磁共振成像对活体兔结膜下药物注射后渗透性的评价作用

目的使用磁共振成像（magnetic resonance imag-ing,MRI）评价兔结膜下药物注射后的渗透性和清除率,探讨一种能够在活体内动态观察的眼部药代动力学检测方法。方法健康新西兰白兔24只,按随机数字表法分为3组,每组8只,取右眼作为实验眼,对侧眼作为对照眼。以MRI的造影剂钆喷酸葡胺（Gadolinium-diethylene triamine pentaaceticacids,Gd-DTPA）作为示踪剂,分别于结膜下注射0.5mol/L、0.05mol/L、0.005mol/L造影剂0.1ml,对照眼注射0.9%生理盐水0.1ml。采用MRI扫描仪,于注药后1h内每间隔15min左右扫描1次,2～3h内间隔30min左右扫描1次,通过MRI观察药物的渗透性、眼内分布及结膜下的清除速度。0.5mol/L组于术前和术后24h进行角膜内皮镜检查,观察角膜内皮细胞密度、内皮细胞面积变异系数、六边形细胞百分数和中央角膜厚度。使用Excel绘制信号增强率对时间曲线,采用配对t检验分析角膜内皮细胞密度变化。结果MRI扫描可见：0.5mol/L组前房及睫状体信号明显增强,而眼后段则未探测到高信号;0.05mol/L组前房信号无明显增强,接近注射位置的睫状体信号增强;0.005mol/L组眼前、后段的药物渗透浓度均低于MRI探测阈值。睫状体部位对药物经巩膜的被动转运阻力最低,结膜下药物的体积和浓度随时间逐渐下降。结膜下Gd-DTPA用药前后,0.5mol/L组的角膜内皮细胞密度、内皮细胞面积变异系数、六边形细胞百分数和中央角膜厚度差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论MRI作为非侵袭、动态、实时的检查方法可于活体内定量分析结膜下药物注射后的渗透效率,是对传统药代动力学研究方法的有力补充。     

带角膜缘的自体结膜瓣移植术治疗翼状胬肉合并结膜囊肿

目的:观察带角膜缘的自体结膜瓣移植术治疗翼状胬肉合并结膜囊肿患者的疗效.方法:收集华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科于2013-08/2015-08住院接受手术的翼状胬肉患者126例188眼,其中翼状胬肉合并区域结膜囊肿者11例11眼作为观察组,余为对照组,所有患者均行裂隙灯显微镜检查、眼前节照相、眼前节OCT检查,并采用翼状胬肉颈部宽度×遮盖角膜的长度计算翼状胬肉的大小,采取翼状胬肉切除联合带角膜缘的自体结膜瓣移植的手术方式,切除物均行病理切片HE染色观察,术后随访4~28mo.结果:观察组术后病检结果均证实为翼状胬肉合并结膜囊肿,囊壁完整,内附单层上皮细胞.观察组翼状胬肉大小平均为6.9±1.7mm2,对照组大小平均为6.3±1.8mm2,两组间比较无统计学差异(P>0.05).观察组术后角膜上皮愈合时间平均为2.1±0.9d,对照组术后角膜上皮愈合时间平均为1.9±0.8d,两组间比较无统计学差异(P>0.05).随访期内观察组术后未见翼状胬肉复发,对照组术后2例2眼复发.结论:带角膜缘的自体结膜瓣移植治疗翼状胬肉合并结膜囊肿是一种安全有效的治疗方法,结膜囊肿术后对翼状胬肉的复发率无显著影响.     

角膜基质及结膜下单次注射康柏西普治疗角膜新生血管的疗效及安全性

目的　观察角膜基质及结膜下单次注射康柏西普治疗角膜新生血管的疗效及安全性。方法　采用前瞻性自身对照研究方法,对８例角膜新生血管患者行角膜基质及结膜下各注射康柏西普约２０μＬ（０．２ｍｇ）。通过观察角膜新生血管的形态及面积变化评价其治疗效果,通过视力及眼压变化评价其安全性。结果　８例患者术前第１天、术后第７天及术后３个月的角膜新生血管面积分别为（１７．８３±５．６４）ｍｍ２、（１２．５８±４．５２）ｍｍ２ 和（１４．６４±４．１８）ｍｍ２,患者术后第７天和３个月的角膜新生血管面积与术前第１天相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后第７天视力和术前第１天相比,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。术后第１天和第７天眼压与术前第１天相比,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　角膜基质及结膜下单次注射康柏西普可减少角膜新生血管面积,而短期内对视力及眼压无显著影响。     

磁共振技术检测透明质酸钠对钆喷酸葡胺角膜渗透性的影响

目的利用磁共振成像（MRI）及其造影剂,探讨加入增黏剂透明质酸钠对钆喷酸葡胺（Gd-DTPA）角膜渗透性的影响。方法 16只新西兰白兔按随机数字表法分为2组,每组8只兔,均取右眼为实验眼,分别点用质量分数23.45%Gd-DTPA滴眼液为Gd-DTPA组、23.45%Gd-DTPA＋质量分数0.2%透明质酸钠滴眼液为透明质酸钠组,每5 min点眼1次,每次50μL,共6次。左眼为正常对照眼,不做任何处理。此后进行MRI连续扫描,观察用药前后兔眼结膜囊、前房、后房及玻璃体内示踪剂的信号变化。结果正常兔眼前房MRI平扫呈均匀低信号。Gd-DTPA组结膜囊信号在用药40 min消失,透明质酸钠组结膜囊内Gd-DTPA信号在用药后60 min消失。与Gd-DTPA组比较,透明质酸钠组结膜囊内和前房示踪剂信号增强明显,60 min时Gd-DTPA组前房信号增强率为19.63%,透明质酸钠组为53.42%。2组兔点眼后后房及玻璃体信号强度均无变化。结论透明质酸钠可提高与Gd-DTPA性质类似药物的角膜通透性,MRI能够在活体内动态、实时地检测滴眼液的角膜渗透性,是对传统药物代谢检测方法的补充。     

氯离子通道-3反义寡核苷酸对内皮素-1促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞的抑制作用

目的 观察氯离子通道-3(chloride channel 3,CIC-3)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,AS-ODN)对内皮素1(endothelin-1,ET-1)促增殖体外培养的牛角膜内皮细胞(bovine corneal endothelial cells,BCECs)的抑制作用.方法 BCECs细胞悬液接种培养12 h后,通过脂质体介导转染不同浓度的ClC-3寡核苷酸.体外培养BCECs 24 h后加入200 pmol·L-1 ET-1,继续培养48 h.通过倒置荧光显微镜观察BCECs寡核苷酸的摄取.采用逆转录聚合酶链反应、免疫印迹法检测ClC-3 mRNA和蛋白的表达.采用MTT法观察BCECs增殖状况,计算细胞存活率,同时应用流式细胞仪检测细胞周期时相的变化,计算细胞增殖指数.结果 寡核苷酸可被培养的BCECs摄取.ClC-3 mRNA与蛋白的表达变化呈平行关系.与不加时相比,ClC-3 AS-ODN浓度依赖性地减少BCECs ClC-3 mRNA和蛋白的表达,同样也浓度依赖性地降低BCECs MTT吸光度值(OD值)和细胞存活率.经100 mg·L-1ClC-3 ASODN处理后,与对照组相比,细胞G0/G1期细胞比例明显增高,S期及G2期细胞比例则明显降低,出现明显的凋亡峰,增殖指数明显下降.结论 ClC-3 AS-ODN可能通过减少ClC-3 mRNA和蛋白的表达,浓度依赖性抑制ET-1对体外培养BCECs的增殖作用,并使细胞周期停滞在G1期.     

内皮素-1对体外培养人小梁网细胞纤维连接蛋白及Ⅰ型胶原表达的影响

目的观察内皮素-1（ET-1）对人小梁网细胞（TMCs）细胞外基质纤维连接蛋白（FN）、Ⅰ型胶原（COL Ⅰ）的影响。方法取死亡24h内尸眼小梁网组织,行TMCs原代和传代培养,并用FN、层黏连蛋白（LN）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和Ⅷ因子相关抗原（FⅧRAg）鉴定为人TMCs后,取传3代的人TMCs,给予不同浓度ET-1（10^-9、10^-8、10^-7mol／L）孵育72h后,免疫荧光和Western blot观察ET-1对TMCs中FN、COLⅠ表达的影响;然后取传3代的人TMCs,分别给予10^-7mol／L ET-1、10^-7mol／L ET-1＋10^-7mol／L ETA受体拈抗剂、10^-mol／L ET-1＋10^7mol／L ETB受体拈抗剂后孵育72h,Western blot观察ET受体拮抗剂对FN、COL Ⅰ表达的影响。结果研究受到伦理委员会的批准,取材前征得供体家属的知情同意。培养的细胞形态多样,含少许色素颗粒,FN、LN、NSE染色均呈阳性反应,FⅧRAg呈阴性反应。人TMCs与10^-9～10^-7mol／L ET-1共孵育后FN表达上调（F=18．41,P〈0．05）;与10^-8mol／L、10^-7mol／L ET-1共孵育后COLⅠ表达上调（F=39．81,P〈0．05）,并呈浓度依赖性,10^-7mol／L时作用最明显;给予ETA受体拮抗剂后,与ET-1组相比,FN、COLⅠ的表达均降低（qFN=7．213,P〈0．05;qCOLⅠ=6．187,P〈0．05）,但给予ETB受体拮抗剂后,FN、COLⅠ的表达均无明显变化。结论ET-1能够促进体外培养的人TMCs中FN、COLⅠ的表达,其机制可能是通过激动ETA受体而非ETB受体发挥作用的。     

Effects of Vascular Endothelial Cell Growth Factor on Fibrovascular Ingrowth into Rabbit＇s Hydroxyapatite Orbital Implant

The effects of different concentrations of vascular endothelial cell growth factor (VEGF) on the fibrovascular ingrowth into rabbits hydroxyapatite orbital implant were investigated. Twelve New Zealand white i‘abbits were divided into 3 groups and received hydroxyapatite orbital implant surgery in their right eyes. Before and after the operation, the implants were treated with I0 ng/ml VEGF, 100 ng/ml VEGF, or normal saline as control group. The animals received technetium bones scan at 2, 4, and 6 weeks postoperatively. The mean radioactivity counts within region of interest (ROI) of the surgery eye (R) and the non-surgery eye (L) in the same animal were tested,and the R/L ratios were calculated. The implants were harvested at 6th weeks and examined histopathologically. The results showed that at second week, there was no significant difference in mean R/L ratios between VEGF group and control group (F=2.83, P=0. 111); At 4th week (F=7. 728, P=0. 011) and 6th week (F=7. 831, P=0. 011) postoperatively, the mean ratios in VEGF groups were significantly higher than that in control group. At 6th week postoperatively,the fibrovascularization rates in VEGF groups were higher than in control group significantly (F=8. 711, P=0. 008). It was suggested that VEGF could promote the fibrovascular ingrowth into hydroxyapatite orbital implant, thus might shorten the time required for complete vascularization of the HA orbital implant.     

人不同部位泪道黏膜及上皮干细胞的免疫组织学研究

摘要:目的 了解人各段泪道黏膜及上皮干细胞的解剖及免疫学特征。方法 从捐献尸体取泪道组织,显微镜下解 剖获得厚约1mm 的泪道黏膜及黏膜下组织,将不同部位的泪道黏膜组织制成病理切片,行苏木精-伊红(HE)染色及 VIM、p63α、c-Kit、CK19、PCK 染色。显微镜下观察染色情况。结果 人的上下泪点、上下泪小管、泪总管这几个部位的 HE染色表现一致,显示其黏膜上皮为复层扁平上皮,表层细胞为扁平状,中间的数层细胞为多角形,最深层的基底细胞 为矮柱状。泪囊和鼻泪管的 HE染色表现一致,显示其黏膜上皮为两层,表层的柱状上皮和基底层的扁平上皮。不同部 位的泪道黏膜免疫荧光染色均显示:上皮细胞全层 PCK 及 CK19染色阳性,c-Kit及 VIM 染色阴性;基底层细胞p63α染 色阳性。结论 人的上泪道与下泪道的黏膜组织结构不同,但其黏膜上皮基底层细胞均 p63α染色阳性,为潜在的上皮 干细胞。     

隐匿性眼表异物致眼部损伤的临床特点分析

目的分析隐匿性眼表异物致眼部损伤的临床特点。方法回顾性病例研究。收集华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科2019年1月至2020年10月接诊的隐匿性眼表异物致眼部损伤的24例(24眼)临床资料, 分析其临床表现、体征及诊断方法中的共同特点。结果本研究中, 男性11例(11眼), 女性13例(13眼), 年龄4～71(42.29±19.37)岁, 病程7～245(53.21±62.03)d。所有患者在就诊时均未述外伤史, 且均有≥2次就诊经历。患者主诉主要包括异物感(16例)、眼痛(5例)、流泪(4例)、视力下降(4例)、分泌物增多(1例)。体征主要包括结膜充血(13例)、眼睑痉挛(3例)、角膜溃疡(5例)、结膜肉芽肿(2例)。行角膜荧光素染色后, 20例(83.33%, 20/24)患者角膜荧光素染色阳性, 3例(12.50%, 3/24)患者结膜荧光素染色阳性。在溃疡或角膜荧光素染色阳性对应部位发现异物。睫毛(45.83%, 11/24)是发现最多的隐匿性眼表异物, 而上睑结膜/上穹隆(45.83%, 11/24)是隐匿性异物最常见的位置。5例角膜溃疡, 结膜囊内取出谷壳的患者结膜...     

自体角膜缘干细胞移植术治疗角膜缘型乳头状瘤的护理

目的总结角膜缘乳头状瘤患者行肿瘤切除联合游离结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术患者的护理要点。方法对9例角膜缘乳头状瘤患者行肿瘤切除联合游离结膜瓣自体角膜缘干细胞移植术患者实施有针对性的护理。结果本组患者随访观察6个月以上,未见新生物复发,角膜缘干细胞供区无干细胞失代偿表现手术后病理证实均为角结膜乳头状瘤。结论做好移植片的观察、疼痛、预防感染的护理,出院时做好出院指导和卫生宣教,是保障手术治疗效果的关键。