄府、毛发、爪甲是人体不可分割的一部分.<杂病源流犀烛>曰:"皮也者,所以包含肌肉,防卫筋骨者也."说明肌肤具有类似墙垣的防护功能.<灵枢经释·本脏>曰:"肺应皮.皮厚者,大肠厚;皮薄者,大肠薄;…;皮滑者,大肠滑…;心应脉.皮厚者,脉厚;皮薄者,脉薄;脉薄者,小肠薄;皮缓者,脉缓;…"说明皮肤的厚薄与脏腑功能之关系十分密切.     

人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶重组蛋白的构建、纯化及酶活性研究

目的 构建人细胞内Ⅰ型血小板激活因子乙酰水解酶(PAF-AH) 重组蛋白并加以纯化,利用不同底物研究酶活性.方法 细胞内Ⅰ型PAF-AH β亚基基因进行PCR扩增,目的 基因经纯化、连接载体转化大肠杆菌DH5α感受态细胞构建重组蛋白,提取质粒行琼脂糖凝胶电泳、NdeⅠ和Hind Ⅲ双酶切及测序鉴定.鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) pLysS感受态细胞诱导蛋白表达和纯化,15%SDS-PAGE和Western blotting鉴定.分别以乙酸苯酯、l-O-hexadecyl-2-deoxy-2-thioacetyl-sn-glycero-3-phosphocholine(2-Thio PAF)和1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphatidylcholine为底物(后两者为血浆型PAF-AH的商业化底物),应用分光光度法检测纯化后重组蛋白的酶活性,以血浆型PAF-AH作为阳性对照.结果 人细胞内PAF-AHⅠ型β亚基重组蛋白构建正确,纯化后在大肠杆菌感受态细胞中诱导表达.与阳性对照血浆型PAF-AH比较,纯化后的重组蛋白同样能够水解乙酸苯酯,具有芳香酯酶活性;能快速水解2-Thio PAF,但不能水解1-myristoyl-2-(4-nitrophenylsuccinyl) phosphatidylcholine.结论 成功构建人细胞内Ⅰ型PAF-AH重组蛋白,其对血浆型PAF-AH的两个商业化底物具有完全不同的水解能力,以此可快速区分细胞内和血浆型PAF-AH.